李亮助
- 作品数：23 被引量：118H指数：4
- 供职机构：复旦大学更多>>
- 发文基金：艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家科技重大专项上海市卫生局青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 利用小鼠炎症模型评价苯扎氯铵的黏膜毒性被引量：1
- 2012年
- 目的利用小鼠黏膜炎症因子模型,研究不同浓度苯扎氯铵(BZK)对生殖道黏膜的刺激毒性,以探究BZK作为黏膜用药物的安全性和应用前景。方法连续三天用浓度为0.02%、0.2%和2%的BZK凝胶处理小鼠阴道黏膜,每天收集小鼠阴道灌洗液,用多指标流式蛋白定量技术(Cytometric Bead Array,CBA)检测其中的6种炎症因子[白介素(Interleukin,IL)-2、IL-4、IL-6、IL-17A和肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF)-α、γ干扰素(Interferonγ,IFN)-γ]的表达情况;利用苏木紫-伊红(Hematoxylin-Eosin,HE)染色法对小鼠阴道黏膜的病理学损伤情况进行观察。结果 2%的BZK凝胶诱导了较为明显的小鼠阴道黏膜上皮损伤,0.02%和0.2%的BZK与安慰剂组相比无明显病理改变;但是0.2%的BZK显著上调了IL-6和TNF-α在阴道灌洗液中的表达,而0.02%和2%的BZK诱导的各炎症因子与安慰剂组相比差异无统计学意义。结论 2%和0.2%的BZK具有一定的黏膜毒性;0.02%的BZK展现了较好的安全性,该浓度下BZK的病原体感染抑制能力需要进一步研究确认。
- 袁松华贲银银李亮助
- 关键词：艾滋病苯扎氯铵病理学观察炎症因子
- 人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素－6融合蛋白及构建方法
- 本发明是人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素-6融合蛋白及构建方法。融合蛋白为：GM-CSF(9-127)-IL-6(29-184)，GM-CSF(9-127)-IL-6(1-184)GM-CSF(1-127)-I...
- 孙强明戴长柏徐维明孙茂盛李亮助李鸿钊刘红岩谢天宏
- 文献传递
- HIV-1潜伏感染人Jurkat T细胞模型的建立被引量：1
- 2011年
- 目的建立Ⅰ型艾滋病病毒(HIV-1)潜伏感染人Jurkat T细胞的模型,为进一步研究HIV-1潜伏感染机制奠定基础。方法利用一种表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的HIV-1假病毒感染人Jurkat T细胞,采用流式细胞术分选出GFP-细胞群,之后经激活剂曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)刺激后,再次采用流式细胞术分选出GFP+细胞,并通过有限稀释法制备获得单克隆细胞系。利用流式细胞术及酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测单克隆细胞系在TSA刺激前后的GFP+细胞比例及HIV-1病毒抗原p24;并用Alu-长末端重复序列(LTR)套式聚合酶链反应(Nested PCR)检测单克隆细胞系中HIV-1基因组的整合情况。结果获得了5株HIV-1潜伏感染的Jurkat单克隆细胞系,对这5株单克隆细胞系分别进行激活剂处理,发现无论是GFP表达细胞比例或HIV-1病毒蛋白p24抗原的表达,皆显著高于激活剂处理前的背景表达水平(P<0.05);并能从这5个单克隆细胞系基因组中扩增出针对HIV-1基因组的特异条带。结论已获得的5株单克隆细胞系具有HIV-1潜伏细胞的生物学特点,表明已成功地建立了HIV-1潜伏感染细胞模型。该模型可用于各种药物或激活剂的筛选和检测,也为进一步研究HIV-1潜伏感染机制奠定了工作基础。
- 李琳仇超李亮助刘爱平邱趁丽周明哲张晓燕徐建青朱焕章
- 关键词：JURKATT细胞系绿色荧光蛋白
- 实时相对定量反转录PCR检测小鼠阴道黏膜炎症因子的表达
- 2011年
- 目的建立实时相对定量反转录聚合酶链反应(real-time RQ RT-PCR)方法,能快速准确地检测各种炎症因子在阴道黏膜的转录表达情况,从而评价包括杀微生物剂在内的生殖道或直肠黏膜用候选药物的刺激毒性。方法以Eppendorf Mastercycler ep realplex实时荧光定量PCR仪为检测平台,选择小鼠β-actin基因为内参,建立基于SYBR GreenⅠ荧光染料的real-time PCR检测方法,对白介素2(Interleukin 2,IL-2)、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factorα,TNF-α)、γ干扰素(Interferonγ,IFN-γ)等炎症因子在生殖道黏膜的mRNA转录水平,同时进行检测,并用2-⊿⊿Ct方法计算实验组小鼠目的基因相对于空白组小鼠的表达差异情况。用微量样本多指标流式蛋白定量技术(Cytometric Bead Array,CBA)对结果进行验证。结果使用real-time RQRT-PCR能对小鼠阴道黏膜炎症因子的表达情况进行快速检测,结果与CBA检测结果相吻合。结论该方法快速、灵敏、特异性强、价格低廉、高通量。可用于杀微生物剂等生殖道或直肠黏膜用候选药物的临床前安全性评价工作。
- 李亮助杨瑜袁松华贲银银徐建青张晓燕
- 关键词：阴道黏膜炎症因子安全性评价
- 生物信息学在药物设计中的应用被引量：5
- 2003年
- 生物信息学的飞速发展为药物开发提供了新的手段,计算机辅助药物设计是多学科交叉发展的产物。结合近些年来的一些成功实例,对数据库搜寻、计算机直接生成(全新药物设计)和进一步优化等计算机辅助药物设计技术及相关重要算法软件的新进展做一综述。
- 李亮助孙强明
- 关键词：生物信息学药物设计
- 黏膜淋巴细胞归巢、HIV感染与艾滋病疫苗策略
- 2010年
- 黏膜组织是HIV感染机体的天然门户，也是大量的HIV病毒的存储库，因此在黏膜部位诱导有效的HIV特异性抗体和CTL免疫反应对预防和清除HIV感染具有重要的作用。而无论是在HIV入侵黏膜的过程中还是在特定黏膜部位诱导有效的保护性免疫反应，黏膜淋巴细胞的归巢都起到了关键的作用。深入了解黏膜淋巴细胞的归巢和HIV感染以及诱导保护性免疫反应之间的相互作用关系，对于发展有效的艾滋病疫苗策略意义重大。
- 李亮助徐建青张晓燕
- 关键词：HIV感染黏膜归巢疫苗策略
- 人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素－6融合蛋白及构建方法
- 本发明是人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素－6融合蛋白及构建方法。融合蛋白为：GM－CSF(9－127)－IL－6(29－184)，GM－CSF(9－127)－IL－6(1－184)，GM－CSF(1－127)－...
- 孙强明戴长柏徐维明孙茂盛李亮助李鸿钊刘红岩谢天宏
- 文献传递
- HIV杀微生物剂及其应用
- 本发明公开了一种HIV杀微生物剂，该杀微生物剂含有西夫韦肽和另外一种预防或治疗艾滋病的药物，可以为逆转录酶抑制剂。本发明还涉及预防HIV-1感染的方法，所述方法包括通过哺乳动物粘膜给予有效量的权利要求1中所述的HIV杀微...
- 张晓燕李亮助徐建青贲银银姜世勃齐敬总陈昕
- 文献传递
- 人类免疫缺陷病毒1型慢性感染者B细胞表型分析及抗反转录病毒治疗的修复作用被引量：1
- 2013年
- 人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)感染会造成严重的免疫功能损伤,除引起CD4+T细胞不断耗损和功能损伤外,体液免疫应答也受到损伤。本研究通过检测HIV-1慢性感染者和慢性感染治疗者外周血B细胞数目和亚群比例,以及活化、凋亡和共刺激分子的表达,探讨HIV-1感染者中B细胞损伤及抗反转录病毒治疗(ART)对B细胞损伤的修复作用。结果显示,HIV-1慢性感染者外周血B细胞数目显著低于健康对照组,其中未成熟B细胞、初始B细胞、静息记忆B细胞和浆母细胞显著降低,而组织样记忆B细胞显著增加,ART可恢复初始B细胞和组织样记忆B细胞比例,但不能恢复静息记忆B细胞比例。与健康对照组相比,HIV-1感染者未成熟B细胞、初始B细胞、静息记忆B细胞和组织样记忆B细胞中CD38的表达上调;CD95的表达在所有B细胞亚群中均上调;而Bcl-2在初始B细胞、组织样记忆B细胞和浆母细胞中的表达显著降低;静息记忆B细胞和浆母细胞中PD-1的表达上调;共刺激分子CD40在所有B细胞亚群中的表达降低,而CD70的表达在未成熟B细胞以外的亚群中均显著下调。ART仅能部分修复以上分子的表达。结果表明,HIV-1感染引起B细胞及其亚群比例异常,B细胞表现为过度活化、易凋亡及与T细胞作用受损,ART不能完全修复B细胞损伤,有效的免疫干预策略亟待开发。
- 闫静静仇超李亮助邱趁丽傅卫辉孙俊徐建青张晓燕
- 关键词：人类免疫缺陷病毒1型B细胞表型抗反转录病毒治疗
- 三将丹体外抗HIV感染的活性研究及其机制探索被引量：1
- 2014年
- 目的研究三将丹体外抗HIV感染的活性及潜在机制。方法用蒸馏法从三将丹中抽提出主要活性成分，在细胞水平采用3种亚型的HIV假病毒（B亚型、C亚型、CRF01_AE亚型）对其体外抗病毒感染的活性进行评价。进一步研究三将丹对HIV宿主免疫细胞表面受体以及细胞因子分泌能力的影响，以探寻其可能的抗病毒机制。最后采用4种不同来源的细胞系（上皮细胞Caco-2细胞，TZM细胞，肝来源细胞Huh7细胞，淋巴细胞Jurkat—T细胞）对三将丹进行细胞水平的安全性评价。结果三将丹在1．6ms／ml和0．16mg／ml的浓度时能够很好地抑制HIV假病毒对细胞的感染，当浓度为0．16mg／ml时的抑制率为30．9％（B亚型）、36．6％（C亚型）以及65．0％（CRF01_AE亚型）。而当浓度为1．6mg／ml时，抑制率上升为96．4％（B亚型）、97．4％（C亚型）以及99．5％（CRF01_AE亚型），且不对宿主细胞造成毒性，同时三将丹能够抑制TZM-bl细胞表面CIM、CXCR4以及CCR5的表达，且三将丹能够诱导T细胞分泌IL-2。结论三将丹在体外能够在不对宿主细胞造成毒性的情况下，抑制HIV假病毒的感染，同时还能够促进诱导T细胞分泌IL-2，对免疫细胞具有一定的调理作用，这可能与三将丹抗HIV的活性机制有关。
- 贲银银李亮助张晓燕徐建青
- 关键词：HIV抗病毒免疫调理
