李艳莉
- 作品数:3 被引量:10H指数:2
- 供职机构:扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金:引进国际先进农业科技计划江苏高校优势学科建设工程资助项目长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 猪瘟疫苗中牛病毒性腹泻病毒2型的检测被引量:7
- 2012年
- 为对上海某猪场送检的一份猪瘟疫苗进行牛病毒性腹泻病毒(BVDV)检测,本研究将猪瘟疫苗样品接种于MDBK细胞,盲传15代后仍无致细胞病变效应,但间接免疫荧光试验表明接种该疫苗后的MDBK细胞能够被单克隆抗体BZ-53(BVDV-2)识别。采用BVDV-1和BVDV-2的5'-UTR的通用检测引物和针对BVDV E2的引物,对样品RNA进行RT-PCR检测,结果显示,样品能够扩增出约288 bp的BVDV特异性片段;此外,5'-UTR和E2基因片段的测序分析结果表明分离株属于BVDV-2,并且其E2基因与牛源XJ-04株(BVDV-2)的E2基因同源性最高(92.3%),而与猪源ZM-95株(BVDV-1)的E2基因同源性较低(64.5%)。由此证明,该猪瘟疫苗中的确污染有一株BVDV-2株。
- 陶洁王银王娟周虹李艳莉朱国强
- 关键词:猪瘟疫苗RT-PCR
- 鹅细小病毒单克隆抗体的制备及抗原表位区分析被引量:3
- 2012年
- 采用杂交瘤细胞融合技术,获得3株能稳定分泌抗GPV特异性抗体的杂交瘤细胞株,免疫印迹结果表明:这3株单抗均能与纯化的GPV病毒子及重组VP3蛋白发生特异性反应,而与鸭肝炎病毒、鸭细小病毒、鹅源新城疫病毒无交叉反应。采用真核表达载体pCAGGS对VP3基因进行分段克隆并转染COS-1细胞表达,用单抗介导的间接免疫荧光(IFA)进行检测,结果表明:3E8株单抗与VP3蛋白135~332氨基酸(aa)和322~535aa肽段均能发生特异反应,因此可以推定3E8株单抗识别的抗原表位在VP3的322~332aa上。
- 王娟李艳莉厚华艳王建业陶洁朱国强
- 关键词:鹅细小病毒VP3蛋白单克隆抗体
- 牛疱疹病毒I型gB基因的原核表达
- 2013年
- 根据GenBank中BHV-1 Colorado 1毒株的全基因组序列,针对gB基因的主要B细胞免疫区域设计一对引物。提取BHV-1 Colorado 1毒株的基因组DNA,PCR扩增大小为585 bp的gB片段,将其克隆至pET-22b(+)原核表达载体并测序分析,同时用Nde I和Not I酶切鉴定。SDS-PAGE和Western blot试验结果证明,获得的可溶性gB重组蛋白能与牛传染性鼻气管炎病毒标准阳性WEI血清发生特异性反应,为ELISA等免疫诊断方法的建立奠定了物质基础。
- 李艳莉陶洁张信军王银朱国强
- 关键词:牛疱疹病毒GB基因包涵体蛋白免疫印迹