庞鑫
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
- 供职机构：南京农业大学园艺学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目江苏省科技支撑计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 两种原核表达载体对CsPPO蛋白表达活性的影响被引量：2
- 2018年
- 为了选择合适载体,获得稳定表达且具有高活性的可溶性茶树多酚氧化酶,本研究以茶树叶片为材料,克隆茶树多酚氧化酶基因(CsPPO),切除含43个氨基酸和70个氨基酸的肽段后分别与pET32a载体、pMAL-c5X载体进行重组构建原核表达载体,分别命名为pET32a-CsPPO_(43)、pET32a-CsPPO_(70)、pMALc5X-CsPPO_(43)、pMALc5X-CsPPO_(70),利用E.coil Transetta(DE3)菌株进行表达,经SDS-PAGE电泳检验,pMAL-c5X载体表达的目的蛋白易于提取,大量出现在上清液中;而pET32a载体表达后蛋白则基本存在于沉淀中。利用邻苯二酚、ECG、EC 3种底物在410 nm处检测CsPPO蛋白活性发现,pMALc5X-CsPPO对不同底物反应时酶活性随时间增加均呈现明显"S"型变化,表明茶树PPO氧化儿茶素类的反应并不是匀速过程。pMALc5X-CsPPO_(43)比活力比pMALc5X-CsPPO_(70)的高,其中pMALc5X-CsPPO_(43)与EC反应时酶比活力最高,最大比活力为1.45×10~6 U·mg^(-1)。因此,可利用pMALc5X-CsPPO_(43)合成工业用PPO,为进一步研究其与儿茶素的反应机理,利用体外酶法高效获得茶黄素奠定基础。
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- 关键词：茶树多酚氧化酶原核表达酶活性
- 修剪物与茶多酚对茶树矿质吸收及根系有机酸分泌的影响被引量：9
- 2014年
- 探究茶树修剪物水溶性成分及茶多酚对茶树生长的影响与作用机制。水培茶苗,于15、35、55、75、95 d收集根系分泌物,通过阴、阳离子树脂纯化、减压浓缩后,利用高效液相色谱(HPLC)测定分泌物中有机酸主要组成与含量。同时测定茶苗干物质量、茶多酚及矿质元素含量等指标。研究表明,茶多酚会抑制茶树对Ca、Mg、Fe、Mn、Zn的吸收,抑制生长,同时诱导茶树根系分泌苹果酸、柠檬酸;适量修剪物水溶物能够补充矿质营养,提高茶树K、Ca、Fe、Mn、Zn、Al的吸收,促进生长,但同时也会诱导草酸、苹果酸、柠檬酸和琥珀酸的分泌,降低收集液p H值,而收集液p H值变化与有机酸分泌量变化显著相关,结果提示茶树修剪物水溶性成分可能是导致土壤酸化的机理之一。
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- 关键词：茶树根分泌物
