袁惠
- 作品数:2 被引量:5H指数:1
- 供职机构:成都中医药大学附属医院更多>>
- 发文基金:四川省科技厅科技支撑计划项目成都市科技局项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 多效生长因子基因转染小鼠脂肪来源干细胞的实验研究被引量:5
- 2013年
- 目的探讨多效生长因子基因(pleiotrophin,Ptn)转染小鼠脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)作为组织工程血管的重建种子细胞的可行性,并检测其基因表达,为缺血性病损治疗提供新手段。方法取3只清洁级近交系C57BL/6W雌性小鼠(体重15~20 g)腹股沟皮下脂肪,采用酶消化法体外分离、培养ADSCs,流式细胞仪行细胞表面标志物CD29、CD44鉴定。实验分为转染pIRES2-LEGFPN1组(含Ptn基因编码序列,A组)和转染pLEGFP-N1负对照组(含GFP基因编码序列,B组)。ADSCs转染后,A组以最佳筛选浓度200μg/mL的G418对转染后细胞进行筛选,流式细胞仪鉴定转染后细胞免疫表型。实时荧光定量PCR、Western blot检测A、B组细胞Ptn基因和PTN蛋白表达。结果实验成功分离、培养小鼠ADSCs;细胞表面标志物CD29、CD44阳性率分别达99.5%、95.8%,双阳性率达93.6%。A组转染Ptn后细胞表面标志物CD29、CD44阳性率分别达99.1%、95.6%,双阳性率达93.4%。实时荧光定量PCR、Western blot检测示,A组Ptn基因和PTN蛋白相对表达水平均显著高于B组(P<0.05)。结论 Ptn基因能转染小鼠ADSCs并高表达PTN蛋白,为组织工程血管构建种子细胞选择提供了新思路。
- 陈昌金袁惠辜海英杨雪梅赵梓亦
- 关键词:血管组织工程脂肪来源干细胞转染小鼠
- 损伤性肾匀浆体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞转分化效果及可能机制的研究被引量:1
- 2016年
- 目的利用损伤性肾匀浆体外模拟急性肾损伤的微环境,探讨骨髓间充质干细胞(BMSC)诱导转分化及其可能机制。方法将体外培养的BMSC用10%大鼠缺血再灌注损伤肾匀浆上清液进行培养。7d后从形态学改变、18型角蛋白(CK-18)、肝细胞生长因子(HGF)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)的相应表达水平。结果损伤肾匀浆诱导7d后,骨髓间充质干细胞形态发生明显变化,并检测到CK-18阳性表达;同时被诱导的HGF和BMP-7表达水平明显升高。结论损伤肾匀浆可诱导BMSC部分向肾小管上皮样细胞转分化,其可能机制是BMSC可能以旁分泌的形式产生了HGF和BMP-7等"肾脏保护因子"。
- 陈昌金杨雪梅吕春燕赵梓亦袁惠辜海英高泓陈奕名陈明
- 关键词:间质干细胞肾小管骨髓间充质干细胞转分化