汤华
- 作品数：103 被引量：282H指数：9
- 供职机构：天津医科大学更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金天津市科技发展战略研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学农业科学更多>>
- 治疗性基因沉默在神经系统疾病中的研究
- 2006年
- 唐晓燕汤华
- 关键词：RNA干扰神经系统疾病基因沉默
- 含悬挂羧基手臂聚乳酸材料的内皮细胞黏附及其细胞活性被引量：3
- 2008年
- 为了考察内皮化材料表面的细胞活性,在前期工作的基础上,分别在聚乳酸(PLA)、乳酸-苹果酸共聚物(PLMA),以及含悬挂羟基或羧基的乳酸-苹果酸共聚物膜(PLMAHE,PLMACA)表面种植人脐静脉内皮细胞(HUVEC),成功地制备了内皮化表面.通过测定内皮化材料表面内皮细胞释放的内皮型一氧化氮合酶(eNOS)以及一氧化氮的释放量,间接考察了内皮细胞的抗凝血活性;另外,通过内皮化表面的血小板黏附实验,直接观察了血小板在内皮细胞上的黏附情况.实验结果表明,含羧基材料表面的内皮细胞活性比PLA和PLMAHE的高;相对其它材料PLMACA能更有效地保留黏附于其表面内皮细胞的活性,其单位内皮细胞的eNOS以及NO的释放量分别为(41.8±8.1)μmol/104cells和(0.76±0.16)U/104cells.电镜照片(SEM)显示,各种材料表面的内皮细胞均能有效地减少血小板的黏附与聚集;在内皮细胞脱落的区域,PLMACA仍能较好地实现其抑制血小板黏附的功能,有望成为新型血管修复(替代)材料.
- 王珺王蔚刘媛朱晓翠袁直汤石明刘民汤华
- 关键词：内皮细胞细胞活性细胞黏附聚苹果酸
- 递呈乳腺癌细胞MCF-7肿瘤抗原的树突状细胞对T细胞的激活被引量：2
- 2007年
- 目的:在体外利用细胞因子的诱导获取树突状细胞(DC),并观察递呈肿瘤抗原后的成熟DC对T细胞的激活作用。方法:健康人外周血单个核细胞(PBMC)在体外用细胞因子诱导获取DC,并经乳腺癌细胞MCF-7肿瘤细胞裂解物体外冲击,再以1∶5的比例将致敏DC与T细胞共同孵育5d并共同作为效应细胞,通过FACS分析T细胞激活前后的表型变化以及MTT试验观察体外特异性肿瘤杀伤效果。结果:DC在细胞因子的诱导下7d后,形态学表现为伸出许多伪足样突起,在摄取抗原后可见内吞样小泡。FACS检测呈现成熟DC的标志,CD40、CD83、CD80、CD86和HLA-DR等高表达。另外,未经成熟DC激活的T淋巴细胞以辅助性T细胞(Th)为主,CD4+52.1%,CD8+仅22.1%;而经成熟DC激活的T淋巴细胞以杀伤性T细胞(Tc)为主,CD4+32.6%,CD8+64.2%。同时,MTT试验证实经递呈MCF-7肿瘤抗原的DC激活了细胞毒性T淋巴细胞(CTL),并对MCF-7具有特异性肿瘤杀伤作用。结论:体外递呈肿瘤抗原MCF-7的成熟DC对T细胞具有激活作用,并产生肿瘤特异性CTL。
- 叶艳汤华刘民李欣
- 关键词：树突细胞T淋巴细胞细胞因子类
- 翻译控制肿瘤蛋白TPT1的原核表达、纯化、抗体制备和初步应用被引量：7
- 2010年
- 目的:原核表达并纯化翻译控制蛋白TPT1,免疫日本大耳白兔制备其抗体。方法:构建原核表达质粒pRSE-TA2-TPT1,转化大肠杆菌BL21(DE3),TPT1蛋白经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。融合蛋白通过Ni-NTA树脂亲和纯化后免疫兔子制备抗体血清。以间接ELISA法检测抗体效价,Western blot和免疫荧光染色鉴定抗体特异性。结果:在大肠埃希菌中诱导出高水平表达的TPT1融合蛋白,经亲和树脂纯化后免疫大白兔,获得了高特异性的抗TPT1抗血清。结论:成功构建原核表达质粒pRSETA2-TPT1,表达并纯化TPT1蛋白,制备出高滴度、高特异性的多克隆抗体.为进一步研究TPT1在肿瘤等疾病发生、发展过程及治疗中的作用奠定基础。
- 赵一璠李海芳汤石明王萌吴海东刘民李欣汤华
- 关键词：原核表达纯化抗体肿瘤
- 乙型肝炎病毒1896位点变异荧光PCR法检测及意义
- 2010年
- 目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)前C区1896位点突变与临床关系。方法:采用荧光聚合酶链反应(PCR)对74例各型乙肝患者HBV前C区基因进行扩增,鉴定前C区1896位点突变。结果:有41例(55.41%)发生了1896位点突变。其中慢性乙型肝炎(CHB)和肝硬化(LC)组均高于无症状HBV携带者组(ASC)(P<0.05)。抗-HBe(+)组的变异检出率为71.11%,高于HBeAg(+)组的31.03%(P<0.01)。并且随着HBVDNA含量的增高,其发生变异的可能性越大(P<0.01)。结论:前C区1896位点突变的发生可能与机体长期的炎症活动、免疫压力的选择有关。
- 李秀梅汤华
- 关键词：乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸基因变异
- 血浆miRNA-372/373在正常献血者和HBV早期感染献血者中的表达差异被引量：1
- 2015年
- 目的:研究miRNA-372/373与HBV早期感染的相关性,分析其在HBV早期感染诊断中的潜在应用价值。方法:收集来源于2013年3月至9月天津市内无偿献血者所献血液的血浆标本留样,共54份,分为正常组、酶免单阳组(E单阳组)和酶免核酸双阳组(EN双阳组)。提取此3组共54份血浆标本中的mi RNA-372和miRNA-373,用实时荧光定量PCR方法进行检测。分别比较mi RNA-372和mi RNA-373在3组血浆标本之间的表达差异,并对各组间的mi RNA表达趋势进行统计学分析;同时,对miRNA-372、miRNA-373的相对表达水平分别与核酸检测HBV核酸阳性血浆标本中的HBV DNA拷贝数进行相关性分析。结果:经实时荧光定量PCR检测,与正常献血者相比,miRNA-372、miRNA-373在E单阳组和EN双阳组中均表达上调,其中,mi RNA-372、mi RNA-373在EN双阳组中表达上调更为显著。进一步分析发现,在EN双阳组中,mi RNA-372、miRNA-373均与相应的HBV DNA拷贝数呈正相关性,且与mi RNA-372相比,mi RNA-373与相应的HBV DNA拷贝数的正相关性更为明显。结论:miRNA-372、miRNA-373与HBV早期感染密切相关,提示miRNA-372、miRNA-373在HBV感染的早期诊断中具有潜在价值。
- 安蓬蓬汤华郭军飞
- 关键词：微小RNA
- 树突状细胞成熟及其信号传导基因表达谱的研究
- 2006年
- 目的利用多种细胞因子及肿瘤细胞裂解物刺激诱导树突状细胞(dendritic cell,DC)成熟,并利用基因芯片技术对其信号传导基因表达谱进行研究。方法外周血单个核细胞在体外用细胞因子GM-CSF(100 ng/m l),IL-4(1 000 U/m l)诱导下获取DC,以乳腺癌MCF-7细胞反复冻融的裂解物冲击DC,通过形态学和FCM检测来确定DC。再用基因芯片技术检测其细胞因子及信号传导相关基因表达的变化。结果DC在细胞因子的诱导下,形态上伸出许多伪足样突起,在摄取抗原后可见内吞样小泡。FCM检测呈现成熟DC的标志:CD40、CD83、CD80、CD86、HLA-DR等高表达。芯片扫描发现16种信号传导因子发生5倍以上的改变,其中包括钙调磷酸酶结合蛋白1、TGF-β3受体、FKBP-雷帕霉素相关蛋白、小分子细胞因子A(Cys-Cys)、人T细胞特异蛋白(RANTES)等。结论通过体外细胞因子诱导及抗原冲击的成熟DC不但在形态和表型上存在明显差异,而且在功能和信号传导方面也存在显著变化。
- 刘民叶艳李欣汤华
- 关键词：树突状细胞信号传导基因芯片
- 人端粒酶逆转录亚单位特异性siRNA对ES-2细胞生长抑制作用的研究被引量：2
- 2006年
- 目的研究人端粒酶逆转录亚单位(hTERT)特异性siRNA对ES-2细胞体外生长及体内肿瘤形成能力的抑制作用。方法设计并化学合成针对hTERT的siRNA,用脂质体转染法将其导入ES-2细胞内,通过软琼脂克隆形成实验及肿瘤细胞接种裸鼠的肿瘤形成实验,观察hTERT-siRNA对ES-2细胞体外及体内的生长抑制作用。结果软琼脂克隆形成实验显示,hTERT-siRNA转染的ES-2细胞克隆形成数量明显少于对照组。裸鼠体内实验结果显示,hTERT-siRNA转染组肿瘤生长速度也明显慢于对照组。结论hTERT-siRNA在体内外均可以有效、特异地抑制肿瘤细胞的生长。
- 沈志伟李欣刘民汤华
- 关键词：端粒酶HTERTRNA干扰RNAISIRNA
- 液相芯片技术在检验医学和生物医学中的应用被引量：35
- 2007年
- 液相芯片技术是以100种不同荧光编码的微球作为探针的载体,生物分子间的反应在悬浮液态体系中进行的一类新的生物芯片技术.在这个灵活和开放的平台中可进行蛋白质、核酸等生物大分子的检测.液相芯片较传统的固相芯片的优势在于检测准确、信息质量稳定、可重复性好.液相芯片以其易于操作、高通量、高灵敏度、高准确度、高精密度以及宽的线性测定范围的特点,逐渐进入了临床诊断领域.
- 杨洋汤华
- 关键词：液相芯片蛋白质芯片基因芯片生物芯片
- 线虫基因组功能的高通量研究被引量：1
- 2006年
- 线虫是研究细胞生物学的一个理想模型,RNA i现象也是最早在线虫中发现的。由于RNA i技术不仅具有高度特异性靶定基因的特点,而且简便、易于操作,从而成为研究基因组功能的高通量方法。很多研究小组已经使用大规模RNA i系统地研究线虫各个基因的功能缺失表型。线虫独特的RNA i方法和以此为基础的基因组大规模分析有利于对线虫的各种生物学过程产生新的认识。
- 李怡璇汤华
- 关键词：RNA干扰
