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朱献军
作品数:
2
被引量:21
H指数:1
供职机构:
中国科学院微生物研究所
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
化学工程
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合作作者
黎高翔
中国科学院微生物研究所
刘建国
中国科学院微生物研究所
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基因克隆和表...
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假丝酵母
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朱献军
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黎高翔
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2001
1篇
2000
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尿酸氧化酶基因的克隆、表达及其产物的应用
被引量:20
2001年
克隆了产朊假丝酵母 (Candidautilis)AS2 117尿酸氧化酶 (UrateOxidase,Uricase,EC1.7.3 .3)的基因。将此基因插入原核表达质粒pET2 1a后转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,获得高表达的重组转化子菌株。经IPTG诱导 ,重组尿酸酶基因表达量可达菌体可溶性蛋白的 40 %。重组尿酸氧化酶为有酶活性的可溶蛋白。Western印迹分析证实表达产物有免疫学活性。经DEAEDE5 2纤维素离子交换柱层析纯化 ,目的蛋白纯度可达 95 %。重组蛋白和天然蛋白的理化特征比较证明重组蛋白的热稳定性有较大提高。酶盒配制和临床应用实验表明重组蛋白可代替天然蛋白进行临床血清尿酸的分析。
朱献军
刘建国
黎高翔
关键词:
产朊假丝酵母
尿酸氧化酶
基因克隆
生物药物
假丝酵母尿酸氧化酶基因的克隆、表达纯化及其产物的应用
以PCR方法克隆了Candida utilis AS2.117尿酸氧化酶基因(Urate Oxidase,EC1.7.3.3),将此基因克隆到原核表达载体pET21a,在大肠杆菌中表达了该基因,得到了可溶性的有生物活性的...
朱献军
关键词:
产朊假丝酵母
尿酸氧化酶
基因克隆和表达
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