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涂长春
作品数:
6
被引量:96
H指数:4
供职机构:
中国人民解放军农牧大学军事兽医研究所
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
农业科学
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合作作者
殷震
中国人民解放军农牧大学军事兽医...
李金中
中国人民解放军农牧大学军事兽医...
金宁一
中国人民解放军农牧大学军事兽医...
夏咸柱
中国人民解放军农牧大学军事兽医...
李红卫
中国人民解放军农牧大学军事兽医...
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农业科学
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猪瘟病
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瘟病毒
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瘟热
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作者
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涂长春
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钱爱东
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侯世宽
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扈荣良
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何洪彬
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金扩世
传媒
3篇
病毒学报
1篇
生物技术通讯
1篇
畜牧兽医学报
1篇
中国预防兽医...
年份
2篇
1999
2篇
1998
1篇
1996
1篇
1994
共
6
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犬瘟热病毒反转录-聚合酶链反应诊断方法的建立和初步应用
被引量:56
1999年
根据Baret报道的犬瘟热病毒Onderstepoort弱毒株的融合蛋白基因序列,设计合成了一对能扩增324bp基因片段的引物。将异硫氰酸胍-酚-仿一步法提取得到的细胞总RNA进行反转录,以此产物为模板进行PCR扩增,并对PCR扩增条件进行了优化。经鉴定,以此对引物进行的PCR扩增,得到了与设计片段大小和酶切位点相同的产物,且不扩增犬细小病毒、犬腺病毒和狂犬病病毒犬的三种病原的核酸,这表明此方法为特异性的。对27条(只)临床病例和32份细胞培养物进行检查,并与电子显微镜负染检查结果进行了比较。初步应用研究的结果表明,此方法可用于犬瘟热病毒的临床诊断和实验研究。
李金中
何洪彬
夏咸柱
殷震
涂长春
金宁一
李佑民
关键词:
犬瘟热病毒
反转录
聚合酶链式反应
河南牛、鼠源狂犬病毒G基因主要功能区的比较分析
被引量:6
1998年
本研究对从我国河南牛狂犬病疫区分离的狂犬病病毒牛源毒BRV和鼠源毒MRV的糖蛋白(G)基因膜外主要功能区进行反转录—聚合酶链反应(RT-PCR)扩增、克隆、测序和两者的比较分析。分别得到了每个毒株G基因膜外区742bp的cDNA片段(位于G基因405~1146号碱基)和推导的氨基酸序列,它含有可以诱导产生中和抗体的多个抗原决定簇和决定毒力及与神经细胞受体结合位点。计算机的比较分析表明两者在这一基因片段的同源性很低,核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为81.1%和85.4%,主要抗原决定簇AgⅡ的202位和AgⅢ的332位氨基酸两者不同,并且MRV在202位形成糖基化位点。研究结果证明BRV和MRV是亲缘关系较远的毒株,甚至有型或亚型的差别,两者的核苷酸和氨基酸序列均有较大差异,BRV不可能是MRV在短时间内演化而来的毒株。
钱爱东
侯世宽
刘清河
张茂林
李红卫
涂长春
殷震
关键词:
狂犬病毒
糖蛋白基因
猪瘟病毒石门株与兔化弱毒株gp55基因的克隆与序列分析
被引量:15
1998年
猪瘟病毒石门系强毒株及兔化弱毒疫苗株(HCLV株)是我国的标准毒株,囊膜糖蛋白gp55(又称E1)是该病毒最重要的保护性抗原。本实验采用反转录PCR扩增了这两个毒株的gp55基因。序列分析结果表明:1.石门株和兔化弱毒株糖蛋白E1的氨基酸序列含有15个半胱氨酸残基(Cys),其数量及位置与国外4株猪瘟病毒(Alfort、Brescia、ALD和GPE-)完全一样。E1中Cys的数量及位置的保守性说明,该病毒这一保护性抗原在各毒株之间具有相同的骨架结构。2.E1糖蛋白N端的信号肽序列及C端的跨膜区序列是比较保守的,然而位于N端的抗原区序列是非保守的,其中氨基酸变异较大的区域大约在702~742氨基酸残基之间。3.所测得的HCLV株E1的氨基酸序列,与国外测得的HCLV株E1的氨基酸序列有明显差异,这一差异均一地分布于整个E1序列。因此,推测国内外同出一宗的HCLV疫苗株,在长期的使用传代过程中发生了一定程度的遗传变异。
李红卫
涂长春
金扩世
王新平
殷震
关键词:
猪瘟病毒
克隆
狂犬病毒糖蛋白cDNA在BHK细胞中的整合及表达
被引量:2
1994年
狂犬病毒是引起动物及人狂犬病的病原。病毒颗粒由脂质囊膜、核糖核蛋白核心和纤状突起(糖蛋白又叫G蛋白)组成。G蛋白为病毒粒子的重要成分之一,具有血凝活性,并提供毒粒吸附宿主细胞受体的位点,其成熟形式含有505个氨基酸。依毒株不同,该蛋白上有2或3个潜在糖基化位点。
扈荣良
涂长春
章金钢
侯世宽
殷霞
关键词:
狂犬病毒糖蛋白
BHK细胞
病毒特异性
病毒粒子
核糖核蛋白
细胞克隆
猪瘟病毒保护性囊膜糖蛋白E1基因的研究进展
被引量:17
1996年
猪瘟病毒保护性囊膜糖蛋白E1基因的研究进展金扩世,涂长春,殷震(中国人民解放军农牧大学研究所,长春130062)猪瘟(HogCholeraorSwineFever,HC/SF)是由猪瘟病毒(HCV)引起的猪的一种严重的传染病,也是一种古老的世界范围内...
金扩世
涂长春
殷震
关键词:
猪瘟病毒
囊膜糖蛋白
E1基因
犬瘟热疫苗弱毒融合蛋白穿膜区基因的序列分析
被引量:2
1999年
本研究根据Barret.T报道的犬瘟热病毒(CDV)Onderstepoort株融合蛋白(F)的基因序列,设计合成了一对可扩增出穿膜区基因的引物(P8和P10),此对引物扩增的cDNA长度应为620bp。以我国现用的某犬瘟热疫苗弱毒感染Vero细胞的总RNA进行反转录,此反转录产物作为PCR的模板,经扩增后得到了约为620bp的PCR产物。将此PCR产物和pGEM-T载体质粒连接、转化、鉴定后,得到了含有P1和P2间片段的质粒。将此质粒进行序列分析,结果在两引物间的核酸长度为574bp。其相对于CDVOnderstepoort株、海豹瘟热病毒2型(PDV2)和海豹瘟热病毒1型(PDV-1),在核苷酸水平分别有15、42和171个的变异,同源性分别为97.4%、92.7%和70.2%。在氨基酸水平分别有7、9和43个的变异,同源性分别为96.3%、95.2%和77.5%,由此氨基酸序列推测的氨基酸疏水性分布图,与其它毒株大致相同,但由此而预测的该毒株的二级结构与其它毒株则有显著的不同,毒株的这种变异进而可能影响到其蛋白质的结构与功能。本研究首次报道了国内现用CDV疫苗弱毒融合蛋白穿膜区的基因序列,为进一步研究?
李金中
夏咸柱
殷震
涂长春
金宁一
关键词:
犬瘟热病毒
疫苗
融合蛋白
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