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陈奕明: 作品数：25 被引量：33H指数：4; 供职机构：昆明医科大学附属甘美医院（昆明市第一人民医院）更多>>; 发文基金：云南省科技厅-昆明医学院应用基础研究联合专项资金项目昆明市科技计划项目云南省科技厅科研基金更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学更多>>

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无心跳供体肝移植临床应用体会: 目的通过总结我院实施的23例无心跳供体肝移植的围手术期情况及术后恢复情况,探讨无心跳供体(donation aftercardiac death,DCD)肝移植的临床应用的情况并总结经验。方法回顾性的分析了我院自2009...; 冉江华李立张升宁刘静李来邦陈奕明高杨任刚

胰腺损伤的诊断与治疗被引量：4: 2014年; 目的探讨胰腺损伤的诊断和治疗方法。方法回顾性分析16例胰腺损伤患者的临床资料。结果胰腺损伤属Ⅰ级3例，Ⅱ级5例，Ⅲ级4例，Ⅳ级3例，Ⅴ级1例；系单纯胰腺损伤3例，合并其他器官损伤13例。术前确诊为胰腺损伤者9例，另7例分别诊断为：脾破裂1例，肝破裂1例，开放性腹部损伤2例，空腔脏器穿孔、弥漫性腹膜炎3例。8例胰腺Ⅰ～Ⅱ级损伤者行清创、缝扎止血及胰腺周围双套管引流术；4例Ⅲ级损伤者行胰体尾切除＋脾切除术；3例Ⅳ级损伤者，行近端胰腺断端缝合、胰管缝扎加胰体尾空肠Roux-en-Y吻合术；对1例Ⅴ级损伤者行胰十二指肠切除术。术后发生胰瘘5例；治愈13例，死亡3例。结论早期诊断、及时手术探查以及术中选择合理的手术方式，对降低胰腺损伤的并发症和死亡率和改善胰腺损伤的预后均十分重要。; 张升宁李立冉江华刘静李来邦高杨梁宇陈奕明; 关键词：胰腺损伤

体外诱导大鼠肝卵圆细胞定向分化为胆管上皮细胞被引量：2: 2014年; 目的通过对大鼠肝卵圆细胞进行体外培养,建立诱导大鼠肝卵圆细胞分化为胆管上皮细胞的诱导体系。方法通过2AAF/PH建立大鼠肝卵圆细胞活化模型,使用二步酶消化法获得原代肝卵圆细胞,应用20ng/mL干细胞生长因子及10 ng/mL表皮生长因子诱导肝卵圆细胞向胆管上皮细胞分化,并应用流式细胞及免疫荧光观察细胞分化过程中OV-6及CK-19标志的表达变化。结果原代肝卵圆细胞OV-6阳性细胞为(94.30±1.40)%,CK-19阳性细胞为(3.16±1.87)%,诱导后第7代细胞OV-6阳性细胞为(4.97±0.21)%,CK-19阳性细胞为(96.17±1.21)%,差异有显著性(P<0.05)。免疫荧光结果证实CK-19广泛表达。结论成功诱导大鼠肝卵圆细胞分化为表达CK-19的胆管上皮细胞,细胞形态符合上皮细胞形态特点,表皮生长因子及干细胞生长因子可诱导肝卵圆细胞分化为胆管上皮细胞。; 陈奕明李立冉江华张升宁张蕾苏晓三张春平高杨任刚; 关键词：肝卵圆细胞胆管上皮细胞

脐血造血干细胞对人肝癌细胞种植瘤抑制作用的初步研究: 第一部分脐血造血干细胞的采集、分离、鉴定及冻存目的：分离脐血中的造血干细胞,鉴定后将其冻存,为后续实验提供所需的造血干细胞。方法：通过6%羟乙基淀粉自然沉淀法将脐血中的红细胞及有核细胞分离,并使用改良牛鲍式血细胞计...; 陈奕明; 关键词：脐血造血干细胞肿瘤细胞系肿瘤移植肿瘤标记脐血干细胞移植; 文献传递

大鼠减体积肝移植术后肝脏细胞骨架差异蛋白的表达变化: 2015年; 目的利用蛋白质组学及相关技术研究大鼠减体积肝移植术后肝脏参与细胞骨架差异蛋白的表达变化.方法实验首先用改良法建立Lewis—Wistar大鼠减体积肝移植模型,然后在术后1,3和7 d获取移植术后肝脏组织,最后应用蛋白组学技术与预先获取的供、受体原肝脏组织建立双向凝胶电泳图谱,再利用串联质谱(MS-MS)分析及数据库对胶上差异表达的蛋白质点进行鉴定.结果本次实验中所有蛋白质点采用变化倍数大于10倍为标准进行差异蛋白点的选择,结果总共发现了72个差异点,应用串联质谱分析和数据库等对差异质点进行分析和鉴定,发现有32个蛋白的功能比较明确,其中有3个差异表达的蛋白在减体积移植术后肝脏参与细胞骨架的过程,表达变化比较明显,差异蛋白质点总数占所有差异表达质点的7%.结论应用蛋白质组学的技术研究大鼠减体积肝移植术后肝脏病理生理过程中细胞骨架差异蛋白的变化,对于进一步研究细胞骨架蛋白在肝移植术后肝脏病理生理过程中的作用及作用机理有重要的意义.; 刘静李立冉江华张升宁李来邦陈奕明; 关键词：减体积肝移植细胞骨架差异蛋白

树突状细胞的培养及成熟的鉴定被引量：6: 2015年; 目的探讨人体外周血树突状细胞在体外培养诱导其成熟的方法,通过得到成熟的细胞培养技术,对树突状细胞功能的研究奠定实验基础.方法通过Ficoll-Hypaque梯度离心法得到单个核细胞,再诱导使其分化、扩增、纯化形成稳定的树突状细胞,通过树突状细胞自身形态、特异性表型,抗原摄取能力,鉴别培养的细胞,从而得到具有典型特征的树突状细胞.结果树突状细胞培养第7天,加入LPS后,倒置显微镜及扫描电镜下观察,树突状细胞成熟中,细胞胞质增大,细胞膜表面能形成大量树突状突起,表面标志物CD80、CD86、CD11c、HLA-DR的表达增高(P<0.05),共聚焦显微镜下,成熟的树突状细胞对抗原的吞噬能力减弱.结论Ficoll-Hypaque梯度离心法能够得到稳定的树突状细胞体外培养体系.; 李望张升宁冉江华苏晓三李来邦陈奕明; 关键词：树突状细胞表型抗原

联合肝脏离断和门静脉结扎的二步肝切除治疗结直肠癌肝转移被引量：4: 2015年; 目的探讨联合肝脏离断和门静脉结扎的2步肝切除新技术在提高结直肠癌肝转移患者可切除的意义.方法结直肠癌肝转移患者接受联合肝脏离断和门静脉结扎的2步肝切除,手术第1步,门静脉右支结扎后离断右三肝和左外侧叶肝实质,待健侧肝组织增生后再行右三肝切除.结果第1步手术后7 d,残肝体积从313.5 m L增加到559.1 m L,并在第1步手术后8 d,第2步手术行右三肝切除.第2步手术后8 d患者顺利出院,肝功能恢复基本正常,联合肝脏离断和门静脉结扎的二步肝切除诱导了残肝组织快速的增生.结论联合肝脏离断和门静脉结扎的二步肝切除提高了结直肠癌肝转移患者的可切除率.联合肝脏离断和门静脉结扎的二步肝切除有较高的并发症率和死亡率,因此需要仔细选择手术患者;该术式的可行性、安全性还需要进一步研究评估.; 张升宁李来邦任刚陈奕明刘滇生刘剑冉江华李立; 关键词：肝切除结直肠癌肝转移肝脏肿瘤

长链非编码RNA核富集转录体1调节不均一核糖核蛋白A2蛋白对人肝细胞癌进展的研究被引量：4: 2016年; 目的通过RNA免疫共沉淀寻找长链非编码RNA（lncRNA）核富集转录体1（NEAT1）相关的RNA结合蛋白,验证这些RNA结合蛋白参与NEAT1调节肝癌相关基因核内不均一核糖核蛋白A2（hnRNPA2）表达的分子机制,观察NEAT1调节hnRNP A2的表达对人肝细胞癌的进展的影响.方法查询Starbase 2.0数据,寻找与NEAT1相互作用密切的RNA结合蛋白,通过RNA免疫共沉淀明确能同时与NEAT1和NEAT1所调控基因mRNA相互作用的RNA结合蛋白,RNA pull-down明确RNA结合蛋白与NEAT1作用靶点片段,使用转染试剂Lipofectamine 2000和siRNA NEAT1（终质量浓度100 nmol/L）敲低HepG2细胞NEAT1表达,Western blot、免疫组织化学检测NEAT1对hnRNP A2蛋白的调节,使用逆转录病毒STP-重组逆转录病毒载体作为载体建立hnRNP A2过表达模型并应用于NEAT1低表达的HepG2细胞模型中,细胞计数试剂盒（CCK-8）增殖实验（10 μl/2 000个细胞）和Transwell小室研究NEAT1低表达的HepG2细胞（2×10^5个/孔）过表达hnRNP A2后与对照组的增殖、侵袭功能.HepG2经NEAT1敲低后2×10^6/0.2 ml腋下注射建立裸鼠皮下成瘤模型,与对照组（si-NC）比较肿瘤体积,hnRNP A2表达.结果 U2AF65能够与NEAT1和hnRNP A2 mRNA相互作用（富集度分别为IgG的82.659倍和53.527倍）,NEAT1敲低降低了hnRNP A2 mRNA转录和蛋白表达（P＜0.01）,这种调控作用可能与NEAT1-U2AF65复合物相关,hnRNPA2过表达可以促进NEAT1敲低的HepG2细胞增殖和侵袭功能（P＜0.01）.结论 NEAT1通过调节hnRNP A2蛋白影响了肝细胞癌细胞的增殖和侵袭能力.; 莽源祎李立冉江华张升宁刘静李来邦陈奕明刘剑高杨任刚; 关键词：肝细胞长链非编码RNA RNA结合蛋白

脐血造血干细胞对原发性肝细胞癌的抑制作用: 2011年; 背景:原发性肝细胞癌是一种临床常见的恶性肿瘤,虽然近年来各种治疗方式如外科手术、射频消融以及选择性动脉栓塞等治疗方式均取得了进展,但对于某些进展期肝癌患者,这些治疗方法具有一定的局限性。在这样的背景下,干细胞对恶性肿瘤的治疗或抑制作用正逐渐成为人们关注的焦点。目的:对原发性肝细胞癌的发病情况、肿瘤免疫编辑过程、肿瘤微环境以及脐血造血干细胞对原发性肝细胞癌和其他实体肿瘤的抑制作用进行综述。方法:检索万方医药网及外文生物医学期刊数据库2000-01/2010-09有关原发性肝细胞癌发病情况、免疫微环境以及造血干细胞对包括肝细胞癌在内的实体肿瘤抑制作用的文章,中文检索词为"肝癌,造血干细胞,免疫微环境",英文检索词为"hepatocellular carcinoma,hematopoietic stem cell,microenvironment"。最终筛选出33篇文献作进一步分析。结果与结论:肿瘤的发生及发展与机体免疫系统的变化密切相关,在已发生肿瘤的机体内,免疫系统处于抑制状态,对于恶性肿瘤细胞无反应或者低反应。脐血造血干细胞具有免疫原性低、分裂能力强、分化谱系广等特点,在接受移植的机体内能够分化为多种谱系的细胞,其中包括多种免疫细胞,从而弥补机体原有免疫系统的缺陷,起到杀伤肿瘤细胞、抑制肿瘤生长的作用。然而其作用机制、适应证及不良反应等仍需进一步深入研究。; 陈奕明李立冉江华; 关键词：造血干细胞肿瘤逃逸造血干细胞移植细胞分化

减体积肝移植模型大鼠肝脏能量差异蛋白的表达: 2015年; 背景:目前,蛋白质组学是一项比较成熟的科研技术,已经在肝移植基础研究领域中初步得到应用,但在大鼠减体积肝移植相关研究中的应用未曾报道。目的:应用蛋白质组学相关技术探讨大鼠减体积肝移植后与肝脏能量代谢蛋白相关的差异蛋白。方法:肝移植的供体是Lewis雌性大鼠,受体是Wistar雄性大鼠,供受体体质量差约20 g;移植肝质量/受体肝质量≈50%。采用改良减体积肝移植模型。获取供体肝组织过程中按照要求进行减体积,修整供体肝脏,将门静脉和肝下下腔静脉分别套入不同型号的套管以备套入受体的门静脉和肝下下腔静脉,胆道用细小支撑管植入供体的胆管中以备插入到受体的胆管中;最后进行受体的肝移植,受体先切除受体的原来肝脏组织,然后将准备好的供体肝脏植入受体中。造模后1,3和7 d获取移植肝脏组织,然后与预先获取冻存的供、受体肝脏组织应用蛋白组学技术建立双向凝胶电泳图谱,再利用串联质谱分析及数据库对差异表达的蛋白质点进行鉴定。结果与结论:采用变化倍数大于10倍为标准进行差异蛋白点的选择,结果总共发现了72个差异点,通过鉴定,最终32个蛋白的功能比较明确,其中有ATP合成酶β亚基、电子转化黄素蛋白β多肽和质子转运ATP合成酶3个蛋白参与了细胞能量代谢的过程,其分布于肝移植后的第1和7天,占6%。; 刘静李立冉江华张升宁李来邦张熙冰高扬陈奕明; 关键词：减体积肝移植差异蛋白能量蛋白 ATP合成酶

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