林鹏飞
- 作品数：36 被引量：62H指数：5
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 秦岭大熊猫精浆指标对精液品质的影响
- 2022年
- 精浆生化指标和精液品质的研究是开展雄性大熊猫生殖技术的基础。精浆成分在精子获能、受精以及保护精子在雌性生殖道内运行等过程中发挥重要功能。本试验通过对4只雄性秦岭大熊猫精浆中果糖、柠檬酸、锌(Zn)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量的测定,分析比较其与精液品质的相关性,以期为提高秦岭大熊猫精液品质和精液保存质量提供参考。结果显示,果糖浓度与秦岭大熊猫的精子活率、顶体和质膜完整性无显著相关性;Zn含量与精子活率、顶体和质膜完整性呈极显著正相关;柠檬酸含量与精子活率、顶体和质膜完整性呈正相关;ROS含量与精液品质呈显著负相关性。结果表明,在精液保存过程中,可以通过调整精浆中Zn、柠檬酸及ROS含量提升秦岭大熊猫精液品质。
- 董贺孟马永杰赵鹏鹏沈洁娜张丹辉齐航靳亚平雷颖虎林鹏飞
- 关键词：秦岭大熊猫精浆精液品质
- 丙酮酸钙对山羊瘤胃挥发性脂肪酸浓度动态变化的影响被引量：5
- 2008年
- 以8只装有永久性瘤胃瘘管的成年徐淮山羊为试验动物,采用自身对照设计,研究丙酮酸钙对山羊瘤胃内挥发性脂肪酸浓度动态变化的影响。结果表明：与对照组相比,添喂丙酮酸钙后,在0-8h内,对pH值无显著影响。4h时,总挥发性脂肪酸（TVFA）浓度升高25%（P〈0.01）;丙酸浓度升高60%（P〈0.01）。0-8h内,丙酸比例均高于对照组（17%-30%）;乙丙比均低于对照组（20%-29%）。说明在山羊日粮中添加一定量丙酮酸钙,可在不影响pH值的情况下,提高丙酸比例,降低乙丙比,改变瘤胃发酵类型。
- 冉林武沈向真涂杰林鹏飞陈杰
- 关键词：山羊瘤胃挥发性脂肪酸
- LncRNA GAS5对小鼠子宫内膜蜕膜化的影响
- 2023年
- 为了研究长链非编码RNA生长抑制特异性转录本5(lncRNA GAS5)在小鼠子宫中的表达及其在子宫内膜蜕膜化中的作用,本试验收集妊娠第1~8天的小鼠子宫组织样本,分离妊娠第4天的小鼠子宫内膜基质细胞(ESC)并通过类固醇构建体外诱导蜕膜化模型,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测GAS5、蜕膜化标志因子蜕膜催乳素相关蛋白(Dtprp)、心脏神经脊衍生物表达转录因子2(Hand2)、骨形态发生蛋白2(Bmp2)、肝/肾/骨型碱性磷酸酯酶(Alpl)和同源异形盒基因A10(Hoxa10)的表达水平,采用荧光原位杂交(FISH)技术检测GAS5在ESC中的表达和定位。结果显示,与妊娠第1天相比,在妊娠第4天小鼠子宫组织中GAS5的表达水平显著升高(P<0.05);与妊娠第4天相比,GAS5的表达水平在妊娠第6~8天又随着蜕膜化的进行逐渐下降(P<0.05);与阴性对照(si-NC组)相比,GAS5沉默会引起ESC中蜕膜化相关的基因Dtprp、Hand 2、Bmp 2、Alpl和Hoxa 10表达水平显著增加(P<0.05或P<0.01);GAS5在ESC和蜕膜ESC的细胞质和细胞核中均有表达。结果表明,GAS5参与调节小鼠早期妊娠和蜕膜化进程。
- 贾燕妮蔡芮张新艳张瑞雪龚素华李海静靳亚平林鹏飞
- 关键词：小鼠蜕膜化子宫内膜长链非编码RNA
- 大熊猫精液冷冻保存技术研究进展被引量：1
- 2020年
- 大熊猫是我国特有的珍稀濒危动物,积极开展大熊猫人工繁育工作,对于保护我国大熊猫遗传多样性、维持种群数量和加快野化放归具有重要的意义。大熊猫精液冷冻保存技术的研发是保护大熊猫种质资源、提高人工受精率和大熊猫繁殖率的重要手段。通过综述大熊猫生殖特征、精液采集、品质检查、冷冻保护稀释液、冷冻损伤机制以及冷冻和解冻程序的研究现状,以期为大熊猫精液冷冻技术的深入研究和应用提供参考。
- 程楷淇刘国文石亚男冯晓岚赵鹏鹏林鹏飞
- 关键词：大熊猫精液采集精液品质检查
- 猪有腔卵泡发育和闭锁中颗粒细胞凋亡与卵泡液类固醇激素的变化被引量：1
- 2011年
- 【目的】研究猪有腔卵泡发育和闭锁中颗粒细胞凋亡与卵泡液类固醇激素的变化,为了解猪有腔卵泡发育与闭锁的调控机理提供参考。【方法】从猪卵巢分离完整有腔卵泡,按质量分为健康卵泡、早期闭锁卵泡和晚期闭锁卵泡3类;再按卵泡直径大小分为大卵泡组（〉5 mm）、中卵泡组（3~5 mm）和小卵泡组（〈3 mm）3组,制作完整有腔卵泡的石蜡切片,HE染色后观察其形态学变化。应用AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞仪检测壁层颗粒细胞凋亡情况,放射免疫测定法（RIA）分析卵泡液中雌二醇（E2）和孕酮（P4）浓度的变化。【结果】不同大小健康卵泡内均存在少量的凋亡颗粒细胞,卵泡闭锁时颗粒细胞凋亡率显著增加,小卵泡表现尤为明显;晚期闭锁小卵泡中约有60%的颗粒细胞发生凋亡。健康大卵泡组E2浓度显著高于中、小卵泡组,P4浓度与中卵泡组无差异,但显著低于小卵泡组。卵泡闭锁时不同大小卵泡均表现出E2浓度显著下降和P4浓度显著增加。中、小健康卵泡的卵泡液中P4/E2〈5,而健康大卵泡中P4/E2〈1;早期闭锁大卵泡卵泡液中P4/E2〉1,而早期闭锁中、小卵泡中P4/E2在5~15;当P4/E2〉15时,卵泡则处于晚期闭锁状态。【结论】颗粒细胞凋亡是卵泡闭锁的主要诱因,但卵泡闭锁程度因卵泡大小而异,小卵泡似乎更易发生闭锁;卵泡液中P4/E2可作为判定有腔卵泡质量的一个标准。
- 林鹏飞剧世强罗碧平郝元斌王利勤芮荣靳亚平
- 关键词：有腔卵泡颗粒细胞凋亡孕酮雌二醇
- 山羊CREBZF蛋白两种亚型过表达载体的构建及其对子宫内膜上皮细胞凋亡的影响被引量：1
- 2022年
- 旨在构建编码山羊CREBZF蛋白2种亚型(长亚型SMILE和短亚型Zhangfei)基因的过表达载体,并初步探究CREBZF对山羊子宫内膜上皮细胞(gEECs)凋亡的影响。本研究针对编码山羊CREBZF不同亚型的基因CDS区分别设计引物,分段进行PCR扩增;运用无缝克隆技术将所获得各目的基因片段与线性化pcDNA3.1(+)载体连接,构建pcDNA3.1(+)-SMILE和pcDNA3.1(+)-Zhangfei重组过表达载体,通过双酶切和测序进行鉴定;转染过表达载体至gEECs,提取总RNA和蛋白,通过qRT-PCR和Western blot验证过表达效率;应用流式细胞术检测过表达SMILE和Zhangfei对gEECs凋亡率的影响。PCR、双酶切显示各目的条带大小正确;测序显示目的片段与NCBI基因库中山羊CREBZF的预测序列一致性为100%;转染过表达载体后,gEECs中SMILE与Zhangfei在转录和翻译水平的表达量均显著增加,并发现SMILE可能在翻译后自身被修饰;空载体组细胞凋亡率为8.45%;转染pcDNA3.1(+)-SMILE组凋亡率显著上升至12.41%(P<0.01);转染pcDNA3.1(+)-Zhangfei组凋亡率上升至9.83%,但相较于空载体组统计学差异不显著;结果提示,CREBZF可能调控gEECs的凋亡进程。本研究将目的基因分段克隆与无缝克隆技术联用,构建了上述2种过表达载体,为进一步探究CREBZF在反刍动物子宫内膜上皮细胞周期性变化中的作用奠定基础。
- 牛宏宇张瑞雪齐茂振马玉洁曲栓靳亚平林鹏飞
- 关键词：凋亡
- 猪体细胞克隆胚胎的体外生产试验被引量：6
- 2009年
- 【目的】通过优化猪体细胞核移植程序,建立获得克隆囊胚的有效方法。【方法】比较不同电激活参数、不同体外培养条件对猪体细胞克隆胚发育能力的影响。【结果】选用1.5kV·cm-1、80μs和1DC的参数组合,对猪核移植重构胚进行电融合和电激活,可获得较高的卵裂率和最高的囊胚发育率(分别为71.4%和14.3%),且囊胚发育率显著高于其它组(P<0.05);0.4%BSANCSU23培养液培养克隆重构胚72h,半量换液并未改善克隆胚的发育,但添加10%FBS可显著提高囊胚发育率(15.1%对10.3%,P<0.05)和DNA完整率(56.8%对46.6%,P<0.05);采用猪卵泡颗粒细胞(pGC)共培养体系未能显著提高克隆胚发育率(P>0.05),但卵丘细胞(pCC)单层共培养时,囊胚发育率显著高于对照组(16.7%对9.8%,P<0.05),培养5d的克隆胚凋亡率也显著低于对照组(39.5%对54.2%,P<0.05)。【结论】采用1.5kV·cm-1、80μs和1DC的参数组合对猪克隆重构胚进行电融合和电激活,以0.4%BSANCSU23培养液作pCC单层共培养72h,然后换用10%FBSNCSU23培养液,可明显提高囊胚发育率。
- 剧世强芮荣卢庆曹爱巧李宁林鹏飞郭慧利
- 关键词：体细胞核移植重构胚发育
- 猪冷冻精子的体外受精与单精子胞浆内注射
- 采用猪冷冻精子进行体外受精和单精子细胞浆内注射(ICSI)，并研究添加L-半胱氨酸和不同成熟培养法对猪ICSI胚胎发育的影响。结果发现，虽然ICSI胚胎的卵裂率略低于IVF组(68.9％对74.5％)，桑椹胚发育率也明显...
- 李宁芮荣周冬梅剧世强林鹏飞郝元斌
- 关键词：冷冻精子体外受精卵母细胞
- 文献传递
- 内质网应激预适应对LPS诱导的山羊子宫内膜上皮细胞炎性反应的保护作用
- 2023年
- 探究内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的山羊子宫内膜上皮细胞(goat endometrial epithelial cells,gEECs)炎性反应中的作用,为阐明ERS在反刍动物子宫内膜炎中的作用机制提供前期基础。本研究使用ERS激活剂衣霉素(tunicamycin,TM)和抑制剂4-苯基丁酸(4-phenylbutyric acid,4-PBA)分别单独处理gEECs激活或抑制ERS,应用RT-qPCR和Western blot技术检测ERS对炎症相关基因表达的影响;接着,使用TM和4-PBA分别预处理gEECs,再利用大肠杆菌LPS处理诱导gEECs炎性反应,通过RT-qPCR和Western blot检测ERS对LPS诱导的gEECs炎性反应的影响及作用机制。结果显示,TM处理激活ERS显著抑制gEECs中炎性细胞因子IL-6和TNF-αmRNA的表达(P<0.05),显著抑制经典炎症通路相关基因TLR4、NF-κB P65和NLRP3 mRNA的表达(P<0.01);同时,显著抑制NF-κB P65蛋白的磷酸化以及NLRP3蛋白的表达(P<0.05)。4-PBA处理则显著促进gEECs中炎症相关基因(IL-6、TNF-α、TLR4、NF-κB P65和NLRP3)的表达(P<0.05)。进一步研究发现,TM预处理gEECs显著抑制LPS诱导的炎性细胞因子IL-6 mRNA的表达(P<0.05);显著抑制LPS诱导的TLR4、NF-κB P65和NLRP3 mRNA的表达以及NF-κB P65蛋白的磷酸化和NLRP3蛋白的表达(P<0.05)。4-PBA预处理gEECs则显著促进LPS诱导的gEECs炎性反应(P<0.05)。综上表明,ERS通过抑制NF-κB通路和NLRP3炎性小体通路的激活减轻LPS诱导的gEECs炎性反应,为进一步阐明山羊子宫内膜炎的发生发展提供了前期理论基础。
- 郜康康扆妍妍赵一腾林鹏飞陈华涛陈华涛
- 关键词：内质网应激子宫内膜炎NF-ΚB通路
- 猪体细胞克隆胚胎体外发育过程中的凋亡规律
- 目的：本试验旨在研究比较猪体细胞克隆胚胎体外发育与凋亡变化规律，探讨其体外发育潜能与细胞凋亡间的关系。
方法：将体外成熟培养获得的猪MⅡ期卵母细胞随机分为2组，分别进行体细胞核移植(SNCT)与体外受精(IVF...
- 剧世强郭慧利王利勤林鹏飞卢庆芮荣
- 关键词：体细胞核移植胚胎发育基因表达
