尹杰
- 作品数:4 被引量:4H指数:1
- 供职机构:四川农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金:公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 间接ELISA检测猪传染性胃肠炎与猪呼吸道冠状病毒抗体的方法建立
- 本研究对TGEVSBC蛋白(在PRCV中缺失)和TGEVN蛋白(TGEV与PRCV共有)进行了原核表达,建立了以重组SBC和N蛋白为抗原的检测TGEV与PRCV抗体的间接ELISA方法。主要研究内容如下: 1.TGE...
- 尹杰
- 间接ELISA检测猪传染性胃肠炎与猪呼吸道冠状病毒抗体的方法建立
- 本研究对TGEV SBC蛋白(在PRCV中缺失)和TGEV N蛋白(TGEV与PRCV共有)进行了原核表达,建立了以重组SBC和N蛋白为抗原的检测TGEV与PRCV抗体的间接ELISA方法。主要研究内容如下:1TGEV重...
- 尹杰文心田曹三杰黄小波
- 文献传递
- 猪传染性胃肠炎病毒S基因B、C位点的克隆与表达及间接ELISA方法的建立被引量:2
- 2015年
- 针对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因B、C抗原位点编码基因片段(SBC,下同)设计合成1对引物,用PCR方法扩增SBC基因,将该基因片段定向插入到原核表达载体p ET-32a(+)中,构建原核表达载体p ET-32a-SBC。阳性质粒转化宿主菌BL21(DE3),在IPTG的诱导下表达大小约38 k D的蛋白,重组蛋白以包涵体的形式存在。Western blot分析表明,表达产物具有良好的免疫学活性。以纯化的表达产物作为诊断抗原建立了检测TGEV抗体的间接ELISA(TGEV SBC-ELISA)方法。表明建立的间接ELISA方法特异性和重复性良好,敏感性比血清中和试验高,可用于TGEV的检疫和流行病学调查。
- 尹杰杨恒曹三杰黄小波文心田李洁萍余正强周军
- 关键词:猪传染性胃肠炎病毒
- 猪传染性胃肠炎病毒重组N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量:1
- 2009年
- 以纯化的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)重组N蛋白免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,通过间接ELISA法对融合细胞进行筛选,采用有限稀释法对阳性细胞进行4次亚克隆,获得了3株能稳定分泌N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为JY(4)-1、JY(4)-2、JY(4)-3。分别采用体外培养法、诱导腹水法和实体瘤法制备单克隆抗体,并用间接ELISA法检测其效价,结果显示,这3株杂交瘤细胞的细胞培养上清、小鼠腹水和血清的单抗效价均分别为1∶512、1∶105、1∶105,其中以诱导腹水法制备的单抗产量和效价最佳。间接免疫荧光试验结果显示,这3株单抗均能与TGEV感染的ST细胞产生特异性免疫荧光,而不与猪细小病毒、猪生殖与呼吸综合征病毒、猪轮状病毒等发生交叉反应;经鉴定,3株单抗的亚类均为IgG2a,这3株杂交瘤细胞具有良好的遗传稳定性。
- 黄小波李娜文心田曹三杰余慧杨恒秦学远尹杰
- 关键词:猪传染性胃肠炎病毒重组N蛋白单克隆抗体杂交瘤