- 药物制剂工程课堂教学体会被引量：5
- 2008年
- 药物制剂工程是药剂学和工程学交叉之后产生的一门新兴学科。根据该课程内容特点,对在课堂教学过程中应采用的适宜教学方法和教学手段进行阐述和讨论。
- 罗学刚张同存王楠姜勇
- 关键词：课堂教学
- 猪白血病抑制因子多克隆抗体的制备及其免疫定位被引量：1
- 2008年
- 目的:构建猪LIF原核表达载体,表达并纯化重组猪LIF蛋白,制备兔抗猪LIF多克隆抗体并进行免疫定位。方法:根据GenBank中猪LIFcDNA基因序列扩增出目的基因片段,将扩增的片段克隆进PET-31b表达载体的NdeⅠ和XhoⅠ酶切位点之间,经转化使其在大肠杆菌BL21中表达,产生重组猪LIF蛋白,纯化后作为抗原免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体;经ELISA和Western blotting分析鉴定抗体的效价和特异性;最后利用所制备的抗体进行LIF蛋白在猪体内的免疫定位。结果:酶切和DNA测序显示,所构建的原核表达质粒PET-31b-mpLIF含有编码成熟型猪LIF蛋白的cDNA序列;表达结果显示,诱导样品在相对分子质量约20000的位置上有明显的增强表达条带;纯化结果显示,重组蛋白在相对分子质量约20000的位置上有一条清晰、单一的条带;通过免疫新西兰大白兔,获得了特异性较高、效价达1∶10000的多克隆抗体;应用该抗体进行的免疫定位显示,LIF蛋白在心肌细胞、脾索和脾被膜的单层上皮细胞、肺成纤维细胞中有弱表达。结论:重组猪LIF蛋白在大肠杆菌中进行了高效、正确表达;得到了效价较高、特异性较强的多克隆抗体;LIF蛋白在心肌细胞、脾索和脾被膜的单层上皮细胞、肺成纤维细胞中有弱表达。
- 李明堂姜勇付玉
- 关键词：白血病抑制因子多克隆抗体免疫定位
- 在大肠杆菌中无需包涵体复性制备溶栓药物瑞替普酶的方法
- 本发明涉及一种无需包涵体复性、直接通过大肠杆菌表达系统制备溶栓药物瑞替普酶(Reteplase，rPA)的方法。通过PCR扩增得到rPA的基因片断，将该基因片断克隆到载体pET40b中，构建得到pET40b-rPA重组质...
- 张同存罗学刚田文静姜勇王楠路福平
- 文献传递
