李玉梅
- 作品数:3 被引量:34H指数:3
- 供职机构:山东大学更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程更多>>
- 产转糖基β-半乳糖苷酶菌株F3的鉴定、产酶条件及转糖基活性研究被引量:9
- 2009年
- 菌株F3从土壤中筛选得到,具有产生转糖基β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的特性。根据形态观察及18SrD-NA序列分析,菌株F3被鉴定为扩张青霉(Penicillumexpansum)。通过单因子试验和正交试验,对菌株F3产生转糖基β-半乳糖苷酶的培养基组成及发酵条件进行了优化。优化后的培养基组成为葡萄糖2%、酵母粉1%、蛋白胨1.5%、氯化钠0.3%。在初始pH6.0,28℃培养40 h时,其产酶量为2 245.2 U/L,比优化前提高约3倍。菌株F3产生的转糖基β-半乳糖苷酶以pH4.5缓冲液配制的30%乳糖为底物,50℃反应24 h,低聚半乳糖产量为30.6%,其中80%以上为三糖。
- 李玉梅卢丽丽肖敏
- 关键词:Β-半乳糖苷酶低聚半乳糖
- 转糖基β-半乳糖苷酶生产含低聚半乳糖的低乳糖牛奶被引量:8
- 2007年
- 研究利用具有转糖基活性的β-半乳糖苷酶生产含低聚半乳糖的低乳糖牛奶。含低聚半乳糖的低乳糖牛奶既能解决乳糖不耐症问题,同时还在牛奶中增添了低聚半乳糖双歧因子。从Enterobacter sp.B5的无细胞抽提液中,利用硫酸铵沉淀制备具有转糖基活性的β-半乳糖苷酶,作用鲜牛奶生成含低聚半乳糖的低乳糖牛奶。利用薄层层析、高压液相色谱技术和软件NIH ImageJ 1.36分析了反应产物中的糖组分(葡萄糖、半乳糖、乳糖和低聚糖(包括转移二糖和三糖))。结果显示酶作用后的鲜牛奶中大约70%的乳糖转化为葡萄糖和半乳糖,至少10%的乳糖通过转糖基反应生成低聚半乳糖。在酶浓度为3U/ml,50℃酶解4h的反应条件下,获得含低聚半乳糖的低乳糖牛奶的糖组成为0.59%低聚半乳糖(含0.37%转移二糖和0.22%三糖),1.33%乳糖,2.83%单糖。本研究利用软件NIH ImageJ 1.36定量分析样品糖组分的TLC结果,可以避免乳糖的同分异构体-转移二糖在高压液相色谱结果中因无法分离而造成的漏检。
- 李正义肖敏卢丽丽李玉梅
- 关键词:Β-半乳糖苷酶低聚半乳糖低乳糖牛奶
- 转糖基β-半乳糖苷酶产生菌筛选和鉴定及酶催化生成低聚半乳糖被引量:20
- 2006年
- 通过水解活性和转糖基活性筛选,从实验室97株保存菌种中获得1株具有转糖基活性的β-半乳糖苷酶产生菌,克隆并序列分析了该菌株16S rDNA基因片断,GenBank收录号为DQ267829.综合其形态学特征、生理生化特征及16S rDNA序列同源性分析结果,将其鉴定为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)2-37-4-1.确定了该菌株β-半乳糖苷酶产酶培养基的碳源为乳糖1%,氮源为蛋白胨0.5%和酵母膏0.5%,培养条件为37℃摇床培养18 h;碳源实验证明,该菌株β-半乳糖苷酶产生为乳糖诱导型.利用薄层层析技术研究了pH值、乳糖底物浓度、反应温度和反应时间对该菌株β-半乳糖苷酶以乳糖为底物转糖基合成低聚半乳糖的影响,确定最适反应条件为pH7.5、50 mmol/L(磷酸缓冲液)配制的40%乳糖溶液,55℃反应24 h.转糖基反应产物高压液相色谱分析其组成为低聚半乳糖25.68%,双糖(包括乳糖和转移二糖)33.02%,葡萄糖26.37%和半乳糖14.92%.
- 王红妹肖敏李正义李玉梅钱新民
- 关键词:巨大芽孢杆菌RDNAΒ-半乳糖苷酶低聚半乳糖