何蕴韶
- 作品数:130 被引量:1,033H指数:14
- 供职机构:中山大学达安基因诊断中心更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家技术创新计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学经济管理更多>>
- 昆虫杆状病毒系统表达口蹄疫病毒3ABC基因被引量:4
- 2005年
- 以O型口蹄疫病毒为研究对象,经过RTPCP扩增得到非结构蛋白3ABC基因,克隆到转移载体pFastbacHT,将其转入含穿梭载体Bacmid的DH10Bac,与Bacmid发生位点特异性转座作用,得到3ABC的重组穿梭载体Bacmid3ABC,再将其转染昆虫细胞HiFive。PCR鉴定证实3ABC基因正确地插入到病毒基因组的多角体蛋白基因启动子下游,经过SDSPAGE和Westernblot检测,3ABC基因在昆虫细胞中表达了大小约为50kDa的蛋白条带,3ABC基因在BactoBac系统中的成功表达为建立以基因工程产品为抗原、鉴别诊断自然感染和免疫动物的方法提供了技术条件。
- 罗宝正薄清如陈金顶王伟毅程钢何蕴韶
- 关键词:口蹄疫病毒杆状病毒
- 结核分支杆菌荧光PCR试剂盒的研制及临床试验被引量:16
- 2002年
- 目的用荧光PCR(fluorescence PCR,F-PCR)方法研制结核分支杆菌(TB)DNA检测试剂盒,通过临床试验评价其性能,并与其他方法进行比较。方法F-PCR是PCR和荧光探针杂交技术结合所产生的PCR方法。由于采用完全闭管荧光检测,避免了PCR后处理导致的假阳性污染;又采用了荧光检测技术,可以提高检测的灵敏性。应用F-PCR检测了297份肺结核病人和249份非结核对照者的痰液标本,以改良罗氏培养法、金胺荧光染液涂片法、Abbott公司的LCx试剂盒检测作为对照。结果设计合成了TB F-PCR诊断试剂盒。检测阳性率49.1%,灵敏性89.2%,特异性98.8%,符合率93.6%。结论F-PCR在灵敏性上显著优于培养法和涂片法,与LCx试剂盒检测无显著差异。F-PCR试剂盒可以检测TB的真实感染情况,对于临床诊断和疗效考察有一定的指导意义。
- 程钢何蕴韶周新宇邓文国李虎
- 关键词:结核分枝杆菌
- 荧光定量RT-PCR检测急性白血病患者外周血WT1基因的表达被引量:1
- 2002年
- 目的 了解急性白血病患者外周血WT1基因的表达水平。方法 建立荧光定量RT -PCR方法 ,用PEABI 770 0PCR仪检测 114例急性白血病患者、2 6例非白血病患者和3 6例正常人外周血中WT1基因的表达水平。结果 2 2例急性髓系白血病 (AML)和 15例急性淋巴细胞白血病 (ALL)初发患者WT1基因的表达量为 10 5~ 10 6拷贝 / μgRNA ,取得部分缓解的 2 6例AML和 19例ALL患者的表达水平为 10 2~ 10 4拷贝 / μgRNA ,而取得完全缓解的 17例AML和 13例ALL患者的表达水平为 0~ 10 2拷贝 / μgRNA。 结论 WT1基因在白血病外周血中有高水平的表达 ,可作为急性白血病疗效考核及监测微残留病的指标。
- 聂常富冯志博王建国许清玉高劲松尹爱华何蕴韶
- 关键词:急性白血病荧光定量检测逆转录聚合酶链反应
- 拉米夫定治疗乙肝的疗效观察被引量:1
- 2002年
- 王现亭卢金镶高国岳何蕴韶
- 关键词:拉米夫定乙型肝炎联合用药疗效
- NT—3基因克隆,表达及生物活性的初步鉴定
- 神经营养素-3(Neurotrophin-3,NT-3)是一种多功能的神经营养因子,对神经系统发育及维持其正常生理功能有重要意义。由于对神经元的促进存活作用和神经损伤条件下的保护作用,NT-3在治疗神经系统和神经损伤中有...
- 陈昌杰何蕴韶
- 关键词:基因克隆生物活性神经营养素基因表达
- 荧光聚合酶链反应检测严重急性呼吸综合征冠状病毒的方法建立及临床初步应用被引量:36
- 2003年
- 目的 建立荧光聚合酶链反应 (F PCR)检测严重急性呼吸综合征 (SARS)冠状病毒的方法 ,并探讨其临床应用价值。方法 根据公布的SARS冠状病毒基因序列 ,自行设计合成引物、探针 ,应用研制的SARSF PCR诊断试剂盒 ,检测 115份临床漱口液样本。结果 PCR扩增产物经测序证明与SARS冠状病毒基因序列完全一致。 6 7例确诊SARS患者漱口液中 4 9份为阳性 ;18例密切接触者漱口液中 8份为阳性 ;30名健康者漱口液均阴性。结论 建立的F PCR检测SARS冠状病毒方法可成为SARS筛查和早期诊断的一种快速、准确、有效的检测方法。
- 吴新伟程钢狄飚尹爱华何蕴韶王鸣周新宇何丽娟罗凯杜琳
- 关键词:严重急性呼吸综合征冠状病毒荧光聚合酶链反应传染性非典型肺炎
- 荧光探针定量聚合酶链反应检测孕妇生殖道解脲脲原体被引量:20
- 2000年
- 朱庆义李连青张邦骤周向红刘建萍杨国福何蕴韶
- 关键词:孕妇生殖道解脲脲原体荧光探针PCR
- Bcl-xl和Bcl-2基因在人和兔心肌细胞中的同源性研究
- 2000年
- 目的 探讨兔和人的有核细胞中Bcl-xl和Bcl- 2基因的同源性。方法 用人的Bcl-xl和Bcl- 2基因序列来扩增兔心肌细胞的DNA ,纯化其扩增产物 ,然后进行测序 ,再测定人与兔心肌细胞内Bcl-xl和Bcl- 2基因的同源性。结果 兔心肌细胞内Bcl-xl基因的扩增产物长度为 16 2个碱基 ,与人类Bcl-xl基因的碱基序列进行比较 ,在扩增的 15 9个碱基片段中有 15 1个碱基相同 ,其同源性为 95 0 % ;而兔心肌细胞内Bcl- 2基因的扩增产物长度为 2 88个碱基 ,与人类Bcl- 2基因mR NA的碱基序列进行比较 ,在扩增的 199个碱基片段中有 176个碱基相同 ,其同源性为 88 4%。结论 兔和人的有核细胞中Bcl-xl和Bcl- 2基因有很好的同源性 ,在研究兔心肌细胞这两种基因的改变时 ,完全可以用人的Bcl-xl和Bcl- 2基因序列(引物 )来扩增 。
- 马中富马虹高劲松何建桂叶任高罗斌何蕴韶
- 关键词:BCL-XL基因BCL-2基因同源性心肌细胞
- PCR循环测序法检测K-ras和HCV 5'非编码区基因变异被引量:1
- 1998年
- 目的:建立一种简单、快速、可靠的DNA序列分析方法,并利用此方法分析Kras基因和HCV5′非编码区基因的变异情况。方法:PCR循环测序法是将PCR扩增与核酸序列分析相结合的一种研究方法。根据此技术原理,建立了以PCR扩增引物为测序引物,利用TaqDNA聚合酶、荧光标记的2′,3′双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)直接进行PCR扩增产物序列分析的方法。应用该方法对人肺癌组织中的Kras癌基因和丙型肝炎病毒5′非编码区(HCV5′NTR)进行了序列测定。结果:肺癌组织中的Kras基因第1外显子第35位碱基发生点突变(GGT→GAT);属于高度保守区的HCV5′NTR存在基因变异。结论:PCR循环测序法具有简单、快速、结果可靠等特点,为基因突变的检测和病原体的核酸序列分析提供了一个快速实用的方法。
- 任秀容欧文晖李全贞周新宇何蕴韶
- 关键词:聚合酶链反应HCV基因突变K-RAS
- 支气管扩张症发病的免疫机制研究进展被引量:7
- 2007年
- 支气管扩张症是一种常见的慢性支气管疾病。其发病基础为支气管壁的炎性损伤和支气管阻塞的相互作用。病因涉及诸多方面,其中免疫学方面的有关发病机制受到了各国学者的关注。本文就体液免疫、细胞免疫、其它致病因素及治疗方面阐述了支气管扩张症发病机制中可能存在的免疫学因素。
- 李佩琼张卫东何蕴韶
- 关键词:支气管扩张症发病机制免疫