李波
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 水稻白叶枯病菌c-di-GMP受体Clpxoo关键结合功能位点的确定
- 2016年
- 旨在确定水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)c-di-GMP信号受体Clpxoo的关键功能位点。通过对Clpxoo蛋白氨基酸位点基因突变,表达载体构建、蛋白诱导表达及其Ni-NTA Resin亲和层析,进行了Clpxoo及其点突变蛋白的原核表达和产物纯化;通过等温滴定量热法(ITC),检测了Clpxoo及其点突变蛋白与c-di-GMP的结合作用。利用基因定点突变和桥接PCR方法,在优化的诱导表达和纯化条件下,成功地获得了Clpxoo点突变蛋白和与c-di-GMP不发生结合的Clpxoo点突变体。结果表明,Clpxoo蛋白第70位天冬氨酸和第99位谷氨酸是与c-di-GMP结合的关键功能位点。
- 李建宇李波陈华民杨凤环何晨阳田芳
- 关键词：水稻白叶枯病菌C-DI-GMP
- 用于检测水稻白叶枯病菌的引物、方法以及试剂盒
- 本发明提供一种用于检测水稻白叶枯病菌菌株的引物、方法以及试剂盒，该引物的上游引物核苷酸序列为SEQ ID NO：4，下游引物核苷酸序列为SEQ ID NO：3。该方法包括以下步骤：(1)挑取待测菌株菌落或提取待测菌株基因...
- 何晨阳陈华民吴茂森李波
- 文献传递
- 用于检测水稻白叶枯病菌的引物、方法以及试剂盒
- 本发明提供一种用于检测水稻白叶枯病菌菌株的引物、方法以及试剂盒，该引物的上游引物核苷酸序列为SEQ ID NO：4，下游引物核苷酸序列为SEQ ID NO：3。该方法包括以下步骤：(1)挑取待测菌株菌落或提取待测菌株基因...
- 何晨阳陈华民吴茂森李波
- c-di-GMP抑制转录调控因子Clpxoo与葡聚糖酶基因启动子的结合被引量：6
- 2013年
- 【目的】阐明水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)c-di-GMP信号受体和转录调控因子Clpxoo对葡聚糖酶基因(engAxoo)的转录调控作用机制。【方法】通过基因表达载体的构建和转化、蛋白诱导表达及其Ni-NTA Resin亲和层析,进行了clpxoo基因的原核表达和产物纯化。通过荧光素(FAM)探针标记和凝胶阻滞试验(EMSA)对Clpxoo纯化蛋白与葡聚糖酶基因启动子(engAxoo-p)的结合活性及其c-diGMP信号分子的抑制作用进行了测定分析。【结果】在优化的诱导表达和纯化条件下,成功地获得了Clpxoo纯化蛋白。Clpxoo可与engAxoo-p序列发生阻滞现象,表明它具有与启动子特异性结合的活性。在反应体系中加入c-di-GMP可导致结合作用的消除。【结论】Clpxoo接受c-di-GMP信号后,可能通过构象的改变,从而与engAxoo-p的结合活性受到抑制;优化的Clpxoo蛋白纯化和EMSA方法可以用于后续的调控元大规模鉴定的研究。
- 李波田芳陈华民吴茂森何晨阳
- 关键词：水稻白叶枯病菌C-DI-GMP启动子
