曹俊新
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 供职机构：青岛农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项转基因生物新品种培育专项山东省自然科学基金更多>>
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- 抗猪瘟病毒基因转染小鼠成纤维细胞研究
- 曹俊新
- 关键词：小鼠胚胎成纤维细胞脂质体基因转染
- 昆明小鼠胚胎成纤维细胞体外培养条件初步研究被引量：4
- 2011年
- 本研究旨在探索影响小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast,MEF)分离培养的因素,建立有效的胚胎成纤维细胞培养体系,为构建饲养层细胞与体细胞核移植技术的细胞核供体建立平台。本研究用组织细胞培养液DMEM作为基础培养液,观察了不同胎龄、不同血清浓度及不同胰蛋白酶作用时间等因素对MEF分离培养的影响。结果显示,在所进行的4个胎龄8.5、10.5、12.5、14.5d的比较试验中,原代成纤维细胞分离培养的最适胎龄为12.5d,细胞贴壁迅速,12h已完全贴壁,增殖速度快;在所进行的不同时间5、10、15、30min的胰蛋白酶消化中,最佳时间为5～10min;在所进行的5个血清浓度7%、9%、10%、11%、13%的比较试验中,添加11%胎牛血清浓度培养效果最佳,从3～5代增殖倍数稳定在1.35左右,传代时间也相对较长。以上结果表明,采用12.5d胎鼠,胰蛋白酶消化5～10min,在含有11%血清的DMEM培养液中培养MEF细胞时,原代和传代效果最好,传代至第3～5代时细胞生长增殖最旺盛,处于对数分裂期,适宜作为饲养层细胞与体细胞核移植细胞核供体。
- 曹俊新宋学雄孙旺吾唐元凤
- 关键词：小鼠胚胎成纤维细胞
- P450芳香化酶活性调控对小鼠睾丸和附睾发育及精子发生的影响被引量：5
- 2009年
- [目的]探索P450芳香化酶抑制剂——来曲唑调控内源性雌激素合成,对小鼠睾丸和附睾发育及精子发生产生的影响。[方法]将SPF级昆明系雄性小鼠随机分为对照组和试验组,试验组分为0.001、0.002、0.004、0.006、0.008、0.010 mg/kg来曲唑剂量组,连续灌服3 d,在停药后的第9、15和30天检测小鼠睾丸和附睾的发育及精子的发生情况。[结果]①各试验组与对照组比较,体重增长率无显著差异;②0.010 mg/kg来曲唑组与对照组比较,在灌服后的第15天睾丸系数显著减少(P<0.05),其他各试验组与对照组比较无显著差异;③各试验组与对照组比较,附睾系数无显著差异;④在第15和30天,0.006～0.010 mg/kg来曲唑组与对照组比较,精子密度显著减少(P<0.05),其他各组与对照组无显著差异。[结论]该研究使用的来曲唑浓度,对小鼠体重增长率及睾丸和附睾的发育率无显著影响或影响很小,但是超过0.006 mg/kg浓度时抑制精子的发生,说明一定程度抑制P450芳香化酶的活性,降低内源性雌激素合成,能够直接影响精子的发生能力。
- 楚宁宁薛青光孙旺吾曹俊新宋学雄
- 关键词：小鼠睾丸附睾精子发生来曲唑
- 脂质体介导抗猪瘟病毒基因转染小鼠胚胎成纤维细胞的研究被引量：1
- 2011年
- 本研究旨在探索脂质体介导抗猪瘟病毒基因重组质粒PGPUG/GFP/Neo转染小鼠胚胎成纤维细胞的条件,为构建疾病模型动物及抗猪瘟病毒转基因猪提供技术平台。本研究比较了不同的小鼠胚胎成纤维细胞分离培养方法,将培养至3～5代的胚胎儿成纤维细胞,通过脂质体(LiPofectamineTM2000)介导转染抗猪瘟病毒基因重组质粒PGPUG/GFP/Neo。结果显示,在所选用的不同浓度脂质体和重组质粒,以及不同转染时间的组合中,2μL脂质体介导1.5μg重组质粒,转染6h时可获得19%的转染效率,极显著高于其他剂量和时间组合(P<0.01)。这些结果表明,脂质体、重组质粒及转染时间的优化组合,能有效介导抗猪瘟病毒基因重组质粒PGPUG/GFP/Neo转染小鼠胚胎成纤维细胞。
- 孙旺吾曹俊新宋学雄
- 关键词：小鼠胚胎成纤维细胞脂质体转染
- 细胞色素P450芳香化酶活性调控对小鼠卵巢发育的影响
- 2010年
- 本研究旨在探索P450芳香化酶抑制剂(来曲唑)对小鼠卵巢发育的影响。将SPF级昆明系雌性小鼠随机分为对照组和2、4、6、8、10、30、50g/kg来曲唑剂量组,连续灌服3d,在停药后的第9、15和30天观测小鼠卵巢的发育情况。结果表明:①在停药后第9、30天的6和8g/kg组及第15天的4～10g/kg组的卵巢指数显著高于对照组(P<0.05),而停药后第15和30天的50g/kg组显著低于(P<0.05)对照组和2～10g/kg组;②在停药后第9和15天的4～8g/kg组及停药后第30天的6g/kg组的初级卵泡数显著高于(P<0.05)对照组和其它各试验组,而停药后第9天的30和50g/kg组、第15天的50g/kg组及第30天的10～50g/kg组都显著低于(P<0.05)对照组和其它各试验组;③在停药后第9、15和30天的4～8g/kg组的次级卵泡数都显著高于对照组(P<0.05);而停药后第9天的30和50g/kg组、第30天的50g/kg组都显著低于对照组(P<0.05);④在停药后第9天的4～8g/kg组、第15天的6和8g/kg组及第30天的2～8g/kg组的成熟卵泡数都显著高于对照组(P<0.05);而停药后第9天的10～50g/kg组、第15、30天的30和50g/kg组几乎没有成熟卵泡的形成。以上结果表明,用6g/kg来曲唑浓度可一定程度抑制P450芳香化酶的活性,降低内源性雌激素合成,能够促进小鼠卵巢和卵泡的发育。
- 薛青光宋学雄楚宁宁孙旺吾曹俊新曲洪磊
- 关键词：小鼠卵巢来曲唑
