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Klotho基因转染骨髓间充质干细胞移植对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响被引量：6: 2017年; 目的观察Klotho基因(抗衰老基因)修饰的骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响。方法分离、培养、扩增大鼠骨髓间充质干细胞。慢病毒介导Klotho转染至BMSC中,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测BMSC中Klotho mRNA的表达。制备大鼠慢性心力衰竭模型,随机分为正常对照组、模型对照组、增强型绿色荧光蛋白-BMSC组(EGFP-BMSC组)、EGFP-Klotho-BMSC组。细胞移植28天后多普勒超声检测心功能,荧光显微镜观察细胞存活及分布,HE染色观察心肌组织病理变化。Masson染色检测心肌胶原沉积含量和心肌纤维化程度。结果 Klotho转染BMSC后,BMSC中Klotho mRNA表达明显增多(P<0.05)。移植28天后超声心动图结果显示,与EGFP-BMSC组及模型对照组比较,EGFP-Klotho-BMSC组左心室射血分数(LVEF)提高(P<0.05)。EGFP-BMSC组及EGFP-Klotho-BMSC组心肌纤维化程度较模型对照组减轻(P<0.05),EGFP-KlothoBMSC组较EGFP-BMSC组心肌纤维化改善更为明显(P<0.05)。结论 Klotho基因联合BMSC治疗可进一步抑制心肌纤维化,减少心肌间质胶原沉积,改善心功能。; 王欢杨晓华李慧萍朱向情尹娜杨静潘兴华魏玲; 关键词：心肌纤维化

慢性心衰大鼠心肌Klotho、ColⅠ和ColⅢmRNA的表达及其相关性被引量：3: 2018年; 目的探讨慢性心衰大鼠心肌中Klotho基因、Ⅰ型胶原(ColⅠ)m RNA和Ⅲ型胶原(ColⅢ)m RNA的表达及其相关性。方法清洁级SD大鼠20只,体重250~300 g,随机分为心衰模型组和正常对照组,每组10只,心衰模型组连续14 d腹腔注射异丙肾上腺素3 mg/(kg·d)建立心衰大鼠模型,正常对照组不做处理。建模2 w后,全部大鼠称体重后处死,取心脏称重,并计算心脏湿重/体重指数(HW/BW);RT-PCR检测各组大鼠心肌组织中Klotho基因以及ColⅠ和ColⅢm RNA的表达量,分析各指标间的相关性。结果成功建立大鼠心衰模型(LVEF<50%)。RT-PCR检测结果显示,心衰模型组大鼠心肌中Klotho m RNA的表达较正常对照组显著降低(P<0.05),而ColⅠ和ColⅢm RNA的表达量较正常对照组显著增加(P<0.05)。相关分析显示,大鼠心肌组织中Klotho m RNA表达量与心肌组织ColⅠ m RNA和ColⅢm RNA的表达量呈独立、显著的负相关(P<0.05)。结论心衰大鼠心肌中Klotho基因与ColⅠ及ColⅢm RNA的表达呈显著负相关,可能是Klotho基因抑制心肌纤维化的机制。; 王欢刘茜李红杨晓华尹娜杨静李媛潘兴华魏玲; 关键词：KLOTHO基因心肌胶原MRNA

BMSC移植治疗对慢性心衰大鼠心肌结构与功能的影响: 2018年; 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSC)治疗对慢性心力衰竭大鼠心肌结构与功能的作用。方法 30只SD大鼠随机分为移植组、模型组和正常对照组,每组10只。移植组和模型组腹腔注射异丙肾上腺素(ISO)建立大鼠心力衰竭模型。采用全骨髓培养法制备BMSC并转EGFP基因标记,按每只5×106个/ml的量将EGFP标记的BMSC通过尾静脉注射入移植组大鼠体内,模型组同步注射等体积生理盐水,正常对照组不做处理。BMSC移植4 w后,取心肌组织观察心肌组织中植入BMSC的存活及分布情况,HE染色、Masson染色显示心肌纤维化等病理结构变化,TUNEL检测心肌细胞凋亡率,RT-PCR检测各组心肌组织胶原I和胶原Ⅲm RNA的表达水平。结果各组心肌胶原I和胶原Ⅲm RNA均有表达,但移植组的表达水平低于模型组(P<0.05),与正常组比较无显著差异(P>0.05)。相关分析显示,心肌胶原容积分数与BMSC存活率呈负相关。MASSON和Tunel染色结果显示,移植组和模型组大鼠的心肌胶原容积分数、心肌细胞凋亡率均高于正常组(P<0.01),但移植组比模型组低(P<0.01)。结论 BMSC可抑制慢性心衰大鼠的心肌纤维化、心肌细胞凋亡及胶原纤维增生,减轻心肌损伤,改善心肌结构。; 王欢朱向情刘茜熊云兰朱姿英卢国良潘兴华魏玲; 关键词：心肌胶原间充质干细胞心肌纤维化

Klotho基因转染BMSC移植对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡的影响: 2018年; 目的观察Klotho基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法分离、培养、扩增大鼠BMSC,采用慢病毒载体法将EGFP标志基因和Klotho基因导入BMSC中,RT-PCR检测BMSC中Klotho m RNA的表达。采用异丙肾上腺素注射法制备大鼠慢性心衰模型后,随机分为Klotho-BMSC、BMSC、模型组,另设正常组,共4组,每组6只,将EGFP基因标记并导入Klotho基因的BMSC(EGFP-Klotho-BMSC)和仅标记EGFP基因的BMSC(EGFP-BMSC)分别通过大鼠尾静脉移植入Klotho-BMSC组或BMSC组大鼠体内,5×106细胞/只,模型组和正常组不做处理。移植28 d后,观察植入体内的BMSC细胞的存活及分布,TUNEL检测心肌细胞凋亡率。结果 BMSC转染Klotho后Klotho m RNA表达明显增多(P<0.05);移植28 d后,Klotho-BMSC组左心室射血分数(LVEF)比BMSC组高(P<0.05),而心肌细胞凋亡率较BMSC组进一步降低。结论 Klotho基因导入BMSC后,可增强BMSC抑制心肌细胞凋亡的作用,更有效改善心功能。; 王欢朱向情李慧萍尹娜甘世保杨静李丽娟潘兴华魏玲; 关键词：KLOTHO基因心衰心肌细胞凋亡

Klotho基因及其联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗改善心脏重构的研究: 魏玲潘兴华贾政朱向情王欢李慧萍胡静田倪妮刘茜朱姿英卢国良; 该项目紧紧围绕慢性心衰及房颤等重大心血管疾病的共同病理生理机制心脏重构进行了长期系统的研究：在临床研究发现心脏重构与高血压、冠心病、慢性心衰及房颤的密切关性等基础上，应用干细胞移植、基因工程、细胞转染、RT-PCR等先进...; 关键词：; 关键词：心脏重构骨髓间充质干细胞移植治疗基因治疗

心肌热休克蛋白70在慢性心力衰竭患者中的表达被引量：4: 2015年; 目的:观察慢性心力衰竭患者心肌热休克蛋白(HSP70)的表达。方法:60例手术患者分为3组,其中心功能1级组20例,心功能2级组20例,心功能3级组20例。采用实时荧光定量(RT-PCR)方法检测HSP70的mRNA表达量。结果:1与心功能1级患者比较,HSP70 mRNA水平在心功能2级、心功能3级组的心肌组织中表达明显减少(均P<0.05),且在心功能3级组较心功能2级组明显减少(P<0.05)。2 HSP70 mRNA水平与慢性心力衰竭患者年龄、病程呈负相关。结论:慢性心力衰竭患者心肌HSP70的表达减少,可能与HSP70随着心功能恶化其保护作用减弱有关。; 田倪妮魏玲李宏键陈黔陈韦强王欢倪茂娥; 关键词：热休克蛋白70 心力衰竭慢性年龄病程

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王欢

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