侯小娟
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗CD47单抗联合用药药效探索
- 目的:基于AMMS4-G4(anti-hCD47)、A2C1(anti-hEGFR)、Herceptin(anti-hHER2)和Rituximab(anti-hCD20)四个抗体的特性,建立AMMS4-G4分别联合其他...
- 侯小娟仇玮祎孙志伟
- 文献传递
- 抗OX40治疗性单抗的研制简介
- 治疗性单抗作为肿瘤免疫治疗领域中的一支重要方向,本课题采用高通量噬菌体抗体库固相筛选技术，对多个抗体库进行多轮筛选，得到具有一定结合活性的单链抗体一株，并命名为OX40mab。其与抗原结合亲和力同OX40唯一配体OX40...
- 侯小娟王双仇玮祎孙志伟
- 关键词：药物设计抗肿瘤作用
- 抗α干扰素双特异性抗体的制备与初步评价被引量：1
- 2017年
- 目的:研制对α干扰素(IFN-α)中和活性有突破性提升的双特异性抗体。方法:以靶向IFN-α不同表位的中和单抗Amilimumab和Sifalimumab为基础,采用FIT-Ig(Fabs-in-tandem immunoglobulin)双特异性抗体平台技术,通过分子克隆方法构建针对IFN-α的双特异性抗体FIT2的表达载体,并在Free Style 293-F系统中进行瞬时转染表达;采用protein A柱亲和纯化目标双特异性抗体,SDS-PAGE初步考察目标抗体的相对分子质量、组分及纯度;采用forte BIO系统鉴定其整体结合活性,并分别确认双特异性抗体的2个抗原结合表位的活性;通过ELISA方法评价其特异性,37℃放置实验鉴定其稳定性,Daudi细胞增殖实验定量评价双特异性抗体的中和活性。结果:构建了双特异性抗体FIT2表达载体,在Free Style 293-F系统中实现了瞬转高效表达,表达量为127 mg/L,亲和纯化获得目标双特异性抗体FIT2,纯度可达98.5%;FIT2结构稳定,具有良好的特异性,未发现与其他类型的干扰素及细胞因子存在交叉反应;FIT2对IFN-α1b-His的结合活性显著优于2个亲本抗体,特别是解离过程的改善尤为明显;同时,FIT2有效保留了2个抗原结合表位的活性;细胞增殖实验结果显示,FIT2对IFN-α1b具有优越的中和活性,其中和效能显著高于任一亲本抗体,明显优于2个亲本抗体联用。结论:获得了对IFN-α1b中和活性有突破性提升的双特异性抗体FIT2,特异性良好且结构稳定,有望成为治疗IFN-α相关疾病的良好的成药候选分子。
- 陈鸿斌侯小娟袁旭东于晓妍徐磊王双郁雯科杜鹏孙志伟
- 关键词：双特异性抗体Α干扰素中和活性
- 抗人OX40单克隆抗体的制备和初步鉴定
- 2017年
- 目的:获得全人源抗人OX40特异性抗体候选株,为相关药物开发奠定基础。方法:依托本实验室构建的大容量全合成全人源噬菌体单链抗体库平台,以OX40为抗原进行固相筛选,经过3轮条件渐进严苛的筛选后,阳性克隆得到富集;将其中富集效果最好的一株单链抗体scFv-1改造成全抗体(Ig G1)形式,改造成功的重组质粒按照一定比例转染HEK293-F细胞进行抗体的瞬时表达;基于AKTA系统对全抗体进行纯化,将纯化得到的全抗体重命名为OX40mab-1。通过ELISA、间接免疫荧光、流式细胞术等试验分别验证OX40mab-1与抗原的结合活性、特异性、血清稳定性;通过BIAcore 3000初步测定抗体亲和力。结果:3轮筛选后得到1株富集率达95%的单链抗体,改造成全抗体形式后,与抗原OX40的结合EC50为0.015μmol/L;该抗体与其他无关抗原均不结合,特异性良好;37℃血清放置15 d后,与抗原依具有较好的结合活性,血清稳定性良好;经BIAcore 3000初步测定该抗体亲和力为251 nmol/L。结论:获得1株理化性质良好、特异性较好的抗OX40全人源单克隆抗体OX40mab-1,具有继续开发价值。
- 侯小娟陈鸿斌袁旭东王双仇玮祎孙志伟
- 关键词：OX40单克隆抗体噬菌体抗体特异性
