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植物乳杆菌近亲种中叶酸生物合成途径的基因多态性分析: 2018年; 研究从传统发酵食品中分离植物乳杆菌并进行近亲种鉴定,通过直接测序法对8株植物乳杆菌近亲种的叶酸生物合成途径中5个关键基因fol B,fol E,fol K,fol P和fol Q进行扩增,并采用系统进化分析、核苷酸和氨基酸序列比对对基因多态性进行分析.结果发现,fol B,fol E和fol K基因具有较高的同源性,同时存在1处同义替换的SNP位点,fol P基因存在的14处SNP位点中,仅1处发生非同义替换,说明这些基因在氨基酸水平上相对保守.8株植物乳杆菌近亲种存在fol Q基因,但编码蛋白与Fol Q蛋白不具有同源性,故推测其拥有与Fol Q蛋白功能相似的生物酶,这些拟似酶有待进一步克隆鉴定与功能研究.本实验为植物乳杆菌近亲种中叶酸生物合成途径的分子调控机理提供前期基础.; 任贝贝李晓然罗义勇杨恩柳陈坚; 关键词：植物乳杆菌叶酸基因多态性发酵食品

一种微生物群落结构的分析方法: 本发明属于生物分析技术领域，具体为一种分析微生物群落结构的分析方法，该方法包括如下步骤：提取环境样品中的总RNA；从总RNA中分离小亚基rRNA；通过随机引物对小亚基rRNA进行反转录，进行测序；从测序结果中抽提出小亚基...; 全哲学李晓然; 文献传递

红河传统发酵豆豉中高纤溶活性菌株的分离筛选及其纤溶酶基因分析被引量：4: 2014年; 运用脱脂乳固体培养基及纤维蛋白固体培养基的两步分离筛选法,从云南红河传统发酵豆豉中分离筛选具有高产豆豉纤溶酶活性的菌株,同时对它们的豆豉纤溶酶基因进行克隆分析,以期为新型功能性豆豉的研发提供备选菌株及理论依据。研究结果表明,两步分离筛选法能有效地从云南红河传统发酵豆豉中筛选到高产豆豉纤溶酶的菌株Bacillus subtilis LC-2-1,对该高产菌株的豆豉纤溶酶成熟肽基因分析及预测结果表明,菌株B subtilis LC-2-1确实能分泌一种由825个碱基编码275个氨基酸残基且分子量约为27.4kDa的豆豉纤溶酶,与纳豆激酶及其他豆豉纤溶酶相比差异显著,同源性仅为85.1%。同时其豆豉纤溶酶活性分析结果则表明,菌株B subtilis LC-2-1所产纤溶酶活性较高,可达79.84 U/mL。因此,本研究结果将为新型且具有溶血栓功能发酵豆豉的研发提供备选菌株及理论依据。; 龚福明李晓然宋园亮罗义勇张忠华柳陈坚; 关键词：豆豉纤溶酶基因分析

羟甲基二氢蝶呤焦磷酸激酶基因folK的用途: 本发明公开羟甲基二氢蝶呤焦磷酸激酶基因folK的新用途，即其在提高植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）叶酸生物合成中的应用，所述羟甲基二氢蝶呤焦磷酸激酶基因fol...; 柳陈坚孙世意李晓然; 文献传递

汾酒大曲和酒醅样品DNA提取方法的优化被引量：13: 2011年; 以汾酒不同发酵时期的酒醅、不同制作过程中的酒曲以及制曲环境样品为材料,采用酶物理化学法与物理化学法两种方法对不同样品DNA进行提取,实验结果表明,采用酶物理化学法获得了质量及纯度较好的DNA。后续实验表明,酶物理化学法提取获得的高质量DNA能全面反映汾酒酿造过程中的微生物群落结构多样性。; 闫亮珍李晓然全哲学马恩波; 关键词：汾酒酒醅酒曲 DNA提取

屎肠球菌降胆固醇作用的初步研究被引量：1: 2018年; 血液中胆固醇含量增加会严重威胁人类健康。利用皂化-比色法检测了22株屎肠菌株体外降胆固醇的能力,结果显示屎肠菌株的胆固醇去除率在85.93%~21.25%之间。选取3株胆盐耐受能力较好的菌进行后续研究,其中,屎肠球菌SP5-6L的耐酸能力较差;JS2和ML13-5菌株具有一定的耐酸和耐胆盐能力;3株菌株的胆盐水解酶活性都很高。在0.3%胆盐培养基中,屎肠球菌的胆固醇去除率不同,其中ML13-5菌株的去除率由52.71%增加到68.01%。此外,屎肠球菌无溶血性,但其抗药性各有不同。本文对屎肠球菌降低胆固醇的机制进行了初步研究,为进一步利用其开发相关功能性食品和药物提供了依据。; 吴边柳陈坚柳陈坚尚云尚云; 关键词：屎肠球菌胆固醇抗药性安全性

高产叶酸植物乳杆菌的筛选及应用研究被引量：5: 2018年; 人类自身不能合成叶酸,主要从食物中摄取。植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum,Lb.plantarum)能够产生叶酸,且是公认的肠道益生菌。本研究利用高效液相色谱检测方法,从34株分离自云南传统发酵食品的植物乳杆菌中筛选出高产叶酸植物乳杆菌,结果显示,34株植物乳杆菌均具有合成叶酸的能力,其中Lb.plantarum SP8-7,JH-M1-6-30和YML4-3三株菌的叶酸产量最高,分别为1.492,1.360μg/m L和1.312μg/m L。将其作为发酵菌株制作酸奶和发酵大豆,Lb.plantarum JH-M1-6-30与Lb.plantarum YML4-3可以联合用于富含叶酸酸奶的制作,而Lb.plantarum SP8-7可以用于制作富含叶酸的发酵大豆。; 张海燕柳陈坚何树芬李晓然; 关键词：植物乳杆菌叶酸高效液相色谱法酸奶发酵大豆

植物乳杆菌YM-4-3发酵合成γ-氨基丁酸的条件优化被引量：3: 2017年; 通过单因素分析和正交试验,对Lactobacillus plantarum YM-4-3菌株发酵合成γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA)的培养基配方及各项发酵条件进行优化.优化结果表明,L.plantarum YM-4-3菌株发酵生产GABA的最适发酵条件为:接种量1%,培养基初始pH 6.0,35℃厌氧静置发酵96 h;最佳培养基配方为:Lab-lemco'powder,4 g/L;蛋白胨,15 g/L;酵母浸膏,6 g/L;Tween-80,1 mL/L;磷酸氢二钾,2.0 g/L;蔗糖,20.0 g/L;四水硫酸锰,0.05 g/L;柠檬酸三铵,2.0 g/L;七水硫酸镁,0.2 g/L;乙酸钠,5.0 g/L;谷氨酸钠(monosodium glutamate,MSG)30 g/L(即3%,w/v).在最佳发酵工艺条件下,L.plantarum YM-4-3菌株发酵液中GABA含量可高达15.09 mmol/L.; 龚福明柳陈坚李晓然; 关键词：LACTOBACILLUS PLANTARUM Γ-氨基丁酸发酵培养基优化

基因工程慕课建设探讨——以昆明理工大学为例被引量：1: 2019年; 基因工程是生命科学相关专业重要的专业课程,具有内容多、理论性强、概念抽象、技术性强等特点。传统的教学对于学生掌握相关理论知识和实验操作具有一定的难度,采用基于"互联网+"的慕课平台辅助日常教学极为必要。昆明理工大学在基因工程慕课建设中组建起优秀的教学团队,重新编写教学大纲,对教学内容进行梳理和模块划分,用幻灯片突出重点和核心内容,并且拍摄和制作出高质量的慕课教学视频。这些宝贵的经验可以为其他相关课程的慕课制作提供参考。; 李晓然柳陈坚杨恩罗义勇冯阳潘卉; 关键词：基因工程教学改革

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李晓然