曹威
- 作品数:4 被引量:0H指数:0
- 供职机构:清华大学深圳研究生院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- Ezrin多克隆抗体制作及应用
- 2013年
- 构建Ezrin原核重组表达载体pET-28a(+)-ezrin,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导获得Ezrin蛋白,将经镍柱亲和层析纯化后的蛋白分别免疫新西兰大耳兔和昆明小鼠(KM),获得抗血清,采用ELISA和Western blotting,免疫荧光测定其效价和特异性。ELISA对抗血清进行效价测定表明抗血清可与抗原发生特异性免疫反应;通过Western blotting对抗血清进行鉴定表明抗血清可以识别几种细胞株内的特异性条带,其相对分子量为82 kD,与预测分子量相符;免疫荧光试验表明抗血清可以识别细胞内的Ezrin蛋白,且定位情况与文献报道相符。最后通过protein G对抗血清进行了纯化。结果表明用该方法制备的Ezrin多克隆抗体有较高的特异性和灵敏度。
- 张宏玲万骏严飞张新胜曹威陶伟黄来强
- 关键词:原核表达纯化EZRIN蛋白动物免疫抗血清抗体鉴定
- 天然化合物Homoharringtonine在制备治疗肿瘤药物中的应用
- 本发明公开了天然化合物Homoharringtonine在制备治疗肿瘤药物中的应用。本发明的Homoharringtonine有以下特点:抑制转录因子STAT3的转录活性,抑制STAT3对其下游基因MCL1和surviv...
- 黄来强曹威刘莹
- 文献传递
- TRIP-1抗体的制作及应用
- 2013年
- 旨在制作TGF-β二型受体结合蛋白TRIP-1的抗体,以便推进对该蛋白在TGF-β信号通路以及癌症发生发展中的功能研究。首先克隆出人的TRIP-1基因,构建其原核重组表达载体pET-His-TRIP-1,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导获得TRIP-1蛋白,纯化后将其分别免疫新西兰大耳兔和昆明小鼠(KM),免疫4次后取血清,并对抗血清进行效价和亲和力测定。通过Western blot和免疫荧光试验鉴定抗血清特异性。最后,利用proteinG初步纯化抗血清。结果表明,通过重组表达获得抗原蛋白,纯化后免疫新西兰大耳兔和昆明鼠可得到效价较高的抗TRIP-1的多克隆抗体,在稀释倍数较高的情况下仍可以用于Westernblot和免疫荧光试验,且有非常好的特异性。
- 张宏玲万骏董一辰曹威张新胜张锦勰黄来强
- 关键词:原核表达纯化动物免疫抗血清抗体鉴定
- 天然化合物Magnolol在制备治疗肿瘤迁移、侵袭药物中的应用
- 本发明公开了Magnolol在制备治疗乳腺癌迁移、侵袭药物的应用。本发明所述的Magnolol有以下特点:抑制转录因子NF-κB的转录活性,抑制NF-κB对其下游基因基质金属蛋白酶MMP-9的转录表达,进而抑制MMP-9...
- 黄来强刘莹曹威王中原吴彦萍张旭东明平红
- 文献传递