严雪瑜 作品数:23 被引量:55 H指数:5 供职机构: 广西大学动物科学技术学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广西壮族自治区自然科学基金 国家现代农业产业技术体系建设项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 更多>>
猪ANK1基因单核苷酸多态性与启动子区域活性分析 2017年 本实验旨在通过构建猪ANK1基因启动子序列的双荧光素酶报告基因系统,分析ANK1基因启动子活性,寻找ANK1基因启动子的核心区域,为下一步研究猪ANK1基因启动子序列SNP与活性之间的关系提供依据。利用Methprimer和Ali Baba2.1软件预测分析ANK1基因启动子区序列,预测其转录结合位点和Cp G岛。利用直接测序法,对广西巴马小型猪和长白猪共64个样品的ANK1基因启动子核心区域的单核苷酸多态性进行研究。双荧光素酶实验结果表明所预测的序列具有启动子活性,并寻找到启动子的核心区域;同时发现了16个SNP位点,它们分别是:-19、-133、-147、-187、-228、-246、-332、-360、-369、-468、-549、-550、-615、-696、-725和-798。 李龙 夏攀洁 綦文晶 申玉建 朱思燃 张广杰 何剑雄 严雪瑜 杨祝良 方程 邹辉 兰干球关键词:启动子 活性分析 SNP 广西巴马小型猪PAQR3基因克隆及表达谱分析 被引量:1 2016年 【目的】克隆广西巴马小型猪孕激素和脂联素分子受体3(PAQR3)基因,并研究该基因在广西巴马小型猪不同组织中的表达特性,为揭示PAQR3的功能及其在疾病模型中的作用打下基础。【方法】采用RT-PCR扩增广西巴马小型猪PAQR3基因,应用在线预测软件对其功能和结构进行生物信息学分析,并以q RT-PCR分析PAQR3基因在不同组织中的表达特性及高脂高糖诱导后的表达水平。【结果】广西巴马小型猪PAQR3基因编码区(CDS)序列全长936 bp,编码312个氨基酸,与人类(XM_006714106.2)、猕猴(NM_001257693.1)、牛(XM_010806259.1)、家犬(XM_014109889.1)、家鼠(XM_006534874.2)、羊(XM_012180242.1)、鸡(XM_001233720.3)PAQR3氨基酸序列的一致性在81%以上,其中与猕猴的亲缘关系最近,与牛的亲缘关系相对较远。PAQR3蛋白氨基酸序列包含保守的Hly IⅡ结构域,为亲水性蛋白,有7个跨膜螺旋结构;其二级结构主要是延伸链,占31.83%;该蛋白不存在信号肽,不属于分泌蛋白。q RT-PCR分析结果表明,PAQR3基因在广西巴马小型猪的不同组织中均有表达,以在肺脏中的表达量最高、脂肪中的表达量最低;经高脂高糖诱导后,PAQR3基因在广西巴马小型猪肝脏组织中的表达水平显著降低(P<0.05)。【结论】PAQR3基因在广西巴马小型猪不同组织中广泛表达,在胆固醇和甘油三脂充裕的条件下,机体可通过下调PAQR3基因的表达量来平衡胆固醇含量。 司景磊 黄玥萌 李龙 陈秋明 严雪瑜 吴延军 张笠 蒋钦杨 兰干球 郭亚芬关键词:广西巴马小型猪 克隆 表达谱分析 广西巴马小型猪PGC-1α基因克隆与组织表达分析 被引量:3 2014年 目的克隆广西巴马小型猪PGC-1α基因编码区(CDS)序列,利用RT-PCR和QRT-PCR方法分析PGC-1αmRNA组织表达情况。方法本实验以广西巴马小型猪背最长肌cDNA为模版,PCR扩增PGC-1α基因CDS序列,将其连接至pEASY-T5载体,转染细菌、验证和序列测定;通过RT-PCR半定量和QRT-PCR实时荧光定量检测PGC-1α基因在小型猪多个组织中的表达情况。结果克隆获得广西巴马小型猪PGC-1α基因CDS序列,全长2391 bp,编码796个氨基酸,与参考序列的同源性为99.9%,两处碱基发生同义突变,分别是C-A1105和GA1524;PGC-1α基因在广西巴马小型猪心脏和肾脏中的表达丰度最高,其次是肝脏、皮下脂肪和背最长肌,而在胰腺中未检测到其表达。结论成功克隆了广西巴马小型猪PGC-1α基因编码区序列并进行了多种组织表达分析,为后续研究PGC-1α在小型猪2型糖尿病发生过程中作用途径打下基础。 严雪瑜 敖秋桅 严小东 蒋钦杨 郭亚芬 兰干球关键词:广西巴马小型猪 PGC-1Α基因 高脂高糖饲料联合低剂量链脲佐菌素(STZ)诱导广西巴马小型猪2型糖尿病动物模型的建立 被引量:9 2017年 本研究的目的是应用高脂高糖饲料联合低剂量STZ建立理想的广西巴马小型猪2型糖尿病模型。挑取8头雌性巴马小型猪体重为(21.64±0.62)kg分成对照组和实验组2组,每组4头。对照组标准饲喂9个月(control,CTR);实验组高脂高糖饲料饲喂6个月后按照60 mg/kg给予注射链脲佐菌素(STZ),接着高脂高糖饲喂至9个月(HFHC+STZ,HS);每个月检测空腹血糖、空腹胰岛素、甘油三酯和胆固醇的变化。静脉注射葡萄糖耐实验检测葡萄糖利用率。高胰岛素血症与葡萄糖耐受损判定为胰岛素抵抗。结果显示:与对照组相比,实验组猪均发生二型糖尿病症状,包括胰岛素抵抗和葡萄糖耐受损。实验结束时,HS组与CTR组空腹血糖分别为(13.83±0.74 vs 4.28±0.09)mmol/L;空腹胰岛素分别为(40.67±0.80 vs 38.94±1.75)m U/L。本研究通过高脂高糖饲料联合低剂量STZ成功建立广西巴马小型猪2型糖尿病模型,为后续糖尿病的临床研究和药物治疗奠定了基础。 吴延军 夏攀洁 严雪瑜 申玉建 何剑雄 杨祝良 郭亚芬 兰干球关键词:广西巴马小型猪 STZ 2型糖尿病 广西巴马小型猪PGC-1α基因克隆与组织表达分析 目的 克隆广西巴马小型猪PGC-1α基因编码区(CDS)序列,利用RT-PCR和QRT-PCR方法分析PGC-1α mR-NA组织表达情况.方法 本实验以广西巴马小型猪背最长肌cDNA为模版,PCR扩增PGC-1α基因C... 严雪瑜 敖秋桅 严小东 蒋钦杨 郭亚芬 兰干球关键词:广西巴马小型猪 PGC-1Α基因 广西巴马小型猪Glut4基因克隆和真核表达研究 葡萄糖转运蛋白4(Glut4)介导的葡萄糖转运是肌糖代谢的主要限速步骤.本研究旨在克隆广西巴马小型猪Glut4基因,构建真核表达载体,转染细胞研究Glut4功能.以广西巴马小型猪背最长肌组织作为实验材料,通过RT-PCR... 刘嘉琪 程晓芳 周亭亭 严雪瑜 韦玲静 蒋钦杨 黄艳娜关键词:葡萄糖转运蛋白4 基因克隆 真核表达 广西巴马小型猪2型糖尿病模型骨骼肌糖代谢及能量代谢相关基因的表达差异 被引量:5 2016年 目的探讨糖代谢及能量代谢过程中的关键调控基因(PGC-1α、Glut-4、ERRα、NRF-1、TFAM和线粒体基因)在2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)发生中的作用。方法以广西巴马小型猪T2DM模型建立的发病组和未发病组的背最长肌为实验材料,利用QRT-PCR实时荧光定量的方法对糖代谢及能量代谢相关基因mRNA和线粒体基因的表达情况进行检测。结果在广西巴马小型猪背最长肌中,T2DM组PGC-1α、Glut-4、ERRα和NRF-1的相对表达量均显著高于非T2DM组,TFAM和线粒体基因的相对表达量则稍低于非T2DM组。结论在T2DM巴马小型猪骨骼肌中,上调PGC-1α及其下游基因Glut-4、ERRα和NRF-1的表达水平,有利于改善葡萄糖代谢;而线粒体合成不足,致使ATP合成量不够,或引起胰岛素抵抗,进而导致2型糖尿病的发生。 严雪瑜 蒋钦杨 吴延军 梁家充 郭亚芬 兰干球关键词:广西巴马小型猪 2型糖尿病 骨骼肌 胰岛素抵抗 饲料湿喂与干喂对断奶仔猪饲养效果比较 被引量:4 2010年 断奶使仔猪生活条件发生巨大转变,由依靠母乳和采食部分饲料到完全依靠采食饲料的独立生活。仔猪断奶初期采食量普遍较低,并且非常不稳定,采取湿喂法能有效地降低断奶应激现象,是提高断奶仔猪采食量的有效办法。试验结果表明,断奶仔猪湿喂比干喂效果较好,湿喂仔猪食得快、吃得多、精神状态较好,增重较快,很快适应断奶后饲养,而喂干饲料的食得慢,神态较差,特别在断奶初期比较明显。经过30d的对比试验,湿喂组平均日增重442g,而干喂组平均日增重只有379g,效果比较明显。 张绍峰 严小东 钟溪德 严雪瑜关键词:断奶仔猪 饲喂方法 广西巴马小型猪PCG-1α基因CDS克隆与真核载体构建 严雪瑜 蒋钦杨关键词:广西巴马小型猪 PGC-1Α基因 长×巴F_2代杂交猪黑素皮质激素受体Ⅰ基因克隆与多态性分析 被引量:1 2015年 【目的】探讨猪黑素皮质激素受体Ⅰ基因(MC1R)碱基突变与其毛色分离的相关性,为研究猪的毛色遗传分子机制及遗传育种奠定基础。【方法】根据Gen Bank已公布的猪MC1R基因同源序列(AF326520)设计引物,以70头不同毛色的长白猪×巴马小型猪杂交F2代(长×巴F2代)猪血液总DNA为模板,PCR扩增MC1R基因序列,并利用PCR-SSCP对长×巴F2代杂交猪的MC1R基因进行单核苷酸多态性(SNP)分析。【结果】长×巴F2代杂交猪MC1R基因编码区序列约963 bp,与参考序列(AF326520)的同源性为99.37%,共有6处碱基发生突变,其中两处(284G→A和306T→C)为错义突变,284G→A导致95Val→Met,306T→C导致102Leu→Pro;其余4处均为同义突变,分别为6C→T、51G→A、364T→C和730G→A。PCR-SSCP检测结果显示,长×巴F2代杂交猪的MC1R基因均未表现出多态性。【结论】长×巴F2杂交猪的MC1R基因存在碱基突变,其基因型为ED1,但在不同毛色的长×巴F2代杂交猪群体中并未发现MC1R基因呈多态性,即猪毛色多样性不能简单以MC1R基因的多态性进行分析。 敖秋桅 严雪瑜 蒋钦杨 唐家梁 兰干球 郭亚芬 蒋和生关键词:毛色 碱基突变 PCR-SSCP