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肿瘤标志物在乳腺癌术后复发转移监测中的应用价值被引量：6: 2012年; 目的:探讨肿瘤标志物在乳腺癌术后复发转移监测中的应用价值。方法:用多肿瘤标志物系统对121例乳腺癌术后患者(其中包括49例术后复发转移患者及72例术后无复发转移患者)血清样本的12项肿瘤标志物(CA19-9、NSE、CEA、CA242、Ferritin、β-HCG、AFP、F-PSA、PSA、CA125、HGH、CA15-3)的表达水平进行测定,Logistic回归分析与ROC曲线法评价肿瘤标志物在复发转移中的应用价值。结果:乳腺癌术后复发转移组与无复发转移组的蛋白芯片阳性率差异显著(P<0.05)。与无复发组测定结果比较,CA19-9、CEA、Ferritin、CA125、CA15-3的表达水平及阳性率差异具有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析筛选CEA、CA125、CA15-3为监测乳腺癌术后复发转移的有效指标,ROC曲线法三者曲线下面积为0.813、0.808、0.772。CEA、CA125、CA15-3联合监测乳腺癌术后复发转移的敏感性与芯片相同(81.6%),特异性与准确性高于芯片(95.8%vs 92.7%,90.1%vs 87.6%)。结论:CEA、CA125、CA153联合检测可能作为临床监测乳腺癌术后复发转移优化方案。; 郑智坤张红梅斯晓明刘文超; 关键词：肿瘤标志物乳腺肿瘤蛋白质阵列分析复发肿瘤转移

热休克蛋白90抑制剂的活性初步评价被引量：1: 2015年; 目的:初步评价经计算机模拟筛选的Fs系列化合物对A549细胞的增殖抑制作用与对热休克蛋白90活性的抑制。方法:首先采用SRB(磺基罗丹明B)法观察26个化合物对A549肿瘤细胞增殖抑制活性,再进一步应用Western Blot方法对此类化合物在蛋白水平上对热休克蛋白90活性的抑制进行评价。以热休克蛋白70的表达增加作为热休克蛋白90活性是否被抑制的参考指标。结果:在Fs系列化合物中Fs-1、Fs-8、Fs-24对A549细胞增殖有明显抑制,且能明显上调Hsp70蛋白的表达,但同时Hsp90蛋白的表达量并不受影响。其余化合物在两种方法中显示均无明显抑制作用。结论:在经计算机模拟筛选出的26种Fs系列化合物中Fs-1、Fs-8、Fs-24可抑制A549细胞的增殖,可能是通过对Hsp90活性的抑制而发挥作用,经筛选其余Fs系列化合物抑制A549细胞增殖与抑制Hsp90活性作用均不显著。Fs-1、Fs-8、Fs-24类化合物作用的初步探索将为研制Hsp90靶向抑制剂类药物开辟新途径。; 杨阳郑智坤郭燕王倩蓉刘文超; 关键词：热休克蛋白90 活性评价 SRB WESTERN BLOT 抑制剂

上皮细胞间质转化与miR-200及肿瘤细胞耐药机制的研究进展被引量：1: 2013年; 目的:总结国内外上皮细胞间质转化与miR-200家族及肿瘤细胞耐药中的研究进展。方法:应用PubMed、CNKI及维普数据库以"EMT、miR-200和肿瘤耐药"为关键词,检索2000-2012年相关文献。共检索到英文文献5 789条,中文文献9条。纳入标准:1)上皮细胞间质转化的特性与功能;2)miR-200家族成员主要功能;3)EMT及miR-200与肿瘤耐药的关系;4)针对EMT及miR-200为靶点进行逆转肿瘤细胞耐药性的研究。根据纳入标准符合分析的文献共54篇。结果:EMT同诱导肿瘤细胞侵袭性改变以及获得性耐药的发生息息相关,miR-200家族在肿瘤细胞中的表达下调同样可以导致肿瘤耐药形成,且EMT与miR-200间可能存在一定联系,以EMT与miR-200为靶点逆转肿瘤细胞耐药性取得一定成效。结论:上皮细胞间质转化与miR-200在诱导肿瘤细胞耐药机制中有着重要作用,从两者入手是解决肿瘤细胞获得性耐药的可能途径。; 郑智坤刘文超; 关键词：肿瘤抗药性上皮细胞间质转化

肺癌中EGFR外显子突变丰度的荧光偏振检测: 2015年; 目的:建立一种基于荧光偏振技术快速、特异的检测体系,并将该体系用于检测肺癌标本中EGFR基因19、21外显子的突变丰度,以便更加全面、准确地预测靶向药物疗效以及指导临床靶向药物选择。方法:应用Primer premier 5.0软件在EGFR基因19、21号外显子突变区域上下游处设计19、21外显子各自的通用PCR引物,并设计覆盖各自突变区域的两对荧光标记探针(突变型和野生型)。以包含野生型(19、21)和突变型(19、21)的质粒分别为4种阳性标准品,空载体为阴性标准品,分别作为模板进行PCR扩增反应,将扩增结果应用荧光偏振仪进行检测,以建立突变丰度测量体系。最后,对51例肺腺癌标本进行检测,并计算出各自的突变丰度。结果:荧光偏振检测EGFR基因19、21外显子突变结果与直接测序法结果无统计学差异,且最低检测浓度为40拷贝/μl,最低检测含量可达10%。本法可提供更全面的瘤内基因变异丰度分析,有利于指导临床用药。结论:荧光偏振检测EGFR基因19、21外显子突变结果不仅灵敏度与特异性高,还能提供全面的瘤内异质性分析指标,可为临床肺癌个体化治疗效果提供预测依据。; 杨阳姜英浩陈亚楠强少盈郑智坤张菊刘文超; 关键词：肺癌表皮生长因子受体

非小细胞肺癌ROS1及其融合基因CD74-ROS1逆转录病毒载体的构建: 2015年; 目的:利用逆转录病毒载体pBaba-puro构建携带ROS1基因及其CD74-ROS1融合基因的重组载体pBaba-puro-ROS1,pBaba-puro-CD74-ROS1。方法:设计与合成引物,提取组织标本RNA,反转录和PCR扩增,经BamHI和TaqI双酶切,琼脂糖凝胶电泳,切胶回收进行连接转化,并再次酶切鉴定,测序分析。结果:成功构建携带ROS1基因及其CD74-ROS1融合基因的重组载体pBaba-puro-ROS1,pBaba-puro-CD74-ROS1,并通过双酶切与测序鉴定。结论:利用逆转录病毒载体基因重组技术能够成功构建出携带相应基因的逆转录病毒,可用于后续研究。; 杨阳郑智坤马骥杜成郭燕刘文超; 关键词：逆转录病毒载体融合基因

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郑智坤