贾建军
- 作品数：14 被引量：88H指数：5
- 供职机构：云南出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：云南省科技攻关计划昆明市科技计划项目国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- pBAD原核高效表达VSV N蛋白群特异性抗原的研究
- 花群义徐自忠徐维加董俊杨晶焰杨云庆贾建军
- 1、该项目进行了VSV蛋白基因的克隆、序列分析、表达及在ELISA中的应用。成功构建了水泡性口炎病毒编码群特异性抗原N基因重组表达载体。经L-Arabinose诱导表达，可稳定、高效地表达N蛋白抗原。其表达产量约占菌体总...
- 关键词：
- 关键词：特异抗原水泡性口炎病毒动物病毒
- BTVVP7抗原基因的表达及抗原性研究
- 花群义徐自忠徐维加董俊杨晶焰杨云庆贾建军
- 该项目研究应用基因工程技术，将BTVVP7蛋白基因克隆到pBAD/Thio-TOPO表达载体中，构建的BTVVP7蛋白基因表达重组质粒，获得了BTVVP7蛋白稳定、高效表达的工程菌株，建立起基因工程生产BTVVP7蛋白抗...
- 关键词：
- 关键词：抗原基因淋巴细胞杂交瘤蓝舌病病毒动物检疫
- 蓝舌病病毒vp7基因的表达及其产物在c-ELISA中的应用被引量：3
- 2004年
- 获得稳定、高效的具有良好抗原性的蓝舌病毒(Bluetonguevirus,BTV)vp7基因重组抗原。将BTV编码群特异性抗原VP7的S7基因片段克隆至pMD18-T质粒载体中,构建S7克隆重组质粒,进行核苷酸序列分析。与已报道的多株BTV编码VP7的基因比较后发现,所测定毒株的核苷酸序列与BTV10型的S7基因同源性高达98.7%,推测的氨基酸同源性为99.3%,证实为BTV的S7基因。然后亚克隆插入pBAD/ThioTOPO表达载体,转化LGM194细胞,经抗性培养、PCR、限制性内切酶分析、测序鉴定,筛选获得BTVS7基因片段正向插入、有正确读码框的阳性克隆,成功构建了BTV群特异性抗原VP7的重组表达载体。经L-araboinose诱导表达,可稳定、高效地表达VP7蛋白抗原。SDS-PAGE、ELISA试验表明,表达蛋白为融合蛋白,具有反应原性,分子量约54.5kD,重组蛋白的获得率为1.52mg/g湿菌,其表达产量约占菌体总蛋白的12%左右,相当于93.5mg/L菌液。融合蛋白中含有BTVVP7特异性蛋白抗原,可作为c-ELISA包被抗原,为蓝舌病的免疫血清学诊断试剂的制备和分子生物学研究打下了坚实基础。
- 花群义肖荣海徐自忠杨云庆董俊杨晶焰贾建军
- 关键词：蓝舌病病毒VP7C-ELISA
- pBAD原核高效表达VSVN蛋白群特异性抗原的研究
- 花群义徐自忠徐维加董俊杨晶焰杨云庆贾建军
- 1、该项目进行了VSV蛋白基因的克隆、序列分析、表达及在ELISA中的应用。成功构建了水泡性口炎病毒编码群特异性抗原N基因重组表达载体。经L-Arabinose诱导表达，可稳定、高效地表达N蛋白抗原。其表达产量约占菌体总...
- 关键词：
- 关键词：基因表达特异抗原原核表达
- 赤羽病病毒N基因硫氧还蛋白融合表达载体的构建与表达
- 赤羽病(Akabane disease,AKAKA)是由赤羽病病毒(Akabane Virus,AKAV)引起的牛、绵羊和山羊的一种多型性传染病。此病以流产、早产、死胎、畸形产为特征。能引起先天性关节炎弯曲和水性无脑症。...
- 花群义杨云庆董俊杨晶焰贾建军周晓黎徐自忠
- 文献传递
- 实时荧光定量TaqMan RT-PCR鉴别检测水泡性口炎印第安那型和新泽西型病毒
- 本文介绍了实时荧光定量TaqMan RT-PCR鉴别检测水泡性口炎印第安那型和新泽西型病毒,该检测方法具有简单、可靠、敏感性高等优点,已成为病原体检测的重要方法.
- 花群义徐自忠杨云庆董俊杨晶焰周晓黎贾建军
- 关键词：水泡性口炎病毒荧光定量病原体检测
- 文献传递
- BTV VP7抗原基因的表达及抗原性研究
- 花群义徐自忠徐维加董俊杨晶焰杨云庆贾建军周晓黎肖荣海
- 该项目研究成果是应用基因工程技术，将BTV VP7蛋白基因克隆到pBAD/Thio-TOPO表达载体中，构建的BTV VP7蛋白基因表达重组质粒，获得了BTV VP7蛋白稳定、高效表达的工程菌株，建立起基因工程生产BTV...
- 关键词：
- 关键词：抗原基因蓝舌病毒
- 赤羽病病毒N基因硫氧还蛋白融合表达载体的构建与表达
- 为了探讨AKAV N基因结构及其与功能的关系,本文采用pBAD/TOPO原核表达系统首次对AKAV病毒核蛋白进行了表达,核蛋白以硫氧还蛋白融合蛋白的形式在大肠杆菌细胞周质空间中,以可溶性形式高效表达,融合蛋白有完全生物学...
- 花群义杨云庆董俊杨晶焰贾建军周晓黎徐自忠
- 关键词：赤羽病病毒融合蛋白基因克隆
- 文献传递
- 猪瘟的分子生物学诊断被引量：13
- 2002年
- 采用RT PCR方法 ,从经临床和血清学初步诊断为猪瘟的病料中扩增了猪瘟病毒 (CSFV)的E2基因某一片段 ;对扩增片段进行序列测定 ,通过DNAsis软件构建了系统发生树 ,确定了这一流行株 (IPI株 )在系统发生树中的位置。结果表明 ,从IPI株和石门株 (Shimen)中均扩增出 2 71bp目标片段 ,这一流行株与我国 2 0世纪 90年代以来流行的绝大多数CSFV毒株同属于基因 2群中的 2 .1基因亚群 ,与YN1、YN2、GX4、GZ1的关系较近 ,而与Shimen株、兔化弱毒株 (HCLV)等我国传统的标准毒株相距较远。这一结果为猪瘟的诊断和检疫提供了一种特异。
- 贾建军李文贵李爱云董俊覃宇悦周晓黎涂长春徐自忠
- 关键词：猪瘟分子生物学诊断猪瘟病毒RT-PCR核苷酸序列系统发生树
- 口蹄疫病毒群特异性荧光PCR检测方法研究被引量：15
- 2004年
- 应用荧光 PCR技术 ,利用 O型口蹄疫病毒 (FMDV)的 5′端 UTR区的 IRES片段设计和合成了可检测 7个血清型FMDV群特异性引物和 Taqman探针 ,建立了 1种敏感性高、特异性强、快速的检测方法 ,耗时仅为 4 h,克服了传统的病毒分离鉴定方法耗时长 ,敏感性和准确性较差 ,而且容易造成病毒扩散及环境污染的缺点 ,可广泛应用于动物的大批量、快速检疫。
- 杨素吴小伦花群义徐自忠周晓黎贾建军薄清如潘文波
- 关键词：口蹄疫病毒荧光PCR检疫
