张希
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：“十二五”国家科技计划农村领域黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 猪瘟病毒和猪流行性腹泻病毒双重RT-PCR方法的建立被引量：3
- 2015年
- 本研究根据GenBank中发表的猪瘟病毒(CSFV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的基因组序列,设计筛选出两对用于双重RT-PCR反应的特异性引物,通过对特异性、灵敏性和稳定性等试验,建立了检测猪流行性腹泻病毒和猪瘟病毒的双重RT-PCR核酸检测技术。利用建立的CSFV-PEDV双重RT-PCR核酸检测技术,对某规模化猪场病料进行检测,结果表明,扩增出大小约311 bp和501 bp大小的特异性条带,为猪瘟与猪流行性腹泻病毒混合感染。建立的CSFVPEDV双重RT-PCR核酸检测技术具有良好的特异性、灵敏性和稳定性,该方法的建立为CSFV和PEDV的快速诊断、疫情监测及流行病学研究奠定了基础。
- 谭飞马士博王瑞翀张希姜艳平崔文孟柳尹纪元乔薪瑗
- 关键词：双重RT-PCR猪瘟猪流行性腹泻
- 植物乳杆菌噬菌体Lpla的分离鉴定及抗噬菌体菌株的筛选被引量：4
- 2019年
- 从泡菜中分离得到1?株以植物乳杆菌WCFS1为宿主菌的烈性噬菌体,命名为Lpla。一步生长曲线结果表明Lpla的潜伏期为15 min,裂解期为180 min,裂解量为43 PFU/cell。根据透射电镜观察的形态将其归为长尾病毒科,B1类。噬菌体的理化性质结果表明,Lpla对酸、碱的耐受性较强,对乙醇、温度和紫外射线的耐受性较低。吸附实验结果显示,Lpla在4℃时吸附率最大。Ca2+、Mg2+均可促进Lpla对宿主菌的吸附,热灭活宿主菌可使Lpla的吸附率下降20%。本研究筛选出6株对噬菌体Lpla具有稳定抗性的植物乳杆菌,为制定出有效的噬菌体防治策略提供理论依据,并为进一步将抗性菌株应用于生产实践奠定基础。
- 齐蕊名于美玲姜艳平崔文张希王丽徐义刚唐丽杰李一经乔薪瑗
- 关键词：植物乳杆菌生物学特性抗噬菌体菌株
- 发酵罐培养重组乳酸乳球菌表达犬γ-干扰素条件研究
- 2015年
- 为探讨发酵罐培养重组乳酸乳球菌表达犬γ-干扰素最佳条件,研究测定重组乳酸乳球菌p AMJ399-Ca IFN-γ/PSM565静置培养时生长曲线及p H,与添加不同浓度β甘油磷酸二钠的生长曲线及p H进行比较。结果表明,β-甘油磷酸二钠作为缓冲溶液,能使培养细菌p H保持稳定,促进重组菌生长。对重组乳酸乳球菌p AMJ399-Ca IFN-γ/PSM565在发酵罐中的培养条件优化,并对不同p H条件下培养重组乳酸乳球菌OD600及重组p AMJ399-Ca IFN-γ/PSM565表达的蛋白量进行Western-blot检测。发酵结果显示,32℃培养,搅拌子转速为52r·min-1,6 h后以0.25 m L·min-1速率补充50%葡萄糖,明显提高菌群数量,p H在5.5和5.75时检测重组菌OD600值达到6.87和7.0。p H为5.5和5.75时培养诱导重组乳酸乳球菌p AMJ399-Ca IFN-γ/PSM565的蛋白表达量均比p H 6和p H 6.25时高,但与静止培养诱导结果相比,重组菌表达量增长不明显。研究可为工业化生产重组犬γ-干扰素提供技术支持。
- 姜艳平吴煜张希姜新鹏唐丽杰乔薪瑗崔文李一经
- 关键词：发酵罐乳酸乳球菌
- 重组犬γ干扰素的分泌表达及抗病毒活性鉴定被引量：2
- 2015年
- 为了研究犬γ干扰素在抗病毒方面的应用价值,依据乳酸菌密码子的偏好性和原核表达载体p AMJ399的特点,在不改变编码蛋白的基础上,将原有的犬γ干扰素序列重新优化,构建重组乳酸乳球菌p AMJ399-Ca IFNγ/PSM565,获得了分泌表达的犬γ干扰素蛋白,将培养p AMJ399-Ca IFNγ/PSM565的培养上清液进行5倍浓缩后与MDCK细胞进行作用24 h后,接种VSV病毒,通过观察病变、MTT法检测活细胞数及荧光定量PCR检测方法,均证实该蛋白能够抑制VSV的复制,具有明显的抗病毒活性。为进一步研究犬γ干扰素在临床上的抗病毒应用和作为细胞因子佐剂的研究奠定了基础。
- 姜艳平吴煜张希姜新鹏唐丽杰乔薪瑗崔文李一经
- 关键词：分泌表达活性检测
