李涛
- 作品数：25 被引量：24H指数：4
- 供职机构：泸州医学院心血管医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省科技支撑计划四川省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 心房快速起搏致豚鼠房颤模型建立及心房肌动作电位的改变被引量：4
- 2012年
- 目的:建立一种快速高效的豚鼠急性心房颤动(atrial fibrillation,AF)模型,探讨房颤对心房肌动作电位时程(APD)的影响。方法:高频刺激豚鼠右心房处诱发房颤,记录心电图(ECG)及单相动作电位(MAP)的改变。结果:6只豚鼠共给予Burst刺激70次,以AF诱发时长>1s为模型建立成功。实验共诱发AF成功62次,成功率为88.75%,平均时长为9.860±22.035s。模型建立成功的豚鼠心房率显著增加,由205.184±31.278次/min增加到661.312±251.401次/min(P<0.05)。心房肌APD10、APD20、APD50、APD90及P-P周期长度(CL)在AF发作时显著减小(P<0.05),分别由6.038±4.172ms、13.029±11.003ms、37.193±12.504ms、84.453±24.567ms、300.148±52.020ms减小到3.291±1.906ms、6.451±3.140ms、18.227±12.646ms、51.887±36.137ms、105.414±44.567ms。动作电位幅值由AF前的34.422±10.425mV降至AF时的15.285±7.499mV,显著降低(P<0.05)。结论:经高频刺激右心房方法制作房颤动物模型成功率高、重复性好,并伴有心房肌的电生理改变,是建立急性房颤模型的有效方法。
- 陈唐葶李涛李妙龄刘智飞杨艳曾晓荣
- 关键词：心房颤动动物模型单相动作电位
- 蛋白激酶A在慢性心房颤动患者2型小电导钙激活钾通道调控中的作用被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨心房颤动(AF)时心房肌细胞2型小电导钙激活钾通道(SK2通道)功能的改变及蛋白激酶A(PKA)相关途径对SK2通道电流的调节。方法:从体外循环手术中获取右心耳组织,应用改良的急性酶分离法获得人心房单个心肌细胞,采用膜片钳全细胞记录模式进行SK2通道电流记录。对比窦性心律(SR)组和AF组SK2通道电流密度及其在混合电流中所占比例的变化。观察PKA特异性抑制剂H-89对SK2通道电流的作用。采用BCA法和ELISA法检测心房组织总蛋白和PKA的含量。结果:(1)SR组和AF组的SK2通道电流均呈现内向整流特性。AF组SK2通道电流密度明显增高,且在混合电流中所占比例增加。在-130 mV钳制电压下,SR组和AF组SK2通道电流密度分别为(-2.61±0.14)pA/pF和(-6.21±0.59)pA/pF,在混合电流中所占比例分别为(20.01±1.44)%和(42.87±1.79)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)H-89能够降低SR组和AF组SK2通道电流密度,且对AF组SK2通道电流密度的抑制更明显。在-130 mV钳制电压下,H-89对SR组和AF组SK2通道电流密度的抑制率分别为(39.27±4.08)%和(76.32±2.94)%;SK2通道电流在混合电流中比例亦下降,抑制率分别为(37.48±4.77)%和(56.40±3.66)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)AF使PKA含量下降。SR组和AF组PKA含量分别为(511.91±7.22)ng/L和(444.09±7.88)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:AF患者心房肌细胞SK2通道电流密度及其在混合电流中比例升高,是AF发生和维持的基础之一,电流改变参与了心房电重构过程。PKA能够通过一定途径调节SK2通道功能,且对AF心房肌细胞SK2通道的调节更为显著。
- 张丽李涛李妙龄毛亮谭晓秋杨艳曾晓荣
- 关键词：心房颤动小电导钙激活钾通道蛋白激酶A
- α-actinin2增加SK2通道蛋白在HEK293细胞膜上的表达
- 目的:小电导钙激活钾通道(Small Conductance Ca2+activated K+Channels,SKchannels)在哺乳动物心肌组织中高度表达,参与心肌细胞动作电位复极末期,对动作电位时程和形态有重要...
- 李涛陈唐葶谭晓秋李妙龄李畅杨艳曾晓荣
- 原发性高血压患者与非高血压患者肠系膜动脉大电导钙激活钾通道蛋白质表达水平的差异
- 目的：检测原发性高血压患者与非高血压患者肠系膜动脉BK通道蛋白质表达水平的差异。方法：提取人肠系膜动脉平滑肌蛋白质，用western blot方法检测BK通道α、β亚单位及GAPDH蛋白质的表达。以GAPDH蛋白质为内参...
- 毛亮李涛黄文俊谭晓秋兰欢曾晓荣刘智飞杨艳
- 关键词：原发性高血压肠系膜动脉大电导钙激活钾通道
- 文献传递
- 一种有效记录人心房肌细胞小电导钙激活钾通道电流的方法(英文)被引量：2
- 2011年
- 目的:探讨一种有效的记录人心房肌细胞小电导钙激活钾通道(small conductance Ca2+-activated K+channels,SK)电流的全细胞膜片钳方法。方法:以人心房肌细胞为研究对象,采用传统全细胞膜片钳技术,记录人心房肌细胞的小电导钙激活钾通道的宏观电流。传统全细胞模式形成后,分别记录在浴液中加入apamin(100 nM)前后的电流,两者相减就得到了apamin敏感的SK2的电流。结果:采用传统全细胞膜片钳技术,能有效记录人心房肌细胞上apamin敏感的宏观电流。该电流是内向整流,去极化激活时,无明显失活现象,无尾电流出现,这些都符合SK2电流特性。结论:本实验提供了一种简单、有效的记录人心房肌细胞SK2宏观电流的方法,为今后深入的研究提供了实验基础。
- 李涛李妙龄雷明谭晓秋丁银元杨艳曾晓荣
- 关键词：小电导钙激活钾通道膜片钳
- 蛋白激酶C对心房颤动患者心房肌小电导钙激活钾通道的影响
- 2014年
- 目的:比较心房颤动(AF)时蛋白激酶C(PKC)对小电导钙激活钾通道(SK)电流的影响,探讨人AF时PKC途径对SK2通道的调节作用。方法:取行体外循环手术患者新鲜的右心耳组织,采用改良的酶分离法获得单个心房肌细胞,全细胞膜片钳模式且电极液中游离钙离子浓度为5×10-7 mol/L时记录SK2通道电流。比较正常的窦性心律组(SR组)和AF组患者心房肌细胞SK2通道电流密度,观察PKC特异性激活剂PMA对SK2通道电流的影响。结果:1AF组SK2通道电流密度明显大于SR组,且AF组SK2通道电流在混合内向电流中所占的比例明显增加;在-130mV膜电压下,SR组和AF组SK2通道电流密度分别(-5.10±0.32)pA/pF(nSR=5)和(-10.71±0.73)pA/pF(nAF=5),P<0.05;SR组和AF组SK2通道电流在混合内向电流中所占的比例分别为(23.20±1.09)%和(32.87±1.81)%(nSR=5,nAF=6),P<0.05。2PKC激活剂PMA降低SR组和AF组SK2通道电流密度及其在混合电流中所占的比例,AF组的抑制比大于SR组;在-130mV电压下,PMA对SK2通道电流的抑制比分别为(8.39±0.80)%和(20.9±0.70)%。结论:AF时SK2通道功能增强,激活PKC后可下调SK2通道电流,且对AF患者SK2的调节作用更显著,推测PKC相关途径对SK2通道的调控参与了心房电重构过程。
- 范学慧李妙龄李涛谭晓秋毛亮杨艳曾晓荣
- 关键词：心房颤动小电导钙激活钾通道蛋白激酶C
- 人心房肌小电导钙激活钾通道在HEK293细胞上的表达与电生理学特性被引量：1
- 2013年
- 目的:克隆人心房肌小电导钙激活钾通道亚型2(SK2),构建稳定表达SK通道的HEK293细胞系并研究其基本电生理学特性。方法:以人心房肌为标本,通过逆转录,重叠PCR法和定向克隆构建真核表达载体pIRES-hrGFP-SK2,采用脂质体法转染至HEK293细胞并筛选稳定表达的细胞系;使用全细胞和单通道膜片钳技术进行电流记录,研究其基本电生理学特性。结果:全细胞和单通道膜片钳均能在表达的HEK293细胞上记录到SK2通道电流,其电流具有明显的胞内钙离子依赖性。结论:成功构建稳定表达人心房肌SK2通道的HEK293细胞系,为以后研究通道功能活动奠定了基础。
- 谭晓秋陈桂兰李畅李妙龄李涛杨艳井上勋曾晓荣
- 关键词：小电导钙激活钾通道基因转染心房颤动
- 使用不同组织裂解液提取人心房组织膜蛋白的研究被引量：1
- 2012年
- 目的:寻找一种适用于Western boltting实验的提取人心房组织膜蛋白的组织裂解液的配制方法。方法:配制两种不同的组织裂解液A、B。应用组织裂解液A、B及Bio-Rad公司提取膜蛋白的试剂盒,分别对人右心耳组织进行膜蛋白提取,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对蛋白进行分离,免疫印迹法检测SK2膜蛋白的表达,比较三种裂解方法的裂解效果。结果:三种不同的裂解方法提取的膜蛋白,其中用组织裂解液A和组织裂解液B提取的膜蛋白能满足Western blotting的实验要求,比用试剂盒提取的方法实验效果好。结论:组织裂解液A和组织裂解液B可作为人心房组织提取SK2膜蛋白的组织裂解液。
- 李涛毛亮黄文俊谭晓秋杨艳曾晓荣
- 关键词：WESTERNBLOTTING
- 二性霉素B与β-escin混合穿孔电极液在人心房肌细胞SKca电流记录中的应用
- 目的:建立用二性霉素B(amphotericin B)与β-escin穿孔的膜片钳(perforated clamp,PPR)技术,用以研究钙离子对人心房肌细胞小电导钙激活钾通道(small conductanceCa-...
- 王华李涛雷明李妙龄丁银元杨艳曾晓荣
- 关键词：二性霉素B人心房肌细胞
- 文献传递
- ELISA方法检测慢性心房颤动患者心房肌中SK2蛋白的表达被引量：5
- 2012年
- 目的探讨慢性心房颤动患者与窦性心律患者心房组织SK2蛋白表达水平的差异。方法将22例接受体外循环手术患者常规切除的右心耳组织作为研究对象,根据心房颤动的定义将标本分为2组:窦性心律组(n=12)、心房颤动心律组(n=10),提取患者心房组织的总蛋白,采用二辛可宁酸(BCA)方法检测总蛋白浓度,应用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测心房组织SK2蛋白水平。结果每孔上样量总蛋白为0.1mg的条件下,窦性心律组患者心房组织SK2蛋白浓度为(1.13±0.12)ng/mL,心房颤动心律组患者心房组织SK2蛋白浓度为(3.98±0.48)ng/mL,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢性心房颤动患者心房肌组织SK2蛋白的表达水平明显高于窦性心律患者。
- 李涛毛亮谭晓秋李妙龄杨艳刘智飞曾晓荣
- 关键词：心房颤动酶联免疫吸附测定
