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α-地中海贫血的产前基因诊断被引量：8: 1998年; 目的研究聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术在α地中海贫血产前诊断中的价值。方法应用ＰＣＲ技术，对１１例父母双方均为α珠蛋白基因缺失杂合子的胎儿（１例双胎）行羊水产前基因诊断，扩增产物中出现２２４ｂｐＤＮＡ片段为正常α类珠蛋白基因序列，出现６３０ｂｐＤＮＡ片段的扩增带代表有α类珠蛋白基因缺失，若同时出现２２４ｂｐ和６３０ｂｐ两个ＤＮＡ片段的扩增带，则表示为杂合子。结果３例胎儿表现为基因正常序列（αα／αα），４例胎儿为杂合子（－－／αα）（其中１例为双胎之一），４例胎儿为纯合子（－－／－－）（其中１例为双胎之一）。Ｂ超检查疑有胎儿水肿的３例胎儿，经基因诊断仅有２例为纯合子，而另外１例为杂合子。引产的４例胎儿为纯合子α－地中海贫血，其中有１例全身水肿，２例为典型的Ｂａｒｔ′ｓ水肿儿，１例四肢短小、腹疝形成。结论ＰＣＲ技术用于α－地中海贫血的产前诊断，具有快速。; 张秀泉李全贞吴艳何蕴韶朱承明周新宇; 关键词：Α地中海贫血贫血产前诊断基因诊断

定量比较三种提取丙型肝炎RNA的方法: 目的:建立便捷高效的血清RNA提取方法,用于HCV RNA的定量检测.方法:采用荧光定量RT-PCR检测三种RNA提取方法:新的RNA提取方法,改良一步法和Trizol法对系列稀释后的HCV阳性血清RNA提取结果,统计分...; 高劲松何蕴韶周远帆尹爱华周新宇; 关键词：丙型肝炎荧光定量 RNA提取; 文献传递

PCR循环测序法检测K-ras和HCV 5'非编码区基因变异被引量：1: 1998年; 目的：建立一种简单、快速、可靠的ＤＮＡ序列分析方法，并利用此方法分析Ｋｒａｓ基因和ＨＣＶ５′非编码区基因的变异情况。方法：ＰＣＲ循环测序法是将ＰＣＲ扩增与核酸序列分析相结合的一种研究方法。根据此技术原理，建立了以ＰＣＲ扩增引物为测序引物，利用ＴａｑＤＮＡ聚合酶、荧光标记的２′，３′双脱氧核苷三磷酸（ｄｄＮＴＰ）直接进行ＰＣＲ扩增产物序列分析的方法。应用该方法对人肺癌组织中的Ｋｒａｓ癌基因和丙型肝炎病毒５′非编码区（ＨＣＶ５′ＮＴＲ）进行了序列测定。结果：肺癌组织中的Ｋｒａｓ基因第１外显子第３５位碱基发生点突变（ＧＧＴ→ＧＡＴ）；属于高度保守区的ＨＣＶ５′ＮＴＲ存在基因变异。结论：ＰＣＲ循环测序法具有简单、快速、结果可靠等特点，为基因突变的检测和病原体的核酸序列分析提供了一个快速实用的方法。; 任秀容欧文晖李全贞周新宇何蕴韶; 关键词：聚合酶链反应 HCV 基因突变 K-RAS

乙型肝炎病毒等常见病原体PCR荧光检测试剂盒研制及产业化: 何蕴韶程钢周新宇高劲松黄立英尹爱华; 荧光定量PCR技术平台建立除能在医学上广泛应用于传染病、遗传病、肿瘤的诊断和鉴别外，还在制药业、食品卫生检验、畜牧养殖业、病原体检测中发挥着重要的作用。该项目的关键技术是建立FQ-PCR技术平台，包括引物和探针的设计，探...; 关键词：; 关键词：乙型肝炎病毒

荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒被引量：409: 1999年; 目的用荧光定量聚合酶链反应（ＦＱＰＣＲ）方法准确地定量检测血清中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的数量和免疫指标，以指导临床。方法设计合成了ＨＢＶＦＱＰＣＲ诊断试剂盒，以一种完全闭管式的ＰＣＲ和荧光探针杂交技术相结合所产生的实时检测定量ＰＣＲ方法，检测了５３２份临床血清标本。结果经ＦＱＰＣＲ检测，１５８份ＨＢＶ的ｓ抗原、ｅ抗原、ｃ抗体（ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｃＡｂ）都阳性的标本，其血清标本ＨＢＶＤＮＡ也全部阳性，平均ＨＢＶＤＮＡ拷贝数为１．１×１０８／ｍｌ；９８例ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ都阳性的标本，其阳性率为７３％（７１例），平均拷贝数为８．６×１０５／ｍｌ，而常规ＰＣＲ只有３３％的阳性率；６７例ＨＢｓＡｂ、ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ都阳性标本的平均拷贝数为２．３×１０５／ｍｌ。结论能够避免ＰＣＲ后处理导致的假阳性污染，并实现准确定量。ＦＱＰＣＲ可以检测ＨＢＶ的真实感染和复制情况，对于乙型肝炎的临床诊断，治疗方案的选择和疗效考察有较大的指导意义。; 程钢何蕴韶周新宇; 关键词：聚合酶链反应荧光光度法乙型肝炎病毒

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周新宇