刘博
- 作品数：1 被引量：10H指数：1
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学环境科学与工程更多>>
- 双抗体夹心ELISA检测排泄物PEDV被引量：10
- 2015年
- 用蔗糖密度梯度离心法纯化猪流行性腹泻病毒(PEDV)免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术获得2株分泌抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)单克隆抗体,建立检测PEDV的双抗体夹心ELISA方法。结果表明,该双抗体夹心ELISA最佳反应条件为,兔抗PEDV抗体稀释度为1:800包被37℃1 h加4℃12 h,样品反应时间为90 min,酶标抗体工作浓度为1:2 000作用45 min,以OD490nm≥0.37作为阳性判定标准。该ELISA的重复性变异系数小于10%,最低检测限为5×103.67TCID50/m L,并与猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒无交叉反应。用该ELISA方法和RT-PCR方法检测48份临床粪便样品,结果显示,ELISA阳性检出率为39.6%,而RT-PCR方法检测卡的阳性检出率为43.8%。表明双抗体夹心ELISA方法具有特异性强、灵敏性高和重复性好等优点,可用于PEDV快速检测。
- 李一经刘博姜艳平崔文唐丽杰乔薪瑗刘敏
- 关键词：猪流行性腹泻病毒单克隆抗体双抗体夹心ELISA
