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TcLr19PR1、TcLr19PR2和TaLr19TLP1的酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定被引量：1: 2016年; 在前期研究的基础上,将成功克隆得到3个病程相关蛋白PR1、PR2和PR5的序列,分别命名为TcLr19PR1、TcLr19PR2和TaLr19TLP1。将这3个基因分别连接到酵母双杂交诱饵载体pGBKT-7上,并转化到感受态菌株Y2HGold中,检测其毒性和自激活性。结果显示,成功构建了包含目的基因的诱饵重组载体pGBKT-7-TcLr19PR1、pGBKT-7-TcLr19PR2和pGBKT-7-TaLr19TLP1;将转化产物涂布于SD/-Trp/X平板上,生长良好,并出现阳性克隆;毒性检测中,将3个诱饵重组载体与空载体在SD/-Trp液体培养基中的生长情况进行对比,发现诱饵无毒性;自激活检测试验中,重组载体无法在二缺、三缺和四缺培养基中正常生长,证明诱饵无自激活性。因此,本研究成功构建的3个诱饵重组载体可用于3个PR蛋白互作蛋白的筛选,为进一步研究其在小麦与叶锈菌互作中的分子机理奠定基础。; 王菲张艳俊梁芳张家瑞王海燕刘大群; 关键词：病程相关蛋白酵母双杂交诱饵载体毒性检测

过表达TaTLP1转基因小麦的创制与功能鉴定: 类甜蛋白(Thaumatin-like protein，TLP)是一类具有抗真菌功能的病程相关蛋白(pathogenesis-related proteins，PRPs)，在植物病理学研究中受到越来越广泛的关注。研究转T...; 梁芳; 关键词：小麦转基因育种基因表达

小麦病程相关蛋白TaLr19TLP1的Gateway克隆载体的构建: 病程相关蛋白PR5,属类甜蛋白家族(Thaumatin-1ike proteins,TLPs),前期笔者对该基因结构域进行预测,综合结果分析该基因有95.1%的可能性为胞外蛋白,含有信号肽。现笔者将利用Gateway技术...; 王菲梁芳张艳俊张家瑞王海燕刘大群; 关键词：小麦; 文献传递

小麦病程相关蛋白1基因的亚细胞定位及信号肽鉴定被引量：4: 2017年; 前期研究克隆获得了一个叶锈菌诱导的小麦病程相关蛋白1基因TaLr35PR1,明确了其基因结构和表达特征。本研究首先预测TaLr35PR1的信号肽和亚细胞定位情况,进而通过试验予以佐证。将信号肽编码的核酸序列克隆、连接到酵母信号肽诱捕载体pSUC2T7M13ORI上,并转化到酵母蔗糖酶缺陷菌株YTK12中,明确了TaLr35PR1基因的信号肽具有分泌功能。同时,利用酶切连接的方法成功构建亚细胞定位重组体pCamA-TaLr35PR1-GFP,利用基因枪轰击技术瞬时转化洋葱表皮细胞。结果表明,pCamA-TaLr35PR1-GFP融合蛋白主要在细胞外表达,与亚细胞定位预测的结果一致。这些研究结果丰富了小麦病程相关蛋白1基因的研究内容,为进一步探索该类基因的生物学功能及其作用机制提供了研究基础。; 张家瑞孙僖梁芳王菲张艳俊王海燕刘大群; 关键词：信号肽分泌活性亚细胞定位

TcLr19PR1、TcLr19PR2和TaLr19TLP1的酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定: 在前期研究的基础上,已成功克隆得到3个病程相关蛋白PR1、PR2和PR5的序列,分别命名为TcLr19PR1、TcLr19PR2和TaLr19TLP1。将这3个基因分别连接到酵母双杂交诱饵载体pGBKT-7上,并转化到感...; 王菲张艳俊梁芳张家瑞王海燕刘大群; 关键词：病程相关蛋白酵母双杂交诱饵载体毒性检测; 文献传递

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梁芳