赵磊
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- EB病毒相关噬血细胞性淋巴组织细胞增生症患者细胞因子水平分析
- 2024年
- 目的探讨EB病毒相关噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(EBV-HLH)患者细胞因子水平的变化。方法回顾性病例对照研究。回顾性分析2022年2月至2023年2月华中科技大学同济医学院附属同济医院收治的65例EBV-HLH、30例传染性单核细胞增多症(IM)、40例其他感染相关的HLH患者临床资料。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清标本中白细胞介素(IL)-6、IL-2、IL-10、IL-8、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)水平,分别比较EBV-HLH组与IM组、其他感染相关的HLH组的细胞因子水平。结果EBV-HLH组IL-6、IL-2、IL-10、IL-8、IL-1β、TNF-α、IFN-γ等细胞因子水平均高于其他感染相关的HLH组,差异均有统计学意义(均P<0.05);EBV-HLH组IL-2、IL-10、IFN-γ细胞因子水平均高于IM组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论EBV-HLH患者IL-6、IL-2、IL-10、IL-8、IL-1β、TNF-α、IFN-γ细胞因子水平均升高,可能在EBV-HLH发生、发展过程中发挥作用。
- 黄纯尹琎李登举赵磊
- 关键词：淋巴组织增殖性疾病EB病毒白细胞介素类干扰素Γ
- 斑马鱼Gfi1.1基因的克隆及其体外转录
- 2014年
- 目的:克隆斑马鱼Gfi1.1基因的全长cDNA,运用T7 RNA聚合酶对含有Gfi1.1基因的ORF区进行体外转录,在体外合成5端带有帽子结构的Gfi1.1 mRNA分子,为后续研究斑马鱼Gfi1.1基因的功能打下基础。方法:应用RT-PCR从斑马鱼组织中扩增出Gfi1.1 cDNA片段,经回收纯化与pGM-T载体连接并转化感受态细菌DH-5α,通过蓝白筛选酶切鉴定阳性菌落,小量提取质粒,Nde I限制性内切酶线性化pGM-T-Gfi1.1质粒,运用T7 RNA聚合酶对Gfi1.1基因进行体外转录及加帽。经凝胶电泳对目的片段进行鉴定。结果:RT-PCR扩增获得约1.2 kb的DNA片段,DNA序列分析的结果与GenBank上的序列(NM_001020776)一致,酶切线性化及体外转录加帽pGM-T-Gfi1.1,凝胶电泳鉴定RNA分子大小与预期完全一致。结论:成功克隆斑马鱼Gfi1.1基因并体外转录及加帽pGM-T-Gfi1.1。
- 朱贤敏姜利军赵磊关军尹琎张义成
- 关键词：克隆体外转录
- 斑马鱼jak2a载体构建及其对红系造血功能影响的初步研究被引量：1
- 2013年
- 目的构建jak2a野生型(wilde type,wt)载体并完成其在斑马鱼体内的过表达,运用邻联茴香胺染色观察其对红系造血的影响,为后续探讨斑马鱼骨髓增殖性疾病(myeloproliferative disorders,MPD)模型的Jak/Stat信号通路奠定基础。方法根据jak2a基因GenBank NM_131093序列V581F突变位点上下游序列设计引物,以pGM-T-jak2a V581F质粒载体为模板进行PCR后,用DpnⅠ酶对产物进行消化去除模板,转化感受态细菌DH5α,通过蓝白筛选酶切鉴定阳性菌落,小量提取质粒,NdeⅠ限制性内切酶线性化pGM-T-jak2a-wt质粒,运用T7Transcript Aid酶对jak2a基因进行体外转录及加帽。经凝胶电泳对目的片段进行鉴定。以200ng/μL浓度jak2a-wt mRNA加帽产物显微注射斑马鱼单胞期受精卵,运用邻联茴香胺染色检测其对红系增殖的影响。结果完成pGM-T-jak2aV581F的定点突变,成功构建pGM-T-jak2a-wt载体,DNA序列分析的结果与GenBank上的序列(NM_131093)一致,酶切线性化及体外转录加帽pGM-T-jak2a-wt,凝胶电泳鉴定RNA分子大小与预期完全一致。对过表达jak2a的鱼卵进行邻联茴香胺染色,发现斑马鱼卵黄囊及ICM区红细胞明显增多。结论成功完成斑马鱼pGM-T-jak2aV581F基因定点突变并体外转录及加帽pGM-T-jak2a-wt,体内过表达jak2a对红系发生有显著影响。
- 朱贤敏姜利军赵磊关军肖湘慧张义成
- 关键词：定点突变体外转录
