张锦勰
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：清华大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- TRIP-1抗体的制作及应用
- 2013年
- 旨在制作TGF-β二型受体结合蛋白TRIP-1的抗体,以便推进对该蛋白在TGF-β信号通路以及癌症发生发展中的功能研究。首先克隆出人的TRIP-1基因,构建其原核重组表达载体pET-His-TRIP-1,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导获得TRIP-1蛋白,纯化后将其分别免疫新西兰大耳兔和昆明小鼠(KM),免疫4次后取血清,并对抗血清进行效价和亲和力测定。通过Western blot和免疫荧光试验鉴定抗血清特异性。最后,利用proteinG初步纯化抗血清。结果表明,通过重组表达获得抗原蛋白,纯化后免疫新西兰大耳兔和昆明鼠可得到效价较高的抗TRIP-1的多克隆抗体,在稀释倍数较高的情况下仍可以用于Westernblot和免疫荧光试验,且有非常好的特异性。
- 张宏玲万骏董一辰曹威张新胜张锦勰黄来强
- 关键词：原核表达纯化动物免疫抗血清抗体鉴定
