张大燕
- 作品数：13 被引量：74H指数：6
- 供职机构：成都中医药大学药学院更多>>
- 发文基金：四川省科技支撑计划国家自然科学基金四川省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程农业科学更多>>
- 花叶型与艾叶型乌头叶片基因组DNA甲基化修饰的MSAP分析被引量：5
- 2016年
- 建立乌头叶片DNA甲基化MSAP分析方法,并对不同形状的乌头叶片DNA甲基化修饰位点进行MSAP分析。以花叶型、艾叶型乌头不同部位叶片为实验材料,考察乌头叶片MSAP双酶切反应时间,筛选适宜的选择性扩增引物,并通过计算6%丙烯酰胺凝胶电泳图泳道和条带统计分析叶片甲基化修饰差异。结果 150 ng乌头叶片DNA MSAP双酶切反应体系在37℃条件下,酶切16 h较充分;使用25对筛选出的适宜性引物进行乌头基因组的MSAP选择性扩增,总共获得273个电泳条带,其中无甲基化或单链内甲基化228条,双链内甲基化条带27条,单链外甲基化条带18条,总甲基化率达16.48%;花叶型与艾叶型乌头总甲基化率稍有差异,分别为15.36%,14.34%,并各自获得8条、6条基因组甲基化修饰差异的核苷酸片段,占其总条带数的3.00%,2.26%。通过研究可为乌头植株的分子鉴定、良种选育与栽培,以及乌头的遗传演化等提供新思路。
- 文欢彭成饶朝龙张大燕谢晓芳高继海
- 关键词：乌头叶型
- 乌头萜类生物合成代谢的转录组学分析被引量：9
- 2017年
- 目的:对乌头的6个器官组织,主根、侧根、茎、叶、花、果实进行转录组测序分析,以研究参与其萜类次级代谢生物合成相关基因的表达谱,挖掘其功能基因。方法:采用Illumina Hi Seq 2500平台测序、组装得unigenes,与公共数据库NR,Swiss-Prot,GO,COG,KOG,KEGG比对、注释以获得差异基因,使用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)验证参与萜类次级代谢生物合成的关键基因。结果:本研究共获得156 967 635条Clean Reads(28 254 174 300 bp),经序列合并拼接后获得103 337个unigenes,通过核苷酸和蛋白序列等方面的同源性分析,表明其中37.31%(38 554个unigenes)与其他生物的已知基因具有不同程度的同源性,通过功能分类研究和代谢途径分析(KEGG)获得参与萜类合成158个unigenes(编码5个关键酶)。结论:这些发现的基因将为乌头萜类化合物的生物合成途径及分子机制提供基础数据。
- 张大燕文欢王伟彭成高继海
- 关键词：乌头转录组萜类化合物
- 杜仲树皮产量和活性成分含量与生长指标的相关性分析
- 2017年
- 以广元市旺苍县4个样区136份杜仲树皮为试材,采用HPLC法测定其绿原酸和松脂醇二葡萄糖苷含量,活立木树皮产量测算方法测算树皮产量,研究杜仲树皮产量及活性成分含量与树龄、株高、胸径及皮厚的相关性,为旺苍县杜仲优良品种的选育提供有效参考。结果表明:4个样区的杜仲树皮绿原酸含量0.079%~1.208%,松脂醇二葡萄糖苷含量0.068%~5.251%,树皮平均年产量0.03~2.56 kg。树龄为6~28年杜仲树皮,活性成分含量主要与树龄、胸径呈负相关,产量与树龄、株高、胸径、皮厚呈正相关。因此,可以将树龄和胸径2个指标优先纳入旺苍县优良杜仲的选育工作中。
- 王伟文欢汪颀浩张大燕彭成高继海
- 关键词：活性成分
- 不同类型天麻的品质比较被引量：4
- 2018年
- 通过比较不同类型小天麻中天麻素、对羟基苯甲醇、多糖、蛋白质含量的差异,为筛选培育高品质的天麻及开发天麻产品提供有效参考。采用HPLC法和紫外分光光度法测定天麻素、对羟基苯甲醇、蛋白质、多糖的含量,并简要探讨不同类型天麻成分含量的差异关系。该批次天麻样品中天麻素、对羟基苯甲醇、蛋白质和多糖含量范围分别为:0.010 8%~0.046 3%,0.617 1%~0.824 6%,0.224 1%~0.496 1%和11.233 1%~16.692 1%;不同类型天麻各类成分含量有所差异,其中红乌杂交天麻的天麻素、多糖、蛋白质含量最高,乌红杂交天麻对羟基苯甲醇含量最高。该批次四种类型天麻中,以红乌杂交天麻的品质最好,大力发展红乌杂交天麻有利于进一步推动天麻资源开发利用。
- 王伟文欢张大燕汪颀浩彭成高继海
- 关键词：天麻天麻素蛋白质多糖
- 天麻素对糖氧剥夺再复供皮层神经细胞NF-κB炎症级联信号通路表达的影响
- 目的：天麻是重要的药食两用资源,具有一定的神经保护作用,深度分析其保护机制,尤其是“治风”机制的探索,有利于天麻“防风治风”保健产品的研究开发.
方法:本研究采用糖氧剥夺再复供(OGD/R)损伤原代皮层神经细胞...
- 文欢张大燕王伟高继海饶朝龙
- 关键词：保健产品天麻素神经保护作用转录因子-ΚB
- 两种天麻种子的转录组学分析被引量：7
- 2017年
- 目的:对两种天麻种子进行转录组分析,在转录组水平研究两种天麻种子次级代谢产物含量与相关酶活性的关系,从而对其进行品质评价。方法:采用Illumina Hiseq 2500对乌天麻种子及乌红杂交天麻种子进行转录组测序分析,通过与基因数据库比对、分析、注释来发现差异表达基因。结果:乌天麻种子及乌红杂交天麻种子分别获得了24 892 730、29 712 119条Clean Reads,Trinity组装后得到383 242条Unigenes,通过六大基因数据库比对、分析、注释,最终获得184 706个有注释信息的Unigenes。与乌天麻种子相比,杂交后的天麻种子有178个基因表达量上调,527个基因表达量下调,合计705个差异表达基因。其中共有10个关键基因被KEGG数据库苯丙烷类合成途径注释,表达量下调的差异表达基因有PAL、β-G、POD和aroX,表达量上调的有NADP+。结论:本研究获得了乌天麻种子和乌红杂交天麻种子的苯丙烷类产物合成代谢通路图,并注释了相关基因序列,最终确定乌红杂交天麻种子品质最佳。
- 汪颀浩文欢张大燕王伟彭成高继海
- 关键词：天麻种子转录组差异表达基因
- 乌头非生物胁迫下萜类化合物次级代谢的转录组学研究被引量：4
- 2017年
- 目的:对乌头的花、果实、茎、叶、主根、侧根进行转录组测序分析,以试图鉴别并表征非生物胁迫下参与萜类化合物生物合成基因,重点绘制其萜类生物碱合成路线图。方法:采用Illumina Hi Seq 2500平台测序,组装得unigenes,经公共数据库比对、注释后获得差异基因,通过QRT-PCR检测参与萜类生物碱合成代谢的重要基因在转录水平上对干旱、低温和机械损伤等的应激响应。结果:测序后共获得9 836 247个contigs、262 318个transcripts、103 338个unigenes,经同源性分析表明其中37.31%(38 554个unigenes)与其他生物具有不同程度的同源性,通过功能分类研究及代谢途径分析(KEGG)获得参与萜类合成的序列158个unigenes,确定了5条参与萜类生物碱合成的途径。结论:该研究从分子水平上探讨乌头萜类次级代谢途径应答环境因素的原理,进一步证明了萜类生物碱合成代谢途径可能受干旱、低温和机械损伤等生境因素调控,可更好地了解附子、川乌质量形成的分子机制以指导乌头的农业化栽培管理。
- 张大燕文欢王伟彭成高继海
- 关键词：乌头转录组非生物胁迫
- 甲基磺酸乙酯化学诱变川芎的方法研究被引量：3
- 2017年
- 目的:通过甲基磺酸乙酯(EMS)诱导川芎材料突变,筛选最佳诱变条件为川芎新品种的培育研究提供方法学基础。方法:本实验在组织培养基础上,使用多浓度(0.1%、0.2%、0.5%、1.0%)的甲基磺酸乙酯(EMS)对川芎茎节进行不同时间段(0.5 h、1 h、2 h、5 h、8 h、12 h)的化学诱变处理,观察无菌试管苗的生长速度、发育形态,比较优化EMS诱变川芎无菌苗的最佳条件。结果:经0.1%EMS、1%EMS处理1 h、5 h的川芎茎节较对照粗壮且生长快速。结论:0.1%EMS、1%EMS处理1h、5h为川芎茎节的最佳诱导条件。
- 张大燕文欢王伟高小凤彭成高继海
- 关键词：川芎EMS诱变
- 不同保藏方法对鲜天麻保鲜效果比较被引量：10
- 2017年
- 为明确室温敞放、微孔膜密封、真空保藏对新鲜天麻的保鲜效果,本研究通过感官观察、称量计算、高效液相色谱法对天麻外观改变、水分散失及活性成分含量进行了检测。结果表明,室温敞放天麻的水分散失严重,外观较差,但其活性成分下降较缓慢;微孔膜密封保存能较好的维持天麻外观形态及自身特性;真空保存天麻容易发生腐烂变质,不能食用。在20 d内,以上3种方法保存的天麻中活性成分含量均高于药典要求含量。新鲜天麻中天麻素与对羟基苯甲醇含量较高,具有较高的食用或药用价值;在较低温度环境条件下,敞放或微孔膜封藏均能较好的保证其含量。
- 文欢张大燕王伟饶朝龙彭成高继海
- 关键词：天麻失水率天麻素
- 天麻素对糖氧剥夺再复供皮层神经细胞NF-κB炎症级联信号通路表达的影响被引量：9
- 2017年
- 目的:研究天麻素对糖氧剥夺再复供损伤原代皮层神经细胞的保护作用,以及对炎症相关信号通路表达的影响。方法:构建皮层神经细胞糖氧剥夺再复供(OGD/R)损伤模型,随机分为空白组、模型组、天麻素(80,60,40 mg·L-1)组。噻唑蓝(MTT)比色法测定皮层细胞存活率,比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,高通量RNA-Seq测序分析技术检测处理细胞的所有基因转录本的表达差异,通过功能注释与富集分析筛选出与OGD/R损伤或天麻素预处理保护作用相关的基因分子与代谢通路。结果:OGD/R损伤后皮层细胞活性下降,LDH释放增加,而天麻素预处理能提高细胞存活率,并显著下调LDH漏出率,转录组测序分析发现其分子机制主要涉及核转录因子-κB(NF-κB,18 gene),肿瘤坏死因子(TNF,21 gene)等信号通路的抑制调控。与模型组比较,天麻素下调了NF-κB,Toll样受体2(TLR2),肿瘤坏死因子受体1/2(TNFR1/2),白细胞介素-6(IL-6),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),干扰素诱导蛋白-10(IP-10),CC趋化因子2(CCL2),CXC趋化因子1/2/3(CXCL1/2/3),CXC趋化因子9(CXCL9/Mig)等多种炎症相关信号分子的转录表达。结论:天麻素对OGD/R损伤皮层神经细胞具有保护作用,其机制主要与抑制TLR-NF-κB-TNF炎症级联相关信号通路表达相关。
- 文欢张大燕王伟高继海饶朝龙彭成
- 关键词：天麻素皮层神经细胞转录组炎症
