王平
- 作品数：2 被引量：24H指数：1
- 供职机构：北京医科大学更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组腺病毒表达载体介导艾滋病毒Vif蛋白调控KSHV潜伏感染的初探
- 2011年
- 目的:利用AdEasy腺病毒载体系统包装含人类免疫缺陷病毒1型(艾滋病毒:HIV-1)病毒体感染性因子(Vif)的重组腺病毒,使之感染原发性渗出性淋巴瘤细胞系BCBL-1细胞,并检测Vif蛋白对细胞中卡波济肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi′ssarcomaassociated herpesvirus,KSHV)潜伏感染与裂解性复制的影响。方法:从实验室先前构建的重组真核表达质粒pCI-neo-Vif中扩增出Vif基因,插入到腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中构建成pAdTrack-Vif,酶切线性化的重组穿梭质粒与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共同转化感受态BJ5183细胞构建成重组腺病毒质粒。重组腺病毒在AD293细胞中得到包装和扩增。用荧光计数法测定腺病毒滴度,以感染复数(MOI)为1的病毒量感染靶细胞BCBL-1,荧光显微镜观察靶细胞中绿色荧光蛋白(GFP)的表达,并利用逆转录PCR(RT-PCR)和免疫印记(Western blot)技术分别检测Vif基因在靶细胞中的转录和表达情况,而且采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和Western blot分别检测KSHV裂解期基因ORF26 mRNA转录及裂解期蛋白vIL-6的表达。结果:经酶切鉴定、核酸序列测定、GFP表达和病毒上清液PCR证实成功包装了携带HIV-1 Vif基因的重组腺病毒,滴度为2.5×108 TU/ml。重组腺病毒感染BCBL-1细胞48 h后,80%以上的细胞中表达GFP,RT-PCR和Western blot均能够在相应位置检测到目的基因Vif的条带。Real-time PCR和Western blot结果显示,Vif降低KSHV ORF26 mRNA转录水平及vIL-6蛋白表达。结论:成功包装了含HIV-1 Vif基因的重组腺病毒且在BCBL-1细胞中表达的HIV-1 Vif蛋白能够抑制KSHV裂解性复制、增强病毒的潜伏感染。
- 贾雪梅王平秦娣卢春
- 关键词：KSHV病毒复制
- 康宁克通A、利多卡因复合用于胶原酶盘外溶解术被引量：24
- 1999年
- 目的：观察康宁克通Ａ、利多卡因复合用于胶原酶盘外溶解术的作用。方法：随机将７０例患腰椎间盘突出症、经骶裂孔（硬膜外）前间隙置管注入胶原酶行盘外溶解术的患者分为三组。１、单纯胶原酶组（Ｃ组）；２、胶原酶、利多卡因组（Ｃ＋Ｌ组）；３、胶原酶、康宁克通Ａ、利多卡因组（Ｃ＋Ｋ＋Ｌ组）。结果表明：Ｃ＋Ｋ＋Ｌ组２周疼痛缓解率较Ｃ组、Ｃ＋Ｌ组明显增加。术后７天、１４天ＶＡＳ评分Ｃ＋Ｋ＋Ｌ组明显低于Ｃ组和Ｃ＋Ｌ组。２周直腿抬高试验好转率Ｃ＋Ｋ＋Ｌ组也明显高于Ｃ组。术后３个月近期疗效随访观察，Ｃ＋Ｋ＋Ｌ组优良率（９１％）虽高于Ｃ组（６７％），但３组间有效率无显著差异。本组总有效率达９７％，优良率达８１％。另外，本法将ＣＴ定位改进为用利多卡因试验剂量测定阻滞平面，以确定是否与病变椎间盘节段相符，然后注入治疗药，省却了ＣＴ定位的麻烦。从而使本法可以在基层医院推广应用，具重要临床价值。结论：１、经骶裂孔硬膜外前间隙胶原酶盘外溶解术是治疗腰椎间盘突出症的有效方法。２、康宁克通Ａ复合利多卡因用于胶原酶盘外溶解术可明显缓解术后２周内的疼痛，并可提高近期优良率。
- 刘延青刘延青康妹娟王平康妹娟冯瑞晶
- 关键词：康宁克通A利多卡因胶原酶溶解腰椎间盘突出
