刘建国
- 作品数：6 被引量：26H指数：2
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室开放基金国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 人MGMT基因cDNA的克隆表达及表达蛋白修复功能的鉴定被引量：1
- 2001年
- 克隆了Hela细胞O6 甲基鸟嘌呤 DNA 甲基转移酶 (MGMT)基因的cDNA序列 ,该序列与国外发表的cDNA完全一致。将此cDNA插入原核表达载体pET 2 1a后转化大肠杆菌BL2 1(DE3)获得表达的重组菌株pET 2 1a MGMT E .coliBL2 1(DE3) ,经IPTG诱导后产生分子量为 2 4kD的蛋白质。烷化类诱变剂致死突变实验表明 ,MGMT蛋白的表达能修复受体菌DNA分子因烷化类诱变剂导致的突变。
- 朱玉文刘建国黎高翔
- 关键词：烷化剂癌变
- 人体细胞癌变生物标志物的检测
- 刘建国
- 关键词：人体细胞癌变生物标志物
- 文献传递
- 假丝酵母尿酸酶形成条件被引量：3
- 1989年
- 选出了一株产尿酸酶的产朊假丝酵母(candida utilis)AS2.117。此菌株尿酸酶形成条件的研究表明:尿酸、黄嘌呤和鸟嘌呤对酶形成起诱导作用;玉米浆对菌株生长和酶形成起十分重要的作用;蔗糖、葡萄糖、D-甘露糖和果糖是酶形成的适合碳源;生物素对酶产生有促进作用;在含有玉米浆培养基中加入无机氮源对产酶无作用,添加有机氮略增加产酶量。尿酸酶形成最适培养基组成为(%):蔗糖5,玉米浆3,尿酸0.1,蛋白胨0.1,生物素0.05,KCl0.1,NaCl 0.1。最适pH为6.2。在250ml三角瓶中装30ml培养基为最适。在200r/min的旋转摇床上25℃振荡培养21h,在此条件下最终酶活力可达0.6u/ml。
- 刘建国黎高翔
- 关键词：尿酸酶发酵条件
- 尿酸氧化酶基因的克隆、表达及其产物的应用被引量：20
- 2001年
- 克隆了产朊假丝酵母 (Candidautilis)AS2 117尿酸氧化酶 (UrateOxidase,Uricase,EC1.7.3 .3)的基因。将此基因插入原核表达质粒pET2 1a后转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,获得高表达的重组转化子菌株。经IPTG诱导 ,重组尿酸酶基因表达量可达菌体可溶性蛋白的 40 %。重组尿酸氧化酶为有酶活性的可溶蛋白。Western印迹分析证实表达产物有免疫学活性。经DEAEDE5 2纤维素离子交换柱层析纯化 ,目的蛋白纯度可达 95 %。重组蛋白和天然蛋白的理化特征比较证明重组蛋白的热稳定性有较大提高。酶盒配制和临床应用实验表明重组蛋白可代替天然蛋白进行临床血清尿酸的分析。
- 朱献军刘建国黎高翔
- 关键词：产朊假丝酵母尿酸氧化酶基因克隆生物药物
- 假单胞菌株K9510产肌酐酰氨基水解酶的条件
- 2001年
- 肌酐酰氨基水解酶是酶法分析血清肌酐浓度的关键酶。本实验室从空气中分离到能分解肌酐 的菌株 Ｋ９５１０、Ｋ９５１１和 Ｋ９５１２，其中Ｋ９５１０菌株初步分类鉴定为假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐ.）。菌株 产酶条件优化研究结果表明：菌株在底物或底物类似物的诱导下产酶；混合金属离子溶液对菌株产 酶有促进作用。菌株产肌酐酰氨基水解酶最适培养基组成为：肌酐９ｇ、酵母提取物１．５ｇ、麦芽汁０．９ｇ、 ＮＨ４Ｃｌ０． ５ｇ、定容 １Ｌ。适量混合金属离子溶液，用 ０． １ｍｏｌ／Ｌ ｐＨ５． ５磷酸缓冲液配制。在 ２５０ｍＬ三角 瓶中装５０ｍＬ培养基，在２５０ｒ／ｍｉｎ的旋转摇床上 ３５℃振荡培养３３ｈ，在此条件下菌株产酶量可达 １． Ｏｕ／ｍＬ发酵液。
- 刘建国柯纪元王晋芳黎高翔
- 关键词：假单胞菌产酶条件
- 尿酸酶-鲁米诺化学发光传感器被引量：2
- 1995年
- 研制了依赖于鲁米诺化学发光反应和固定化尿酸酶柱的测定血清尿酸的生物传感器。其测定血清样品响应时间47s。测定每份样品需时1.5min,样品体积17μl。工作曲线的线性范围1～20mg/dl。批内不精密度3.22％～4.36％;批间6.18％～7.8％。测定值回收率为93％～109％。与医院常规酶试剂盒方法比较相关系数r=0.9909。固定化尿酸酶柱室温使用,4℃冰箱保存,连续使用5个半月测定样品2000次以上,仍保持原酶柱活力的94％。
- 刘建国郭健黎高翔
- 关键词：生物传感器化学发光
