张建华
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
- 供职机构：贵州省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 白背飞虱海藻糖酶Treh-2基因克隆及生物信息学分析被引量：4
- 2013年
- 利用同源克隆及RACE方法,从白背飞虱Sogatella furcifera中克隆获得海藻糖酶基因(Treh-2)全长cDNA序列(GenBank登录号:JX204291),该基因全长为2 065 bp,包含73 bp 3,UTR和150 bp5,UTR,开放阅读框(ORF)为1 842 bp,编码613个氨基酸。该基因预测蛋白分子质量为70.45 ku,等电点为5.65,有5个预测糖基化位点,有1个信号肽结构。进化分析结果显示,白背飞虱海藻糖酶Treh-2与其他昆虫海藻糖酶Treh-2同源性较高,与灰飞虱相比,同源性为95%,与褐飞虱相比较,同源性为93%。海藻糖酶Treh-2基因克隆和比较分析为进一步深入研究白背飞虱迁飞能力与能量代谢具有重要意义。
- 陈静张建华郭玉双张道伟
- 关键词：白背飞虱克隆
- miR-223通过靶定EPB41L3促进胃癌生长和侵袭的研究被引量：7
- 2014年
- 目的探讨miR-223对胃癌细胞生长和侵袭的影响,并研究miR-223的靶基因及其功能。方法利用实时定量PCR检测原发性胃癌和转移性胃癌间miR-223的表达水平。利用脂质体LipofectamineTM2000在胃癌细胞中瞬时转染miR-223的ASO以及对照寡核苷酸,运用平板克隆形成和transwell侵袭实验检测细胞生长和侵袭。生物信息学方法预测miR-223的靶基因,分别利用GFP报告载体实验和Western blot检测转染miR-223 ASO和对照细胞中靶基因3'UTR的荧光强度以及靶基因的蛋白水平。在细胞中转染靶基因的siRNA和对照,利用Western blot检测靶基因的蛋白表达情况,并检测细胞的克隆形成和侵袭能力。结果实时定量PCR结果显示miR-223在转移性胃癌中高表达(P<0.05)。与对照组细胞相比,转染miR-223 ASO的细胞克隆数目减少(P<0.05),发生侵袭的细胞减少(P<0.05)。生物信息学显示EPB41L3 3’UTR含有miR-223的结合位点。与对照组相比,miR-223 ASO降低EPB41L3 3'UTR的荧光强度(P<0.05),而对突变的3'UTR没有明显影响。miR-223 ASO组细胞中EPB41L3的蛋白水平较对照组升高(P<0.05)。转染EPB41L3 siRNA的细胞中EPB41L3的蛋白水平较对照组降低,而克隆形成和侵袭能力较对照组明显升高(P<0.05)。结论 miR-223通过抑制miR-223的表达而调控胃癌细胞的生长和侵袭,暗示miR-223可能与胃癌的生长和转移相关。miR-223具有作为胃癌分子治疗和预后靶标的潜能。
- 郭玉庆张建华郭玉双
- 关键词：微小RNA胃癌
