曹三杰
- 作品数：467 被引量：819H指数：13
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划公益性行业(农业)科研专项四川省重点科技攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 大熊猫源杯梗孢属真菌(Cyphellophora pluriseptata)的分离鉴定与致病性研究
- 2018年
- 为探究大熊猫真菌性皮肤病的病因,取发生肉芽肿大熊猫患部的皮屑、被毛进行真菌学检查和病原分离。采用沙氏培养法对采集的皮屑和毛发样品进行分离纯化,对分离株进行形态学、分子生物学鉴定和小鼠致病性试验及药敏试验。结果显示,从样品中分离到一株真菌(JYZ030101)。对分离株JYZ030101的ITS区进行PCR扩增获得长度为617 bp片段,经Blast比对结果显示该序列与杯梗孢属真菌Cyphellophora pluriseptata的相似性为99%。结合形态学和分子生物学方法将分离菌鉴定为C.pluriseptata。动物致病性试验显示该菌对小鼠有选择性致病作用。药敏试验显示该菌对特比萘芬、两性霉素B、伊曲康唑和氟胞嘧啶耐药,对氟康唑、伏立康唑敏感。本研究为诊断和治疗C.pluriseptata引起的大熊猫真菌性皮肤病提供重要参考。
- 马晓平姜尧章张和民古玉曹三杰王承东左之才李德生凌珊珊夏介英王平峰
- 关键词：形态学ITS序列药敏试验
- 三聚氰胺对小鼠的致突变及致畸作用被引量：2
- 2012年
- 选用昆明种小白鼠为研究对象,进行了三聚氰胺微核试验、精子畸形试验及致畸胎试验,以评价其致突变及致畸作用。结果显示,三聚氰胺在295.87～1 479.35mg/kg剂量范围内,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率及PCE/NCE比值与阴性对照组无差异性(P>0.05);三聚氰胺中剂量组(591.74mg/kg)和高剂量组(1 479.35mg/kg)小鼠精子畸形率显著高于阴性对照组(P<0.05),精子畸形类型以折尾为主;三聚氰胺在19.72～98.62mg/kg剂量范围内,对孕鼠的生殖机能以及胎鼠的生长发育、外观、骨骼和内脏畸形无影响。结果表明,在本试验设计的剂量范围内,三聚氰胺无骨髓细胞毒性及致突变作用,对小鼠无胚胎毒性及致畸作用,但有精子致畸作用。
- 林居纯鄢荣梅曹三杰何丽霞黄玲文心田
- 关键词：三聚氰胺微核试验精子畸形试验致畸试验
- 检测猪流行性乙型脑炎病毒和/或猪繁殖与呼吸综合征病毒的可视化基因芯片以及试剂盒
- 本发明公开了一种检测猪流行性乙型脑炎病毒和/或猪繁殖与呼吸综合征病毒的可视化基因芯片和试剂盒。本发明特定方法制备的可视化基因芯片，可以用肉眼直观地看到检测结果，不需要价格昂贵的激光共聚扫描仪，成本低廉，同时，灵敏度较高，...
- 文心田黄小波张仙曹三杰文翼平伍锐常晓霞马锐杨国淋
- 文献传递
- 猪轮状病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：14
- 2009年
- 用差速离心法纯化的猪轮状病毒(RV)分别免疫仔猪和兔,制备了猪抗RV和兔抗RV超免疫血清,并用层析方法进行了纯化,建立了检测RV的双抗体夹心ELISA方法。结果表明,该双抗体夹心ELISA的最佳反应条件为:猪抗RV IgG包被浓度为4μg/mL,兔抗RV IgG最佳工作浓度为3.5μg/mL,样品反应时间为90 min,酶标抗体工作浓度为1∶8 000,以D450 nm≥0.161作为阳性判定标准。该ELISA的重复性变异系数小于10%,最低检测限为1.25μg/mL,并与猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪大肠杆菌和沙门菌等病原无交叉反应,该ELISA试剂在室温和4℃条件下至少可保存4个月。用该ELISA方法和RV金标检测卡检测70份临床粪便样品,结果显示,ELISA的阳性检出率为22.9%,而金标检测卡的阳性检出率为20.0%。表明,建立的双抗体夹心ELISA方法具有特异性好、灵敏性高和重复性好等优点,可用于RV的快速检测。
- 黄小波徐璐曹三杰文心田曾燕余慧
- 关键词：猪轮状病毒双抗体夹心酶联免疫吸附试验
- 鸡传染性支气管炎病毒M蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：5
- 2013年
- 目的制备鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)M蛋白单克隆抗体,并进行鉴定。方法利用IBV Sczy3株免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA法筛选杂交瘤细胞,强阳性孔经有限稀释法亚克隆,制备抗IBV M蛋白单克隆抗体。对制备的单抗进行单抗亚型、腹水ELISA效价、特异性、交叉反应性鉴定及Western blot分析。结果获得2株能稳定分泌抗IBV M蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为2C10和7H6,单抗亚型分别为IgM和IgG1;腹水ELISA效价分别为1∶25 600和1∶12 800;2株单抗均只与IBV发生特异性反应,而与新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)、禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)H9亚型、AIV H5抗原和鸡传染性法氏囊病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)均不反应;2株单抗与5种基因型的其他10株IBV均有良好的反应性。结论制备出2株针对IBV M蛋白的单抗,为今后更深入地研究该蛋白的分子生物学功能、抗原表位的鉴定及抗原捕获ELISA方法的建立等提供了有力的工具。
- 王富妍任雅邹年莉郭明萍吴瑞婷付润饶文心田曹三杰黄勇
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒M蛋白单克隆抗体酶联免疫吸附测定
- 鹅副黏病毒和鹅细小病毒复合PCR检测方法的建立被引量：1
- 2011年
- 鹅副黏病毒病（goose paramyxovirosis,GPMVS）和小鹅瘟（或称鹅细小病毒感染,goose parvovirus infection,GP）分别是由禽副黏病毒Ⅰ型病毒（Avian paramyxovirus-1,APM-1）和鹅细小病毒（Goose parvo-virus,GPV）引起的鹅的两大烈性传染病,是现代集约化养鹅业的主要疫病。GPMVS和GP的流行病学、临床症状和病理变化比较相似,在临床病例上,既有单一的GPMV或GPV感染,也有GPMV与GPV二重感染。
- 鲜思美文心田曹三杰黄小波
- 关键词：鹅副黏病毒病鹅细小病毒细小病毒感染GOOSE
- 鲤疱疹病毒2型ORF5截短基因的克隆表达及免疫原性研究被引量：8
- 2016年
- 根据G en Bank上已登录的鲤疱疹病毒2型的O RF5基因序列(登录号:AFJ20457.1)设计1对引物,采用PCR扩增技术获得目的基因。序列分析表明,目的基因长357 bp,是一个完整的开放阅读框,编码119个氨基酸,理论分子质量为13 059.70 u,无信号肽,无跨膜区,含有4个抗原表位。将扩增片段克隆至原核表达载体p ET-32a中,并将获得的重组质粒转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达。对表达蛋白进行复性纯化后免疫小鼠和异育银鲫,SD S-PAGE和W estern-blot检测分析表明,重组蛋白的分子质量约为33 ku,与预期相符,表达形式为包涵体,该蛋白能够与抗H is标签的抗体发生特异性反应,也能识别病毒粒子上的ORF5蛋白。对免疫的异育银鲫进行攻毒,结果显示注射生理盐水组的银鲫保护率为0,注射15、25、50 g重组蛋白组的保护率分别为20%、30%、35%,表明免疫重组蛋白组的保护率高于对照组。本研究证实了表达的融合蛋白具有一定的免疫原性,丰富了鲤疱疹病毒2型ORF5基因及基因组的研究,为研发制备新型鲤疱疹病毒2型的疫苗和诊断试剂盒奠定了基础。
- 廖红林华郝中香佘容陈世界杨苗陈珍容薛昌华赵珊韩国全曹三杰颜其贵
- 关键词：克隆表达攻毒保护试验
- 兔大肠杆菌性腹泻的诊治被引量：3
- 2010年
- 1发病情况四川眉山某养兔场,饲养兔700余只,2008年11月份以来兔场发生了严重的腹泻病,主要发生在5~7周龄幼兔,表现为腹胀和剧烈腹泻。
- 黄小波刘伍梅曹三杰文心田
- 关键词：大肠杆菌性养兔场兔大肠杆菌病大肠杆菌感染兔瘟
- Dot-PAA-ELISA快速检测猪丹毒抗体方法的建立与应用被引量：9
- 2005年
- 以猪丹毒CD30 0 4 (1a型 )和C4 3_12 (2型 )菌株为抗原提取菌株 ,EDTA渗透法提取的抗原作为膜载抗原 ,建立了Dot_PAA_ELISA检测猪丹毒血清抗体方法 ,经研究确定了Dot_PAA_ELISA的最佳工作条件。试验制备的诊断膜片特异性强 ,不与猪瘟、猪伪狂犬病、猪肺疫、猪链球菌病、猪大肠杆菌病、仔猪副伤寒、猪布氏杆菌病、猪衣原体病的阳性血清发生交叉反应 ;灵敏度高 ,能够最低检出猪血清中含 2 6 1× 10 -9g的猪IgG抗体 ;膜片保存期长 ,在室温可保存 4个月 ,4℃可保存 7个月其检测活性不变。用该方法检测了仔猪免疫后抗体变化 ,并通过猪丹毒三型混合强毒攻毒试验确定了猪能抗强毒攻击的抗体临界保护值为 1∶32。对 336份血清进行猪丹毒抗体检测 ,阳性检出率为 96 13%。试验结果表明 ,本试验方法操作简便、快速准确、结果可存档、重复性和稳定性好 ,所用试剂材料均可做到标准化 。
- 肖国生曹三杰文心田
- 关键词：猪丹毒抗体检测
- 三聚氰胺对小白鼠内脏器官及其细胞凋亡的影响被引量：4
- 2012年
- 为研究三聚氰胺急性中毒对小白鼠内脏器官的损害及对细胞凋亡的影响,将18～22g昆明种小白鼠40只随机分为4组,分别经口灌喂蒸馏水和不同剂量的三聚氰胺(370、739和1 479mg/kg)。染毒后第36小时处死小白鼠,观察肺等内脏器官的病理变化;用流式细胞术检测三聚氰胺对肺、肝、脾和肾组织细胞凋亡的影响。病理学观察显示,三聚氰胺各剂量组小白鼠肺充血,肺泡腔有少量红细胞和炎性细胞浸润。1 479、739mg/kg组小白鼠脾、肝轻度淤血,肾小管上皮细胞肿胀和蛋白管型。流式细胞仪检测结果显示,三聚氰胺各剂量组肾和肺的细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05),而各剂量组肝和脾的细胞凋亡率与对照组无显著差异(P>0.05)。证实,三聚氰胺急性中毒会造成小白鼠肾、肺、肝和脾损害并诱导肾和肺细胞的凋亡。
- 林居纯鄢荣梅曹三杰何丽霞魏峰黄玲文心田
- 关键词：三聚氰胺小白鼠内脏器官毒性细胞凋亡
