董俊
- 作品数：56 被引量：371H指数：12
- 供职机构：云南农业大学更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家科技重大专项云南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- pBAD原核高效表达VSV N蛋白群特异性抗原的研究
- 花群义徐自忠徐维加董俊杨晶焰杨云庆贾建军
- 1、该项目进行了VSV蛋白基因的克隆、序列分析、表达及在ELISA中的应用。成功构建了水泡性口炎病毒编码群特异性抗原N基因重组表达载体。经L-Arabinose诱导表达，可稳定、高效地表达N蛋白抗原。其表达产量约占菌体总...
- 关键词：
- 关键词：特异抗原水泡性口炎病毒动物病毒
- BTVVP7抗原基因的表达及抗原性研究
- 花群义徐自忠徐维加董俊杨晶焰杨云庆贾建军
- 该项目研究应用基因工程技术，将BTVVP7蛋白基因克隆到pBAD/Thio-TOPO表达载体中，构建的BTVVP7蛋白基因表达重组质粒，获得了BTVVP7蛋白稳定、高效表达的工程菌株，建立起基因工程生产BTVVP7蛋白抗...
- 关键词：
- 关键词：抗原基因淋巴细胞杂交瘤蓝舌病病毒动物检疫
- 羊痘病毒被引量：26
- 2004年
- 羊痘病毒能引起山羊痘、绵羊痘和牛的结节性疹块病。作者着重综述山羊痘和绵羊痘。羊痘病毒的基因组较大 ,山羊痘病毒和绵羊痘病毒的基因组非常相似 ,但自然条件下一般不会发生交叉感染。临床症状主要以发热和全身性丘疹或结节为特征 ,结合其临床症状实验室用透射电子显微镜检测病毒粒子的典型形态即可做出快速诊断。病毒培养和分离虽有较高的特异性 ,但耗时长 ;因羊痘病毒和副痘病毒有相似的血清型 ,一些血清学的诊断方法如琼脂扩散试验 (AGID)、间接免疫荧光试验、检测抗体的 EL ISA等 ,因会出现抗体交叉反应而无法区分这 2种病毒的感染 ;又因羊痘感染后主要引起细胞介导免疫 ,动物接触病原后仅产生低水平的中和抗体 ,故而病毒中和试验敏感性也不高。近年来 ,用于 EL ISA检测抗原的方法已经建立 ,具有较高的特异性 ;Western印迹试验利用羊痘病毒的 P32抗原与待检血清反应 ,具有较好的敏感性和特异性 ,但价格昂贵、操作难。PCR可用来检查活体或组织培养品中羊痘病毒基因组 ;在此基础上发展了多重 PCR技术 ,不但敏感性和特异性更强 ,且大量节省了时间和精力。治疗羊痘病毒无特效药 ,做好疫苗接种等防制措施很关键 ;目前采用活疫苗和灭活疫苗来控制本病 。
- 康文玉徐自忠高洪花群义周晓黎杨云庆董俊
- 关键词：羊痘病毒山羊痘绵羊痘PCR检测载体疫苗
- 六种重要动物外来病早期快速检测试剂盒研发
- 花群义徐自忠周晓黎董俊杨建明杨云庆秦智锋吕建强詹爱军张鹤晓张常印唐泰山乔彩霞姜焱
- 该课题主要研究了六种重要动物外来病的快速检测方法，在无可获得病原体的情况下，采用病毒基因人工合成、基因克隆、蛋白质表达、纯化、ELISA检测方法研究、胶体金标记检测试纸条研制、RT－PCR、多重RT－PCR、实时荧光定量...
- 关键词：
- 关键词：动物诊断试剂盒实时荧光定量PCR
- 蓝舌病病毒vp7基因的表达及其产物在c-ELISA中的应用被引量：3
- 2004年
- 获得稳定、高效的具有良好抗原性的蓝舌病毒(Bluetonguevirus,BTV)vp7基因重组抗原。将BTV编码群特异性抗原VP7的S7基因片段克隆至pMD18-T质粒载体中,构建S7克隆重组质粒,进行核苷酸序列分析。与已报道的多株BTV编码VP7的基因比较后发现,所测定毒株的核苷酸序列与BTV10型的S7基因同源性高达98.7%,推测的氨基酸同源性为99.3%,证实为BTV的S7基因。然后亚克隆插入pBAD/ThioTOPO表达载体,转化LGM194细胞,经抗性培养、PCR、限制性内切酶分析、测序鉴定,筛选获得BTVS7基因片段正向插入、有正确读码框的阳性克隆,成功构建了BTV群特异性抗原VP7的重组表达载体。经L-araboinose诱导表达,可稳定、高效地表达VP7蛋白抗原。SDS-PAGE、ELISA试验表明,表达蛋白为融合蛋白,具有反应原性,分子量约54.5kD,重组蛋白的获得率为1.52mg/g湿菌,其表达产量约占菌体总蛋白的12%左右,相当于93.5mg/L菌液。融合蛋白中含有BTVVP7特异性蛋白抗原,可作为c-ELISA包被抗原,为蓝舌病的免疫血清学诊断试剂的制备和分子生物学研究打下了坚实基础。
- 花群义肖荣海徐自忠杨云庆董俊杨晶焰贾建军
- 关键词：蓝舌病病毒VP7C-ELISA
- pBAD原核高效表达VSVN蛋白群特异性抗原的研究
- 花群义徐自忠徐维加董俊杨晶焰杨云庆贾建军
- 1、该项目进行了VSV蛋白基因的克隆、序列分析、表达及在ELISA中的应用。成功构建了水泡性口炎病毒编码群特异性抗原N基因重组表达载体。经L-Arabinose诱导表达，可稳定、高效地表达N蛋白抗原。其表达产量约占菌体总...
- 关键词：
- 关键词：基因表达特异抗原原核表达
- 赤羽病病毒N基因硫氧还蛋白融合表达载体的构建与表达
- 赤羽病(Akabane disease,AKAKA)是由赤羽病病毒(Akabane Virus,AKAV)引起的牛、绵羊和山羊的一种多型性传染病。此病以流产、早产、死胎、畸形产为特征。能引起先天性关节炎弯曲和水性无脑症。...
- 花群义杨云庆董俊杨晶焰贾建军周晓黎徐自忠
- 文献传递
- 猴B病毒gB基因杆状病毒表达载体的构建被引量：4
- 2010年
- 根据B病毒E2490株(基因序列AF533768)人工合成猴B病毒gB基因,通过XbaI和EcoRI特异性酶切,将其亚克隆于昆虫杆状病毒表达载体pFastBacHTA,经PCR、酶切及测序鉴定,表明构建了猴B病毒gB基因杆状病毒表达重组质粒pFastHTA-gB。在此基础上,重组质粒转化DH10Bac感受态细胞,经平板抗性筛选,PCR鉴定,表明获得了转座的杆粒,为下一步进行昆虫细胞的转染和以猴B病毒gB蛋白为抗原的猴B病毒ELISA检测试剂盒的研制奠定了基础。
- 王琼吴志蕾艾军李绍东周亚敏叶玲玲董俊周晓黎
- 关键词：GB基因
- 水泡性口炎病毒核蛋白基因的克隆和序列分析
- 本文克隆了编码群特异性抗原的N基因,并进行核苷酸序列测定.为VS的血清学、分子流行病学调查和新型疫苗构建奠定基础.
- 花群义杨云庆董俊杨晶焰周晓黎徐自忠
- 关键词：水泡性口炎病毒核蛋白基因克隆
- 文献传递
- 实时荧光定量TaqMan RT-PCR鉴别检测水泡性口炎印第安那型和新泽西型病毒
- 本文介绍了实时荧光定量TaqMan RT-PCR鉴别检测水泡性口炎印第安那型和新泽西型病毒,该检测方法具有简单、可靠、敏感性高等优点,已成为病原体检测的重要方法.
- 花群义徐自忠杨云庆董俊杨晶焰周晓黎贾建军
- 关键词：水泡性口炎病毒荧光定量病原体检测
- 文献传递
