郝元斌
- 作品数：8 被引量：23H指数：3
- 供职机构：南京农业大学动物医学院更多>>
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪冷冻精子的体外受精与单精子胞浆内注射
- 采用猪冷冻精子进行体外受精和单精子细胞浆内注射(ICSI)，并研究添加L-半胱氨酸和不同成熟培养法对猪ICSI胚胎发育的影响。结果发现，虽然ICSI胚胎的卵裂率略低于IVF组(68.9％对74.5％)，桑椹胚发育率也明显...
- 李宁芮荣周冬梅剧世强林鹏飞郝元斌
- 关键词：冷冻精子体外受精卵母细胞
- 文献传递
- 猪有腔卵泡发育和闭锁中颗粒细胞凋亡与卵泡液类固醇激素的变化被引量：1
- 2011年
- 【目的】研究猪有腔卵泡发育和闭锁中颗粒细胞凋亡与卵泡液类固醇激素的变化,为了解猪有腔卵泡发育与闭锁的调控机理提供参考。【方法】从猪卵巢分离完整有腔卵泡,按质量分为健康卵泡、早期闭锁卵泡和晚期闭锁卵泡3类;再按卵泡直径大小分为大卵泡组（〉5 mm）、中卵泡组（3~5 mm）和小卵泡组（〈3 mm）3组,制作完整有腔卵泡的石蜡切片,HE染色后观察其形态学变化。应用AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞仪检测壁层颗粒细胞凋亡情况,放射免疫测定法（RIA）分析卵泡液中雌二醇（E2）和孕酮（P4）浓度的变化。【结果】不同大小健康卵泡内均存在少量的凋亡颗粒细胞,卵泡闭锁时颗粒细胞凋亡率显著增加,小卵泡表现尤为明显;晚期闭锁小卵泡中约有60%的颗粒细胞发生凋亡。健康大卵泡组E2浓度显著高于中、小卵泡组,P4浓度与中卵泡组无差异,但显著低于小卵泡组。卵泡闭锁时不同大小卵泡均表现出E2浓度显著下降和P4浓度显著增加。中、小健康卵泡的卵泡液中P4/E2〈5,而健康大卵泡中P4/E2〈1;早期闭锁大卵泡卵泡液中P4/E2〉1,而早期闭锁中、小卵泡中P4/E2在5~15;当P4/E2〉15时,卵泡则处于晚期闭锁状态。【结论】颗粒细胞凋亡是卵泡闭锁的主要诱因,但卵泡闭锁程度因卵泡大小而异,小卵泡似乎更易发生闭锁;卵泡液中P4/E2可作为判定有腔卵泡质量的一个标准。
- 林鹏飞剧世强罗碧平郝元斌王利勤芮荣靳亚平
- 关键词：有腔卵泡颗粒细胞凋亡孕酮雌二醇
- 猪单精注射胚与孤雌胚激活后的发育被引量：1
- 2009年
- 用猪的冷冻精液,以不同的激活方法进行猪单精注射(ICSI)胚胎的生产。结果表明,联合应用电激活和化学激活所获ICSI胚卵裂率(79.28%)明显高于单纯电激活组卵裂率(58.77%),但两组桑囊胚发育率无统计学差异(31.58%对22.67%),电化学联合激活较单纯的电激活更有利于ICSI胚胎的发育。通过比较孤雌电激活胚与ICSI胚胎的发育情况,发现孤雌激活胚与ICSI胚在卵裂率、桑囊胚发育率上均无显著差异,表明现有实验电激活参数完全适用于猪ICSI胚胎的体外生产。
- 周冬梅李宁剧世强林鹏飞郭慧利郝元斌芮荣
- 关键词：孤雌激活卵裂率
- 卵丘细胞对猪卵母细胞成熟及其发育能力的影响
- 随着胚胎生物技术的发展，对体外成熟卵母细胞的质量要求日益增加。卵母细胞体外成熟及其发育能力的研究已成为体外受精（IVF）、胚胎体外生产（IVP）和体细胞核移植（SCNT）等技术发展的关键之一。目前，通过体外培养而获得的卵...
- 郝元斌
- 关键词：卵丘细胞卵母细胞体外成熟发育能力
- 文献传递
- 猪卵泡闭锁过程中颗粒细胞凋亡和Fas/FasL变化被引量：3
- 2010年
- 为了揭示猪卵巢卵泡选择性闭锁机制,采用Real time PCR和HE染色方法,检测猪各阶段卵泡颗粒细胞中Fas和FasLmRNA表达和形态学变化;分析比较不同发育阶段卵泡中颗粒细胞Fas和FasLmRNA表达差异及细胞凋亡程度。结果表明,健康的大(>5 mm)、中(3～5 mm)、小(<3 mm)卵泡,早期闭锁的大、中、小卵泡以及晚期闭锁的大、中、小卵泡壁层颗粒细胞都有Fas和FasLmRNA表达。早期闭锁卵泡颗粒细胞Fas和FasLmRNA相对表达量高于健康卵泡与晚期闭锁卵泡。早期闭锁小卵泡FasLmRNA相对表达量与大、中、小健康卵泡相比均有显著差异(P<0.05);状态相同的大、中、小卵泡间Fas与FasLmRNA相对表达量均无显著差异(P>0.05);表明Fas/FasL系统在猪卵巢卵泡选择性闭锁过程中,对颗粒细胞凋亡具有重要的调节作用。
- 张羽林鹏飞郝元斌郭慧利芮荣
- 关键词：颗粒细胞凋亡FAS/FASL
- 猪分离卵泡体外培养过程中Fas/FasL对颗粒细胞凋亡的作用被引量：9
- 2010年
- 从猪卵巢分离完整有腔卵泡,按质量分为3类:健康卵泡、早期闭锁卵泡和晚期闭锁卵泡。猪分离卵泡经眼观检查后再行石蜡切片和HE染色,形态学研究表明,眼观检查对于健康卵泡的判定准确率为92%。取健康卵泡按直径大小分为3组:直径>5mm大卵泡组、3～5mm中卵泡组和<3mm小卵泡组。卵泡培养8、16和24h,以Annexin-VFITC/PI双染流式细胞仪检测壁层颗粒细胞凋亡情况,结果发现培养卵泡颗粒细胞的总凋亡率(早期凋亡+晚期凋亡)在8h时就已达到70%以上,至24h则为81.1%～94.6%。收集无血清培养0、8、16、24、48和72h的卵泡颗粒细胞,用realtimePCRSYBRgreen法检测各组卵泡颗粒细胞FasL和FasmRNA相对表达量。各级卵泡颗粒细胞中FasLmRNA水平随培养时间显著增加,培养至24h达最大值(P<0.05);小卵泡颗粒细胞FasLmRNA水平均高于大、中卵泡组。各级卵泡颗粒细胞FasmRNA相对表达量在培养前(0h)差异不显著,8h时显著增加,48h达最大值。该实验表明,所用无血清卵泡培养体系可有效诱导卵泡颗粒细胞的凋亡,细胞凋亡是卵泡闭锁的主要诱因,但卵泡闭锁程度可因卵泡大小而异,小卵泡似乎更容易发生闭锁。
- 林鹏飞郝元斌郭慧利刘红林芮荣
- 关键词：有腔卵泡颗粒细胞凋亡FAS/FASL
- 猪冷冻精子的体外受精与单精子胞浆内注射被引量：1
- 2010年
- 用猪冷冻精子进行体外受精和单精子胞浆内注射(ICSI),并研究添加L-半胱氨酸及不同成熟培养法对猪ICSI胚胎发育的影响。结果表明:用猪冷冻精子生产的ICSI胚胎卵裂率及囊胚发育率分别为68.3%和11.4%,均低于用冷冻精子进行体外受精(IVF)所获得的卵裂率和囊胚发育率(分别为76.9%和19.2%,P<0.05)。在培养液中添加1.71mmol·L^(-1) L-半胱氨酸培养3 h,无论是卵裂率、桑椹胚发育率,还是囊胚发育率,均未得到明显改善(P>0.05);采用含0.4%BSA的NCSU-23培养液进行猪卵母细胞成熟培养,ICSI胚胎卵裂率虽明显高,但各组所获胚胎发育率均无显著差异(P>0.05),表明所用卵母细胞的成熟方法并未对ICSI胚胎发育产生明显的影响;用颗粒细胞或卵丘细胞共培养ICSI胚胎后,卵裂率有明显提高(P<0.05),但各组囊胚发育率无统计学差异。
- 李宁芮荣周冬梅剧世强林鹏飞郝元斌
- 关键词：冷冻精子体外受精
