张淑琴
- 作品数：95 被引量：257H指数：10
- 供职机构：中国农业科学院特产研究所更多>>
- 发文基金：农业公益性行业专项“牛羊重大疫病防控技术研究与产业化”国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生经济管理更多>>
- 牛病毒性腹泻弱毒活疫苗安全性和免疫保护效果的研究
- 将本实验室保存的致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)驯化培养,接种MDBK细胞,优化病毒增殖条件,获得病毒滴度达10～(7.5)TCID/mL。并将其免疫牛,评价其安全性及免疫保护效果。结果显示1月龄牛接种该弱毒株后...
- 张淑琴郭利张亭亭吴永旺武华
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒弱毒活疫苗安全性免疫
- 文献传递
- 犬源干扰素刺激基因ISG15和IFIT2荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：1
- 2020年
- 干扰素刺激基因在抗病毒及调节IFN信号通路的过程中具有重要作用。本课题组前期对犬瘟热病毒(CDV)感染宿主前后全转录组进行测序分析,发现干扰素刺激基因ISG15和IFIT2明显上调,为了进一步探究ISG15和IFIT2对CDV感染的影响,本研究设计合成了犬源ISG15、IFIT2和持家基因GAPDH的特异性引物,分别进行PCR扩增,构建质粒标准品,建立荧光定量PCR检测方法,并对该方法的特异性、灵敏性和重复性进行检验。结果表明,犬源ISG15、IFIT2和GAPDH的荧光定量PCR标准曲线的相关性R^2均大于0.98,表明线性关系良好。ISG15、IFIT2和GAPDH的融解曲线均为单峰,扩增产物单一,且峰值一致,表明建立的荧光定量PCR方法特异性良好。组内与组间的变异系数均小于0.2%,表明该方法重复性较好。对CDV感染宿主细胞前后的ISG15和IFIT2 mRNA表达水平进行检测,发现CDV感染后ISG15和IFIT2的表达量升高,表明ISG15和IFIT2在CDV感染过程中发挥重要作用。该结果为针对CDV与干扰素抗病毒研究的开展提供重要的技术手段,并为进一步揭示CDV致病的分子机制奠定基础。
- 王改丽程悦宁张淑琴王建科王超孙娜易立程世鹏
- 关键词：犬瘟热病毒ISG15荧光定量PCR
- 马传染性贫血病毒受体选择剪接变异体的鉴定及功能性研究
- 病毒特异性的细胞受体是病毒入侵细胞的门户，决定病毒的宿主范围、组织及细胞嗜性。从受体角度阐明病毒入侵机制，是病毒性疾病的药物研发及疫苗研制的重要方面。选择性剪接可使同一基因编码出功能不同蛋白，选择性剪接对满足生物体复杂性...
- 张淑琴
- 关键词：病毒特异性宿主范围传染性贫血病毒
- 文献传递
- 马传染性贫血病毒受体选择性剪接异构体
- 杨非林跃智张淑琴汤艳东李利吕晓玲周建华
- 关键词：马传染性贫血病毒受体剪接异构体
- 马传染性贫血病毒受体基因的原核表达被引量：1
- 2008年
- 为了构建马传染性贫血病毒受体(ELR1)的原核表达体系,克隆ELR1的编码区基因,将其亚克隆到PET-30a构建重组表达质粒PET-30a-ELR1,经酶切和DNA测序鉴定,将阳性质粒转化E.coliBL21感受态细胞,IPTG诱导,表达产物经SDS-PAGE电泳及Westhern-blot分析鉴定,结果表明:该基因在大肠杆菌中以包涵体形式表达,其表观分子质量约为39.6ku;利用尿素洗涤纯化可以得到具有较高纯度的表达蛋白,是一种理想的免疫原。
- 张淑琴罗军荣刘霄卉杨旭艳马学恩周建华
- 关键词：EIAV原核表达
- 吉林省牛病毒性腹泻病毒流行病学调查分析被引量：11
- 2019年
- 为了解吉林省牛病毒性腹泻的流行情况,试验采用纳米PCR检测技术和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗体ELISA检测试剂盒对吉林省部分省界地区BVDV进行病原和血清抗体流行病学调查。对BVDV 5′-UTR扩增,对扩增出的部分序列进行测序,构建系统遗传进化树。结果表明:在635份血清样品中,ELISA检测抗体阳性397份,阳性率为62.52%。对血清样品及临床组织病料采用纳米PCR方法进行检测,共检测出150份阳性样品(其中血清122份、临床组织病料28份),BVDV阳性率为19.21%。在辽宁省省界地区(四平市、梨树县、东丰县、梅河口市)的BVDV血清抗体阳性率较高,吉林市、丰满区较低。吉林省北部的宁江区、扶余市、榆树市及南部地区的东丰县、柳河县的BVDV抗原阳性率高于东部延边州地区(敦化市、延吉市)及西部地区(白城市),中部地区(吉林市、丰满区)的BVDV抗原阳性率较高。对10份阳性样品的PCR产物进行测序分析,结果牛群中流行毒株均为BVDV 1型,与BVDV JL-1株同源性最高,为吉林省主要流行强毒株。说明吉林省检测地区都存在不同程度的BVDV感染情况。
- 刘泽余李健友刘占悝王楠张淑琴王超郭利张加力
- 关键词：牛病毒性腹泻流行病学调查血清学ELISA测序分析
- 牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：3
- 2011年
- 根据GenBank中登录的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因序列,设计合成了1对特异性引物,建立了检测BVDV的RT-PCR方法。通过对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验,结果显示,该方法可从BVDV标准毒株Oregon C24V中扩增出471 bp的特异性片段,而对猪瘟病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛呼吸道合胞体病毒、牛副流感病毒、MDBK正常细胞的扩增结果均为阴性。经对标准毒株的细胞毒进行检测,其敏感度达10-1TCID50/mL。应用该方法对临床腹泻病牛各脏器样品进行检测,结果比病毒分离方法更为敏感,操作简便。表明建立的RT-PCR方法具有特异、灵敏、高效、快速的特点,可用于BVDV的临床检测及流行病学监测。
- 张淑琴郭利张亭亭吴永旺武华
- 关键词：牛病毒性腹泻病毒反转录聚合酶链反应
- 基因2型牛病毒性腹泻病毒河南株分离鉴定及全基因序列分析被引量：2
- 2023年
- 河南某地区牛场部分牛出现呼吸道症状,伴随有怀孕母牛的流产,本研究使用细胞培养的方法于病死牛脾脏中分离得到1株BVDV病毒,命名为BVDV-HEN01。该病毒在MDBK细胞上生长,未发生固缩、拉网等病变,可确定该毒株为1株非致细胞病变毒株;下载若干条BVDV全基因序列,经MegaAlign软件比对在同源性较高的区域设计全基因组扩增引物10对,经鉴定该毒株为BVDV-2型毒株,并扩增出该毒株的全基因组;直接免疫荧光法测得病毒TCID_(50)为10^(-4.1)/0.1 mL。使用电镜观察病毒颗粒,颗粒的直径为50 nm左右。对分离株进行同源性分析并绘制系统进化树,发现HEN01株与我国SD1301株进化关系密切。本实验所分离的毒株为1株新的BVDV-2b亚型毒株,全基因组序列测定的完成对于反向遗传工程与疫苗的研发有重大意义。
- 王倩颖王廷龙刘可欣刘俊峰胡建军程世鹏张淑琴
- 关键词：直接免疫荧光法电镜观察
- 绵羊肺腺瘤病毒内蒙株人工感染病例的病理学观察
- 用含绵羊肺腺瘤病毒内蒙株(JSRV-NM 株)的肺肿瘤无细胞滤液0．3 mL 气管内接种1日龄绵羊羔羊7只,经18个多月的系统观察,对尚存的4只人工感染绵羊进行临床症状检查、实验室检查、病理剖检、病理组织学以及超微病理学...
- 么宏强马学恩于立新张淑琴郑秉武
- 关键词：绵羊肺腺瘤病毒病理学观察感染病例
- 文献传递
- 绵羊肺腺瘤病毒人工感染羔羊后淋巴细胞的变化
- 为深入探讨绵羊肺腺瘤病T淋巴细胞及其亚群的变化与疾病发生与发展的相互关系,本实验以绵羊肺腺瘤病毒NM株人工感染1日龄羔羊,在不同的感染期,以流式细胞仪分析外周血中淋巴细胞以及T淋巴细胞亚群的动态变化。结果表明,感染羊外周...
- 么宏强马学恩于立新张淑琴郑秉武
- 关键词：绵羊肺腺瘤病T淋巴细胞亚群流式细胞仪
- 文献传递
