周荣 作品数:106 被引量:300 H指数:9 供职机构: 广州医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广州市科技计划项目 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
人3型腺病毒广州分离株基因组的进化分析 被引量:4 2007年 目的研究人3型腺病毒(human adenovirus type 3,HAdV-3)全基因组序列的基本特征并进行基因组的进化分析。方法取患儿鼻咽分泌物进行病毒分离,用中和试验和PCR进一步鉴定分型;克隆酶切片段并测序,利用软件对腺病毒基因组蛋白进行进化树分析。结果分离得到2株HAdV-3,基因组全长分别为35273bp和35269bp,2株均含有39个DNA编码序列和2个RNA编码序列。非编码区均保守,存在回文序列和反转重复序列。进化分析表明HAdV-3及其他B组腺病毒与猿腺病毒21型具有更近的进化关系。结论获得广州地区分离的2株HAdV-3,基因组全长35273bp和35269bp;人B组腺病毒与猿腺病毒存在一定的进化关系。 周荣 苏晓波 张其威 曾其毅 朱冰 张楚瑜 吴后波 吴灶和 龚四堂关键词:基因组 丙型肝炎病毒体外细胞培养系统研究进展 2015年 丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是单股正链RNA病毒,属黄病毒科(Flaviviridae),丙型肝炎病毒属(Hepacivirus)。HCV是导致慢性肝炎、肝硬化和肝癌的主要致病原之一。根据我国国家卫生和计划生育委员会(原卫生部)的数据统计发现,2002—2013年我国丙型肝炎发病人数以年均29.7%的速率递增,2013年的发病人数超过20万,HCV感染已经成为严重的社会和公共卫生问题。 李新磊 周荣 彭涛关键词:丙型肝炎病毒 基因型 从呼吸道标本中分离人偏肺病毒及病毒培养方法比较 被引量:7 2013年 目的从急性呼吸道感染患者的鼻咽拭子标本中分离人偏肺病毒(hMPV),同时利用分离株比较3种病毒培养方法,探索适合于临床病毒实验室分离培养hMPV的方法。方法接种55份经实时荧光定量PCR(real time-PCR)法检测为hMPV阳性的鼻咽拭子标本至Vero-E6细胞,连续盲传培养3代。每天观察细胞病变,结合real time-PCR和直接免疫荧光法(DFA)检测病毒的核酸复制和蛋白抗原,对分离株的G和F基因序列进行同源性分析。利用real time-PCR比较转鼓培养法、离心培养法和静置培养法3种方法hMPV的复制效率。结果从55份临床标本中分离鉴定出3株hMPV病毒(GZ/1/12、GZ/2/12、GZ/3/12),序列同源性分析显示3株临床分离株属于B型。hMPV病毒复制效率比较:转鼓培养法与离心培养法对hMPV复制效率相当,二者皆优于静置培养法。而离心培养法的操作更简便,更适用临床病毒实验室。结论成功分离鉴定出3株hMPV临床株,离心培养法更适合临床病毒实验室分离培养hMPV。 黄文博 伍时冠 刘文宽 周荣 杨子峰关键词:人偏肺病毒 急性呼吸道感染 广州地区儿童感染幽门螺杆菌iceA基因亚型与胃炎的相关性研究 被引量:6 2007年 目的探讨广州地区儿童感染幽门螺杆菌(H.pylori)的iceA基因亚型与胃炎的关系。方法105例胃、十二指肠疾病患儿的胃窦处取3块胃黏膜,分别进行快速尿素酶反应、病理检查和聚合酶链反应(PCR)。抽提胃黏膜基因组DNA,用3对引物检测H.pyloriureA和iceA基因,分析H.pylori iceA基因亚型与胃炎的关系。结果105例样本中,快速尿素酶反应、病理检测和聚合酶链反应(PCR)三者均阳性的标本52例,H.pylori iceA1亚型菌株单独检出率78.84%(41/52),H.pylori iceA2亚型菌株单独检出率1.92%(1/52),H.pylori iceA1和iceA2亚型均阳性的检出率3.84%(2/52),iceA1和iceA2亚型均阴性的比率15.38%(8/52),H.pylori iceA1亚型阳性率与其它基因亚型相比较,差异有显著性;感染H.pylori iceA1亚型菌株的患儿中轻度慢性胃炎3例,中度慢性胃炎15例,重度慢性胃炎25例;未感染H.pylori iceA1亚型菌株的患儿中轻度慢性胃炎2例,中度慢性胃炎4例,重度慢性胃炎3例,感染H.pylori iceA1亚型菌株患儿与未感染H.pylori iceA1亚型菌株患儿的胃黏膜病变程度差异有显著性(P<0.05)。结论H.pylori iceA1亚型是广州地区儿童感染H.pylori的优势基因亚型,H.pylori iceA1菌株容易引起较严重慢性胃炎。 林燕芬 龚四堂 区文玑 潘瑞芳 王凤华 周荣 何婉儿 黄海 陈佩瑜 陈宝心 梁文青关键词:幽门螺杆菌 聚合酶链反应 胃炎 牛IFN-γ基因的原核表达及单克隆抗体的研制 本研究参考GenBank中牛IFN-γ的cDNA基因序列,设计合成了一对含酶切位点的引物,PCR扩增出不含信号肽的IFN-γ基因,克隆进pMD18-T Simple Vector,将测序正确的目的基因插入表达载体pET-... 马魁 房红莹 周荣 罗满林 张欣 陈钜豪 崔敏关键词:干扰素 牛血清 IFN-Γ基因 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验 文献传递 致急性呼吸道感染人腺病毒的体外感染特性初步比较 被引量:13 2019年 致急性呼吸道感染人腺病毒(Human adenoviruses,HAdV)的型别特异性体外感染可能与细胞因子诱导的差异有关,并推测型别特异性体外感染可能与肺细胞中型别特异性细胞因子的诱导有关。为了比较致急性呼吸道感染人腺病毒3型、5型、7型和55型的体外感染特性,临床分离多株人腺病毒3型、7型和55型接种人肺腺癌细胞(A549细胞)或人胚肺成纤维细胞(MRC-5细胞),比较其感染滴度;将人腺病毒3型、5型、7型和55型毒株接种MRC-5细胞和A549细胞进行空斑试验,比较其空斑形成以及大小、形态;接种感染MRC-5细胞,分别于感染后10h和26h收集细胞培养上清,用人炎症细胞因子抗体芯片同步检测10个主要炎症相关细胞因子包括IL-1α、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-13、MCP-1、IFN-γ以及TNF-α的表达水平并进行分析。结果显示,与MRC-5细胞相比,A549细胞对这几种人腺病毒更加敏感;人腺病毒55型毒株与其它型别相比产毒量较高。人腺病毒在MRC-5细胞上难以形成空斑,而用A549细胞进行的空斑试验显示人腺病毒5型和55型毒株有较高的空斑形成单位,并且形成的空斑为规则的圆形且边缘清晰,空斑直径较大;而人腺病毒7型和3型毒株感染滴度较低,人腺病毒7型形成的空斑大小不均匀,形状不规则,人腺病毒3型形成的空斑直径很小,呈点状。炎症细胞因子检测结果显示,与正常对照组相比,野生型人腺病毒55型表达差异的炎症细胞因子是IL-1α、IL-1β和TNF-α;改造的人腺病毒3型感染MRC-5细胞后,两个时间点的各炎症细胞因子基本低表达。与正常对照组相比,人腺病毒感染MRC-5细胞后表达有差异的炎症细胞因子主要为IL-6和IL-8。 陈诗颖 樊晔 张玲 田新贵 周荣关键词:病毒培养 抗体芯片 炎症细胞因子 7型腺病毒受体同源性多肽的筛选和研究 2014年 目的:筛选7型腺病毒的结合多肽,并研究其与腺病毒受体的相关性。方法:利用噬菌体肽库,筛选7型腺病毒的结合多肽,并制备其抗体,利用抗体进行免疫荧光实验,观察抗体与细胞膜的结合情况。结果:筛选到了GTS09多肽,其与噬菌体的复合物能特异的结合7型腺病毒,亲和常数可以达到1.93×1010L/mol;制备了GTS09的兔多克隆抗体,免疫荧光显示,该抗体可以特异地结合在293细胞的细胞膜上。结论:抗GTS09的抗体可以特异的结合于细胞膜上,表明7型腺病毒受体可能与GTS09具有一定的同源性,为鉴定和分离7型腺病毒受体打下了基础。 许元生 田新贵 刘铭龙 李晨阳 周荣关键词:7型腺病毒 受体 多肽 免疫荧光 牛结核病荧光定量PCR快速检测方法的建立及初步应用 被引量:6 2007年 目的建立牛结核病荧光定量PCR快速检测方法。方法根据分枝杆菌的插入序列IS1081设计引物和探针,优化反应条件,建立标准曲线,进行特异性、敏感性、重复性实验,并用所建立的方法对临床样品进行检测。结果该方法的敏感性达到了10个拷贝,且特异性高,重复性好。对30份PPD试验和巢式PCR检测都为阳性的临床样本进行荧光定量PCR检测的结果全部为阳性;而对PPD检测阳性,巢式PCR检测为阴性的15份临床样本进行检测时,2份为阳性;在对2份PPD检测阴性而巢式PCR检测阳性的临床样本的检测结果也为阳性。结论成功建立了牛结核病荧光定量PCR快速检测方法,对临床样品的快速检测和牛结核病的早期诊断具有重要意义。 亓文宝 罗满林 周荣 白培胜 贺东生 刘镇明 黄毓茂关键词:牛结核病 荧光定量PCR 巢式PCR PPD 儿童呼吸道腺病毒基因分型方法的建立及其应用 被引量:1 2007年 目的利用PCR技术,建立引起儿童呼吸道感染的腺病毒的基因分型方法,便于推广和应用。方法分析GenBank中不同型别腺病毒的六邻体基因序列特点,设计不同型腺病毒的特异性引物,以PCR方法进行基因分型,建立基因分型方法,并利用此方法对广州市2004年7月某幼儿园流行的腺病毒感染进行了基因分型。结果建立了呼吸道腺病毒的基因分型方法。广州市2004年7月某幼儿园流行的腺病毒为3型腺病毒。结论PCR方法可进行腺病毒的基因分型,且简便、结果可靠,便于推广应用。 朱冰 龚四堂 钟家禹 周荣 肖密丝关键词:腺病毒 聚合酶链反应 基因型 呼吸道病毒感染监测及超快速荧光定量PCR技术研发 急性呼吸道感染(ARI)一直是困扰人类最常见、发生率最高的疾病,同时也是新发和突发传染病的最主要病原因素。广州地处亚热带沿海,是中国南大门,是临近东南亚和大洋洲地区的第一门户枢纽,人口密集,与国内外人员、物资交流频繁,一... 刘文宽 周荣 张丽关键词:急性呼吸道感染 流行病学 文献传递