蔺宇
- 作品数:5 被引量:0H指数:0
- 供职机构:军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 一种具有神经修复作用的基因,其编码蛋白质,与其相互作用的受体及其应用
- 本发明公开了一种具有神经修复作用的基因,该基因编码的蛋白质以及与其相互作用的受体,还公开了它们的应用。本发明的基因为一种脊髓损伤修复相关基因SCIRR 10,它的cDNA序列为690个碱基,其编码的蛋白质有171个氨基酸...
- 刘少君时小燕唐宁阙海萍刘勇黄海燕蔺宇杨树广杨静文罗展鹏王宇倪艳丽马振莲李欣陈芳进刘涛林秋霞景书谦
- 文献传递
- SCIRR 10截短体真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达
- 2011年
- 目的:构建SCIRR 10蛋白3个截短体的哺乳动物细胞表达系统,探讨SCIRR 10蛋白的功能位点。方法:PCR扩增出SCIRR 10蛋白的3个功能截短体表达DNA序列,构建3种真核表达质粒载体pcDNA3.1/Myc-His-SCIRR 10(1-145aa)、pcDNA3.1/Myc-His-SCIRR 10(1-90aa)和pcDNA3.1/Myc-His-SCIRR 10(1-70aa)。将3个表达载体质粒转染到COS-7细胞中,应用Western blotting方法检测3个蛋白截短体的表达情况。结果:3个被截短的SCIRR 10蛋白相对分子质量分别为18 800、12 800和10 700。在COS-7细胞中可以成功表达3个SCIRR 10蛋白截短体。相对3个SCIRR 10截短体蛋白的表达量,β-tubulin蛋白无明显变化。结论:成功构建SCIRR 10蛋白3个截短体的哺乳动物细胞表达系统,通过此系统获得有生物活性的3个SCIRR10截短体蛋白。
- 蔺宇刘少君
- 关键词:蛋白表达
- 脊髓损伤修复相关10号基因编码蛋白与促甲状腺激素释放激素受体2的相互作用
- 2011年
- 背景:前期研究中,通过酵母双杂交系统筛选出可能与脊髓损伤修复相关10号基因(No10,SCIRR10)编码蛋白相互作用的蛋白质,其中含有促甲状腺激素释放激素受体2(thyrotropin releasing hormone receptor2,TRH R2),而SCIRR10与TRH R2是否存在相互作用尚未阐明。目的:验证SCIRR10蛋白是否作用TRH R2受体,进一步确认TRH R2为SCIRR10蛋白受体,为下一步研究提供可靠实验证据。方法:应用RT-PCR方法扩增SCIRR10和TRH R2基因,构建带有绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白标签的真核重组表达质粒GFP-SCIRR10和RFP-TRH R2,分别转染真核细胞COS7,培养16h后,将表达SCIRR10-GFP的细胞培养液加入到表达受体TRH R2-RFP细胞中继续培养。4h后,用40g/L多聚甲醛固定细胞,于激光共聚焦显微镜下观察蛋白GFP-SCIRR10和蛋白RFP-TRH R2两者相互结合情况。结果与结论:在荧光条件下仅能观察到SCIRR10-GFP与TRH R2-RFP相互结合,而其他对照没有观察到类似现象。通过实验以及前期研究结果证实TRHR R2就是SCIRR10作用受体。
- 时小燕蔺宇
- 关键词:脊髓损伤酵母双杂交RT-PCR
- 一种具有神经修复作用的基因,其编码蛋白质,与其相互作用的受体及其应用
- 本发明公开了一种具有神经修复作用的基因,该基因编码的蛋白质以及与其相互作用的受体,还公开了它们的应用。本发明的基因为一种脊髓损伤修复相关基因SCIRR 10,它的cDNA序列为690个碱基,其编码的蛋白质有171个氨基酸...
- 刘少君时小燕唐宁阙海萍刘勇黄海燕蔺宇杨树广杨静文罗展鹏王宇倪艳丽马振莲李欣陈芳进刘涛林秋霞景书谦
- 文献传递
- 大鼠促甲状腺激素释放激素受体1基因的克隆及其在COS-7细胞系中的表达
- 2011年
- 目的:克隆大鼠促甲状腺激素释放激素受体1(TRH-R1)基因,构建其真核表达载体,并检测该基因在非洲绿猴肾细胞系COS-7中的表达。方法:应用RT-PCR方法,以大鼠脑源RNA为模板,扩增获得TRH-R1基因,定向克隆到pDsRed2-N1中,以LipofectAMINE 2000试剂转染pDsRed2-N1-TRH-R1表达载体至COS-7细胞系中进行瞬时表达。结果:测序结果表明,从大鼠脑源总RNA中克隆到正确的TRH-R1基因全长编码序列;显微照相观察到所构建的TRH-R1表达载体质粒在COS-7细胞系中获得有效表达。结论:大鼠TRH-R1基因的克隆、真核表达载体的构建及在COS-7细胞系中表达获得成功,为进一步研究其功能奠定了基础。
- 蔺宇刘少君
- 关键词:克隆真核表达载体