赵静
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：同济大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 用于遗传操作的日本血吸虫童虫体外培养方法的研究被引量：1
- 2012年
- 目的建立日本血吸虫机械断尾尾蚴制备的童虫的体外培养,并用于相关的遗传操作。方法采用常规1 640培养基和添加激素等成分,建立日本血吸虫机械童虫的体外培养,并采用电穿孔技术将外源的小RNA分子导入到日本血吸虫机械童虫。结果成功体外连续培养了14d的日本血吸虫机械童虫,并建立了电穿孔技术将小RNA分子导入到日本血吸虫机械童虫的方法。结论建立的日本血吸虫机械童虫体外培养方法和转染小RNA分子的技术为血吸虫基因功能研究奠定了基础。
- 汪章勋赵静邹膺潘卫庆
- 关键词：日本血吸虫体外培养电穿孔
- 日本血吸虫机械脱尾童虫体外转染siRNA的效率研究被引量：1
- 2015年
- 目的比较体表渗透法、电穿孔法、脂质体转染试剂LipofectamineTM2 000以及纳米材料聚乙烯亚胺(PEI)4种不同的方法用于日本血吸虫机械脱尾童虫体外转染siRNA的转染效率,以期筛选理想的转染方法。方法选用携带有红色荧光标记的化学合成siRNA,并且据根不同转染方法说明步骤优化体外转染条件,分别转染日本血吸虫机械脱尾童虫。在一定的时间内利用荧光显微镜观察虫体转染情况并计阳性虫数,并应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测转入靶基因的mRNA表达情况。结果经过体外转染条件的优化,电穿孔和纳米材料介导的siRNA转染效率达到了90%以上。应用RT-PCR验证,4种方法中,电穿孔转染法和纳米材料转染的siRNA对靶基因有显著的抑制效应(P<0.05),电穿孔法转染抑制率达(45±9.63)%,纳米材料转染抑制率达(37±6.17)%。结论除了常规的电穿孔法,纳米材料作为新型的转染载体,能够有效地传递siRNA进入血吸虫童虫体内,干扰目的基因的表达,这将为日本血吸虫功能基因学的研究提供高效的转染工具。
- 赵静林超潘卫庆
- 关键词：日本血吸虫SIRNA转染效率
