孔秀英
- 作品数:5 被引量:94H指数:3
- 供职机构:中国农业科学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 山羊草属C、U、M基因组和小麦B基因组特异重复序列的克隆及应用
- 孔秀英
- 关键词:山羊草属小麦属基因文库RAPD原位杂交
- 小麦抗病基因表达谱中的文库构建与筛选方法研究被引量:45
- 2002年
- 以抗白粉病品系“百农 32 17×Mardler”BC5F4为材料 ,构建了白粉病菌诱导的普通cDNA文库和抑制消减杂交(SSH)cDNA文库。分别对两文库进行了一定规模的测序 ,获得普通cDNA文库不重复ESTs 387条和SSHcDNA文库ESTs 76 0条。将获得的ESTs与GenBank序列进行了BLASTn、BLASTx同源性分析。结果表明 :在普通文库中 ,一些参与光合作用与核糖体构成等的基因出现频率较高 ,而获得的抗病相关基因则较少。消减文库在构建方法、抗病相关基因的富集等方面具有明显的优越性 ,是目前抗病基因表达谱研究中的较好方法。利用高密度点阵膜杂交技术对两文库的筛选结果表明 ,该方法具有相对简便易操作、杂交膜可反复使用等优点 ;但也存在mRNA及同位素用量大等问题。经筛选 ,消减文库中有 5 4 1%的功能已知ESTs为抗病相关基因 。
- 骆蒙孔秀英刘越周荣华贾继增
- 关键词:CDNA文库杂交筛选小麦文库构建
- 小麦抗白粉病侵染初期的表达序列标签分析被引量:31
- 2002年
- 以抗白粉病品系“百农 32 17×Mardler” BC5F4为材料 ,构建了一个白粉病菌接种初期的抑制消减杂交cDNA文库 ,测序获得 76 0条ESTs。与GenBank序列进行BLASTx分析 ,获功能已知ESTs 2 71条。通过分析抗病相关基因 ,推测G蛋白介导的信号传导途径、SA信号传递系统、MAP相关信号传递系统等参与了小麦抗白粉病过程。SAR基因在抗病相关ESTs中的种类与数量最多。数据显示苯丙烷代谢途径、细胞壁结构修饰作用、细胞保卫机制参与了抗病过程。未知功能ESTs与GenBank序列进行BLASTn分析 ,其中许多与病原菌、非病原菌诱导cDNA文库来源的ESTs同源 ;新ESTs占全部ESTs的 16 6 %。
- 骆蒙孔秀英霍纳新周荣华贾继增
- 关键词:小麦抗白粉病表达序列标签
- 基于基因组学的小麦衰老研究平台
- 贾继增孔秀英高丽锋赵光耀刘旭
- 基于抑制消减杂交方法的小麦抗白粉病相关基因表达谱被引量:28
- 2002年
- 以抗白粉病品系“百农3217×Mardler”BC_5F_4为材料,构建了一个白粉病菌接种初期的抑制消减杂交cDNA文库,获得760条表达序列标签(expressed sequence tags, EST).在 GenBank上进行BLASTn与 BLASTx分析,结合文库高密度点阵膜的杂交差示筛选,获功能已知的抗病相关EST 65种,199条.通过分析抗病相关基因表达谱,推测 SA(salicylic acid)信号传递系统、MAP相关信号传递系统等参与了小麦抗白粉病过程.SAR(systemic aquired resistance)系统基因在表达谱中的种类与数量最多.伴随着细胞防卫反应的启动,细胞保卫机制也被激活,抗氧化物质基因大量表达.较多证据证明苯丙烷代谢途径参与了抗白粉病植保素的合成;检测到几种细胞壁结构修饰酶和抑制病原菌生长的蛋白酶抑制因子.以半胱氨酸蛋白酶为主的几种蛋白酶基因在已知功能EST中有一定的表达频率.
- 骆蒙孔秀英霍纳新周荣华贾继增
- 关键词:小麦白粉病抗病相关基因基因表达谱抗病机制CDNA文库