骆蒙 作品数:20 被引量:372 H指数:11 供职机构: 内蒙古大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 内蒙古自治区自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
小麦抗病基因表达谱中的文库构建与筛选方法研究 被引量:45 2002年 以抗白粉病品系“百农 32 17×Mardler”BC5F4为材料 ,构建了白粉病菌诱导的普通cDNA文库和抑制消减杂交(SSH)cDNA文库。分别对两文库进行了一定规模的测序 ,获得普通cDNA文库不重复ESTs 387条和SSHcDNA文库ESTs 76 0条。将获得的ESTs与GenBank序列进行了BLASTn、BLASTx同源性分析。结果表明 :在普通文库中 ,一些参与光合作用与核糖体构成等的基因出现频率较高 ,而获得的抗病相关基因则较少。消减文库在构建方法、抗病相关基因的富集等方面具有明显的优越性 ,是目前抗病基因表达谱研究中的较好方法。利用高密度点阵膜杂交技术对两文库的筛选结果表明 ,该方法具有相对简便易操作、杂交膜可反复使用等优点 ;但也存在mRNA及同位素用量大等问题。经筛选 ,消减文库中有 5 4 1%的功能已知ESTs为抗病相关基因 。 骆蒙 孔秀英 刘越 周荣华 贾继增关键词:CDNA文库 杂交筛选 小麦 文库构建 转ACC合成酶反义基因耐贮藏甜瓜的农艺及生理生化特性 甜瓜(Cucumis melo L.)是世界十大水果之一,具有较重要的经济价值。许多品种的甜瓜果实成熟后,软化腐烂速度快,不耐贮运,造成很大经济损失,并严重影响着甜瓜生产的发展。河套蜜瓜是内蒙古河套地区特产的优良地方甜瓜... 哈斯阿古拉 郝金凤 骆蒙 扈廷茂 方天祺关键词:甜瓜 转基因 耐贮藏 文献传递 基于抑制差减杂交方法的小麦抗白粉病相关基因表达谱研究 白粉病是中国小麦生产中的主要真菌病害之一,由白粉病菌ErysiphegraminisDC引起.深入研究小麦的抗病机制,是寻找培育广谱、高效、稳定、持久抗病品种冷气途径的有效方法.该研究尝试将抑制差减杂交(SSH)cDNA... 骆蒙关键词:小麦 白粉病 抑制差减杂交 抗病相关基因 基因表达谱 白粉病菌诱导的小麦抑制差减文库构建与杂交点阵膜制备 被引量:10 2003年 以本实验室培育的抗白粉病品系“百农 32 17×Mardler”BC5F4为材料 ,构建了一个白粉病菌诱导的抑制差减杂交cDNA文库。建库过程质量分析表明 ,差减杂交效率较高 ,文库质量较好。文库滴度为 4 .2× 10 9cfu·ml-1;插入片段平均为 30 0bp左右。挑取文库阳性克隆 96 0个 ,扩增插入片段 ,将其制备成高密度杂交点阵膜。通过探针杂交检测表明 ,本研究制备点阵膜的方法简便可靠 。 骆蒙 孔秀英 霍纳新 徐春晓 贾继增关键词:小麦 白粉病 抗病机制 表达序列标签 甜瓜多聚半乳糖醛酸酶基因cDNA的克隆和序列分析 被引量:10 2003年 以甜瓜品种河套蜜瓜成熟果实mRNA为模板,经反转录合成和PCR扩增得到编码多聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonase,PG)基因全长cDNA,将其克隆于pUC19质粒中获得重组质粒pCMPG.此cDNA长1183bp,包括一个393个氨基酸残基组成的开放阅读框架.与已报道的甜瓜PG基因cDNA核苷酸序列比较同源性为99.3%,相应的氨基酸的同源性为98.5%. 张丽 哈斯阿古拉 张竞秋 骆蒙 莫日根 方天祺关键词:河套蜜瓜 核苷酸序列 几种cDNA差减文库构建方法的比较 被引量:33 2000年 cDNA差减文库的构建是研究基因差异表达、缩小目的基因筛选范围的理想方法。近年来报道了多种构建方法 ,并形成了两个发展趋势 ,但目前还无一种方法被普遍认可。现就几种常见方法的原理、思路及优缺点进行了比较 ,以供借鉴。 骆蒙 孔秀英 贾继增关键词:差减文库 差减杂交 CDNA 小麦抗白粉病侵染初期的表达序列标签分析 被引量:31 2002年 以抗白粉病品系“百农 32 17×Mardler” BC5F4为材料 ,构建了一个白粉病菌接种初期的抑制消减杂交cDNA文库 ,测序获得 76 0条ESTs。与GenBank序列进行BLASTx分析 ,获功能已知ESTs 2 71条。通过分析抗病相关基因 ,推测G蛋白介导的信号传导途径、SA信号传递系统、MAP相关信号传递系统等参与了小麦抗白粉病过程。SAR基因在抗病相关ESTs中的种类与数量最多。数据显示苯丙烷代谢途径、细胞壁结构修饰作用、细胞保卫机制参与了抗病过程。未知功能ESTs与GenBank序列进行BLASTn分析 ,其中许多与病原菌、非病原菌诱导cDNA文库来源的ESTs同源 ;新ESTs占全部ESTs的 16 6 %。 骆蒙 孔秀英 霍纳新 周荣华 贾继增关键词:小麦 抗白粉病 表达序列标签 锁阳(Cynomorium songaricum Rupr.)不同生育期营养成分的动态研究 被引量:18 1994年 对锁阳肉质茎的营养成分,过去曾有人只作过零散的报导,且大都无含量数据.本文对不同生育期锁阳肉质茎所含营养成分的种类及含量进行了系统地比较研究,发现锁阳中除含有药用成分外,还含有丰富的还原糖、淀粉、蛋白质、多种氨基酸及微量元素等营养成分.因此,锁阳不仅可以药用,而且具有广阔的开发利用价值. 苏格尔 刘基焕 骆蒙 孙卫国 傲特根嘎关键词:锁阳 蛋白质 生育期 营养成分 河套蜜瓜Cucumis melo CV Hetau成熟期中某些生理生化过程的变化 被引量:16 1996年 对河套密瓜成熟过程中生长速率、呼吸强度以及内源乙烯含量变化的研究表明:该种甜瓜属呼吸跃变型果实,从开花到成熟约为38d;呼吸跃交出现之前乙烯开始产生,其含量升高先于呼吸跃变.可溶性精含量在成熟过程中不断增高,在呼吸峰值时达到最大,淀粉含量出现一个由积累到降解的变化.此外也研究了瓜硬度、色泽和可溶性固形物的变化. 骆蒙 李天然 张治中 方天祺关键词:甜瓜 河套蜜瓜 乙烯 糖代谢 Analysis of Resistance to Powdery Mildew in Wheat Based on Expressed Sequence Tags (EST) Technique 被引量:3 2002年 Powdery mildew is a serious disease of wheat in China. As part of ITEC (International Triteace EST cooperation), EST (expressed sequence tags) technique was used to explore the gene expression in leaf induced by Erysiphe graminis DC. A conventional cDNA library was constructed, and a total of 1 500 clones picked randomly from the library were sequenced, three hundred and eighty_seven ESTs of them were unique, which got the Accession Number in GenBank. About 49.4% ESTs showed significant similarity to functions of known sequences in GenBank. There are 196 ESTs' with functions not able to be determined, and eighty_four ESTs were demonstrated to be novel sequences. High_density dot membranes from unique clones were produced, and several disease resistance related genes were screened by differential hybridization. 骆蒙 孔秀英 姜涛 贾川 周荣华 贾继增关键词:WHEAT