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联合肝脏离断和门静脉结扎的二步肝切除治疗结直肠癌肝转移被引量：4: 2015年; 目的探讨联合肝脏离断和门静脉结扎的2步肝切除新技术在提高结直肠癌肝转移患者可切除的意义.方法结直肠癌肝转移患者接受联合肝脏离断和门静脉结扎的2步肝切除,手术第1步,门静脉右支结扎后离断右三肝和左外侧叶肝实质,待健侧肝组织增生后再行右三肝切除.结果第1步手术后7 d,残肝体积从313.5 m L增加到559.1 m L,并在第1步手术后8 d,第2步手术行右三肝切除.第2步手术后8 d患者顺利出院,肝功能恢复基本正常,联合肝脏离断和门静脉结扎的二步肝切除诱导了残肝组织快速的增生.结论联合肝脏离断和门静脉结扎的二步肝切除提高了结直肠癌肝转移患者的可切除率.联合肝脏离断和门静脉结扎的二步肝切除有较高的并发症率和死亡率,因此需要仔细选择手术患者;该术式的可行性、安全性还需要进一步研究评估.; 张升宁李来邦任刚陈奕明刘滇生刘剑冉江华李立; 关键词：肝切除结直肠癌肝转移肝脏肿瘤

长链非编码RNA核富集转录体1调节不均一核糖核蛋白A2蛋白对人肝细胞癌进展的研究被引量：4: 2016年; 目的通过RNA免疫共沉淀寻找长链非编码RNA（lncRNA）核富集转录体1（NEAT1）相关的RNA结合蛋白,验证这些RNA结合蛋白参与NEAT1调节肝癌相关基因核内不均一核糖核蛋白A2（hnRNPA2）表达的分子机制,观察NEAT1调节hnRNP A2的表达对人肝细胞癌的进展的影响.方法查询Starbase 2.0数据,寻找与NEAT1相互作用密切的RNA结合蛋白,通过RNA免疫共沉淀明确能同时与NEAT1和NEAT1所调控基因mRNA相互作用的RNA结合蛋白,RNA pull-down明确RNA结合蛋白与NEAT1作用靶点片段,使用转染试剂Lipofectamine 2000和siRNA NEAT1（终质量浓度100 nmol/L）敲低HepG2细胞NEAT1表达,Western blot、免疫组织化学检测NEAT1对hnRNP A2蛋白的调节,使用逆转录病毒STP-重组逆转录病毒载体作为载体建立hnRNP A2过表达模型并应用于NEAT1低表达的HepG2细胞模型中,细胞计数试剂盒（CCK-8）增殖实验（10 μl/2 000个细胞）和Transwell小室研究NEAT1低表达的HepG2细胞（2×10^5个/孔）过表达hnRNP A2后与对照组的增殖、侵袭功能.HepG2经NEAT1敲低后2×10^6/0.2 ml腋下注射建立裸鼠皮下成瘤模型,与对照组（si-NC）比较肿瘤体积,hnRNP A2表达.结果 U2AF65能够与NEAT1和hnRNP A2 mRNA相互作用（富集度分别为IgG的82.659倍和53.527倍）,NEAT1敲低降低了hnRNP A2 mRNA转录和蛋白表达（P＜0.01）,这种调控作用可能与NEAT1-U2AF65复合物相关,hnRNPA2过表达可以促进NEAT1敲低的HepG2细胞增殖和侵袭功能（P＜0.01）.结论 NEAT1通过调节hnRNP A2蛋白影响了肝细胞癌细胞的增殖和侵袭能力.; 莽源祎李立冉江华张升宁刘静李来邦陈奕明刘剑高杨任刚; 关键词：肝细胞长链非编码RNA RNA结合蛋白

AFP-shRNA联合丝裂霉素对肝癌细胞的影响: 第一部分 AFP-shRNA载体扩增,鉴定及Huh肝癌细胞的培养目的：AFP-shRNA质粒载体的扩增鉴定及Huh肝癌细胞的培养。方法：培养细菌,使用axygen试剂盒获取质粒载体。使用分光光度仪测质粒的OD值,电泳...; 任刚; 关键词：丝裂霉素 AFP; 文献传递

利用脱细胞动脉基质构建组织工程胆道的可行性: 2014年; 目的通过观察胆道组织和动脉及其相应的脱细胞基质并比较其差异,探讨利用脱细胞动脉基质构建生物工程胆道的可行性。方法应用捐献肝、肾进行器官移植的心跳死亡患者捐献器官后剩余的胆道及髂动脉组织,应用胰酶、十二烷基硫酸钠、TritonX-100进行脱细胞处理,应用光学显微镜及扫描电子显微镜观察比较胆道与动脉脱细胞后的形态特点。结果脱细胞动脉基质较脱细胞胆道具有更为疏松的内膜、中膜,脱细胞后细胞外支架完整,其平均内膜厚度为(276.00±48.35)μm,与脱细胞胆道[(18.3±1.83)μm]相比,差异有统计学意义。结论脱细胞动脉基质具有良好的孔率、孔径以及完整的细胞外支架结构,是理想的组织工程支架,利用脱细胞动脉基质有可能构建组织工程胆道。; 陈奕明李立张春平冉江华张升宁李来邦高杨任刚; 关键词：脱细胞动脉胆道

长链非编码RNA核富集转录体1促进人肝癌细胞增殖和侵袭的研究被引量：4: 2016年; 目的在人肝细胞癌（HCC）标本中检测癌和癌旁组织中长链非编码RNA（lncRNA）核富集转录体1（NEAT1）的表达差异,应用化学合成小干扰RNA （siRNA）抑制两组人肝癌细胞株（HepG2和SMMC-7721）NEAT1的转录,观察NEAT1转录降低后对HCC细胞的表达谱、侵袭和增殖功能的影响.方法利用Trizol-氯仿提取HCC组织标本和癌旁组织（n=12）,细胞株（HepG2、SMMC-772、HCC-LM3）中的总RNA,实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）检测各组NEAT1表达差异[甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）作为内参],使用转染试剂Lipofectamine 2000和siRNANEAT1（终质量浓度100nmol/L）对HepG2和SMMC-7721细胞进行NEAT1敲低,RT-qPCR检测NEAT1敲低效果,并对NEAT1敲低组（NEAT1表达量＜对照组40％）和对照组细胞（n=2）进行表达谱测序,检测NEAT1敲低后对HCC细胞各肿瘤相关基因表达的影响,对NEAT1敲低组和对照组细胞进行羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）标记（终质量浓度5μmol/L）的细胞（2×10^5个/孔）增殖检测、细胞计数试剂盒（CCK-8）进行细胞增殖检测（10 μl/2 000个细胞）、Transwell细胞侵袭移动能力检测来探究NEAT1对HCC细胞（2×10^5个/孔）增殖和侵袭功能的影响.结果 NEAT1在HCC细胞和癌组织中表达量高于癌旁组织（P＜0.01）,敲低HCC细胞株NEAT1表达导致很多参与肿瘤发生、发展通路的基因表达量改变（229个基因表达上调,148个基因表达下调,表达量改变超过2倍且P＜0.05）,敲低HCC细胞株NEAT1表达降低了HCC细胞体外增殖（P＜0.01）、侵袭（P＜0.01）的能力.结论 lncRNA NEAT1在人肝细胞癌的发生、发展中发挥了原癌基因的作用.; 莽源祎李立冉江华张升宁刘静李来邦陈奕明刘剑高杨任刚; 关键词：长链非编码RNA 增殖

小体积肝移植动物模型的建立被引量：1: 2014年; 目的模拟建立大鼠40%小肝移植大鼠动物模型.方法通过肝周骨骼化去神经效果解剖,原位灌注和肝切除术建立大鼠原位40%小肝移植动物模型.结果 40%小肝原位部分肝移植1 d生存率为90.0%(18/20),2 d生存率为85.5%(17/20),4 d生存率为65.0%(13/20),7 d生存率为60.0%(12/20).结论通过技术改进,提高了手术成功率及模型的稳定性,成功建立小肝移植大鼠动物模型.; 李来邦陈奕明张升宁高杨任刚张春平; 关键词：动物模型肝移植小肝综合征

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任刚

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