刘蕾
- 作品数:5 被引量:17H指数:3
- 供职机构:西北大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:陕西省自然科学基金陕西省教育厅科研计划项目更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>
- 白藜芦醇合酶基因的克隆及对毕赤酵母的转化被引量:6
- 2006年
- 目的建立白藜芦醇合酶基因的毕赤酵母表达系统。方法通过PCR、限制性内切酶消化、连接、电激等方法,构建表达载体,转化毕赤酵母GS115。结果从葡萄基因组DNA中扩增得到了 1 200 bp目的基因,并克隆至pBS-T栽体;成功构建了表达载体pPIC3.5K/RS;目的基因成功整合进毕赤酵母GS115基因组中。测序及PCR鉴定证明,白藜芦醇合酶基因的毕赤酵母表达系统建立成功。结论所得方法无需高质量的RNA,从而降低了试验条件,达到了快速简便的目的。
- 郭芝光尉亚辉刘蕾张儒朱剑光
- 关键词:白藜芦醇白藜芦醇合酶基因克隆毕赤酵母表达系统
- 两种新型HBsAg基因的毕赤酵母表达载体构建及其表达
- 2005年
- 目的:从乙肝患者血清中发现2个有突变的乙型肝炎病毒株,从中扩增出HBsAg(乙肝表面抗原)基因,构建酵母表达载体,并在巴斯德毕赤酵母中表达,以鉴定这2个基因表达产物的活性。方法:利用PCR技术从乙肝患者血清中扩增出乙肝表面抗原基因,并将其连接到pPIC3.5K中,转化毕赤酵母,通过甲醇诱导,利用SDS-PAGE和ELISA检测表达的蛋白。结果:通过序列测定结果表明成功地构建了毕赤酵母表达载体,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和ELISA证明这2个基因在毕赤酵母中能有效表达,且表达产物均具有生物活性。结论:从实验结果发现乙肝表面抗原决定簇以外的少数氨基酸变化不影响其活性。因此可以利用这2个基因对乙肝表面抗原进行表达。
- 张儒尉亚辉刘科刘蕾
- 关键词:毕赤酵母SDS-PAGEELISA表面抗原ELISA
- 花生白藜芦醇合酶基因cDNA的克隆及植物表达载体的构建被引量:6
- 2005年
- 为得到含有白藜芦醇合酶cDNA(RS cDNA)并能表达白藜芦醇(Res)的转基因植物,以花生为材料,从其根部提取基因组DNA,并以其为模板,利用引物悬挂延伸PCR法扩增得到大小约1200bp的片段,将这个片段连接到克隆载体PBS-T上进行测序,测序结果证明,此片段就是花生的RS cDNA。将此片段再正向插入到植物表达载体PBI121的CaMV35s启动子和NOS终止子之间,对重组子进行筛选与鉴定,证明花生的RS cDNA已经正确插入PBI121中,成功的构建了植物表达载体PBI121L。
- 刘蕾尉亚辉张儒荆西刚郭芝光朱剑光
- 关键词:白藜芦醇合酶重组子植物表达载体
- 花生白藜芦醇合酶cDNA的克隆及其对植物、酵母的遗传转化
- 白藜芦醇/(Resveratrol,简称Res/)是一种植物抗毒素,是存在于数十种食物和药物中的一种具有保健功能的成份。Res主要具有抗癌,保护心血管,雌激素调节,抗增殖、诱导细胞凋亡,抗菌等作用。然而,在自然的条件下,...
- 刘蕾
- 关键词:白藜芦醇白藜芦醇合酶花生
- 文献传递
- 引物悬挂延伸PCR扩增白藜芦醇合酶cDNA被引量:7
- 2005年
- 为了得到葡萄白藜芦醇合酶 RS 基因的 c DNA,实验以葡萄叶片为材料 ,利用引物悬挂延伸 PCR法 ,以葡萄总 DNA为模板 ,先分别扩增得到编码白藜芦醇合酶的第一外显子和第二外显子的序列 ,再以这两个序列为模板 ,进行第二轮的 PCR,得到大小与 RS基因大小相同的片段 ,经 PCR产物测序证明 ,两个外显子已经准确无误地拼接 ,此片段就是 RS基因 .
- 刘蕾尉亚辉荆西刚郭芝光张儒
- 关键词:外显子白藜芦醇合酶