侯筱宇
- 作品数：48 被引量：88H指数：5
- 供职机构：徐州医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 中枢神经系统L-型电压门控钙通道的功能调控与脑缺血被引量：7
- 2004年
- 中枢神经系统L 型电压门控钙通道 (L typevoltage gatedcalciumchannels ,L VGCCs)由α1C(D)亚基和辅助亚基组成。α1C亚基的C 端包含多个功能结构域 ,可分别与钙调素、钙调蛋白酶、cAMP依赖性蛋白激酶、Src家族酪氨酸蛋白激酶 (Srcfamilyproteintyrosinekinases ,SrcPTKs)等相互作用 ,从而参与L VGCCs的功能调控。SrcPTKs介导的两种钙通道———L VGCCs和N 甲基 D 天冬氨酸 (N methyl D aspartate ,NMDA)
- 侯筱宇张光毅
- 关键词：脑缺血N-甲基-D-天冬氨酸受体
- 神经型一氧化氮合酶SUMO化在突触可塑性中的作用
- 杜彩萍胡斌王梅侯筱宇
- 关键词：神经型一氧化氮合酶PIAS3突触可塑性长时程增强
- 脑缺血及Aβ神经毒性条件下PSD-95Y523磷酸化的研究
- PSD-95(postsynaptic density-95)是膜结合鸟苷酸激酶家族亚家族中的一员,是一个锚定蛋白,又称为脚手架蛋白,通过串集谷氨酸受体及其相关信号分子,形成信号复合物,在突触后对兴奋性信号转导进行整合。...
- 杜彩萍吴桂梅谭然彭艳刘永王伟高锦侯筱宇
- 关键词：脑缺血Β-淀粉样肽兴奋性毒性PSD-95酪氨酸磷酸化
- β-淀粉样肽寡聚体的制备及鉴定
- 2015年
- [目的]制备β-淀粉样肽(amyloid-βpeptide,Aβ)的可溶性寡聚体。[方法]选取化学合成的Aβ25-35、Aβ1-42及对照肽Aβ35-25,体外37℃孵育7 d制备Aβ寡聚体。采用dot blotting,免疫印迹鉴定Aβ的聚集状态;并通过TUNEL法检测Aβ的神经毒性。[结果]经dot blotting和免疫印迹检测,显示本研究制备获得的Aβ25-35和Aβ1-42均为寡聚体,且Aβ25-35寡聚体的分子量以2 kDa、3 kDa和17 kDa为主,Aβ1-42分子量主要为4kDa和8kDa,而对照肽Aβ35-25并不能形成寡聚体。TUNEL法则显示Aβ25-35寡聚体可以引起SH-SY5Y细胞凋亡。[结论]在体外成功建立制备Aβ寡聚体的方法,且通过形态学实验证实该Aβ有神经毒性,为后续研究阿尔兹海默症的致病机制奠定实验基础。
- 徐岩侯筱宇
- 关键词：阿尔兹海默症Β-淀粉样肽寡聚体
- 矾酸钠和染料木黄酮对脑缺血／再灌注诱导海马神经元损伤的作用及分子机制被引量：1
- 2003年
- 目的研究矾酸钠和染料木黄酮对脑缺血/再灌注后海马神经元损伤的作用及其分子机制.方法采用蒙古沙土鼠双侧颈总动脉结扎诱导的短暂(15 min)前脑缺血模型,用底物γ-32P掺入法测定酪氨酸蛋白激酶(PTK)的活性,免疫印迹法分析NMDA受体2B亚基(NR2B)的酪氨酸磷酸化变化;采用体外孵育的大鼠海马脑片模拟缺血模型,测定海马神经元细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的漏出量作为神经元损伤的指标.结果沙土鼠缺血/再灌6 h,海马突触体总PTK活性显著升高,缺血前20min腹腔注射染料木黄酮对PTK总活性有明显的降低作用,而矾酸钠对其却无明显作用;短暂前脑缺血/再灌注6 h后,NR2B的酪氨酸磷酸化显著增加,矾酸钠与染料木黄酮可分别增加、减少这种磷酸化的增加,而对NR2B的蛋白表达无明显作用;大鼠海马脑片"缺血"30 min/再灌1 h,细胞LDH的漏出量明显增加,"缺血"前15 min,在海马脑片孵育液中加入矾酸钠与染料木黄酮可分别增加、减少LDH的漏出量.结论PTK和酪氨酸蛋白磷酸酶(PTP)共同参与缺血性脑损伤的调节,而PTK起着更为重要的作用.
- 颜景芝张光毅裴林李勇刘永侯筱宇
- 关键词：染料木黄酮脑缺血再灌注海马神经元损伤分子机制
- PDZ1-腺病毒重组体的构建及其对KA诱导的海马神经元凋亡的拮抗作用
- 2008年
- 目的构建PSD-95结构域PDZ1与腺病毒重组体并观察其对海人藻酸(KA)诱导的海马神经元凋亡的作用。方法采用RT-PCR法获得PDZ1的cDNA;与腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV用T4 DNA连接酶连接;连接产物与骨架载体pAdEasy-1共转染至原核包装细胞BJ5183;将原核重组体用脂质体转入真核包装细胞293H;纯化包装后的病毒颗粒并测定其滴度;腺病毒感染培养的海马神经元,加入KA,用DAPI染色后荧光显微镜观察细胞凋亡;用流式细胞仪定量分析细胞凋亡率。结果①经RT-PCR得到了PDZ1的cDNA;②电泳鉴定得到原核重组体;③得到包装完整的具感染能力的病毒颗粒;④纯化的病毒颗粒滴度为1.08×109ifu/mL⑤病毒表达的PDZ1使KA诱导的海马神经元凋亡数量减少(P<0.05)。结论获得了能表达PDZ1-GFP的病毒颗粒,并且PDZ1过表达能拮抗KA诱导的海马神经元凋亡。
- 胡书群纵艳艳侯筱宇张光毅
- 关键词：腺病毒载体KA海马神经元凋亡
- PSD-95结构域PDZ1与腺病毒穿梭载体重组体的构建被引量：1
- 2005年
- 目的构建突触后致密物质-95(PSD-95)结构域PDZ1腺病毒重组体。方法以异硫酸氢胍-酚-氯仿一步法提取的总RNA为模板,采用反转录PCR(RT-PCR)法获得PDZ1的cDNA;与腺病毒穿梭载体用T4DNA连接酶连接;连接产物转化大肠杆菌JM109进行筛选、序列测定。结果①提取到未降解的总RNA;②经RT-PCR得到了PDZ1的cDNA;③酶切鉴定能观察到PDZ1和pAdTrack-CMV两条带;④PDZ1测序图谱与文献报道完全一致。结论获得了含目的基因PDZ1的腺病毒穿梭载体重组体。
- 胡书群纵艳艳齐静邰建敏侯筱宇张光毅
- 关键词：反转录PCR
- 诺贝尔奖史在生物化学教学中的应用价值被引量：8
- 2010年
- 诺贝尔医学奖或生理学奖和化学奖与生物化学有着非常密切的联系。将诺贝尔奖史应用到生物化学课程的教学中,可以激发学生的求知欲,提高学习兴趣,并能活跃课堂气氛,有助于提高教学质量。此外,在教与学的互动中,对于培养师生的创新意识,激发爱国情怀也有一定作用。
- 王然刘永侯筱宇
- 关键词：诺贝尔奖生物化学教学
- 中药巴戟天对晶状体醛糖还原酶的抑制作用被引量：9
- 2005年
- 目的研究中药巴戟天对晶状体醛糖还原酶(AR)的抑制作用,以期找到一种治疗糖性白内障的中药。方法提取了中药巴戟天水溶性成分,以比色法检测其对大鼠和猪的晶状体醛糖还原酶的抑制作用。结果①本实验制备的酶液的比活性分别为:猪晶状体0.166μmol.min-1.mg-1protein,大鼠晶状体0.82μmol.min-1.mg-1protein;②巴戟天对猪晶状体醛糖还原酶的半数抑制浓度(IC50)为25 mg.L-1,对大鼠晶状体醛糖还原酶的IC50为46 mg.L-1。结论中药巴戟天水溶性成分对大鼠和猪晶状体醛糖还原酶有抑制作用。
- 胡书群裴冬生侯筱宇张光毅
- 关键词：巴戟天醛糖还原酶晶状体中药
- 活化型及失活型SUMO1真核表达载体的构建及鉴定被引量：3
- 2014年
- 目的:构建活化型及失活型SUMO1(small ubiquitin-related modifier 1)真核表达载体并鉴定其蛋白活性。方法:以野生型HA-SUMO1-pc DNA3.1为模板,采用PCR扩增目的基因,将其连接入克隆载体T vector,筛选阳性重组子;将目的基因酶切回收后亚克隆入真核表达载体pc DNA3.1。将阳性克隆转染HEK293细胞,免疫印迹鉴定底物蛋白与SUMO1的结合情况(即SUMO化水平)。结果:活化型及失活型SUMO1目的基因被扩增,并且亚克隆入pc DNA3.1,且测序结果与预期一致。免疫印迹分析显示,转染活化型SUMO1组检测到显著的蛋白SUMO化条带,而失活型组则无明显条带。结论:活化型及失活型SUMO1真核表达载体成功构建,并可于HEK293细胞高效表达。
- 杜彩萍王梅段富刚侯筱宇
- 关键词：真核表达载体
