孙运
- 作品数：8 被引量：10H指数：3
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- 猪圆环病毒2型对仔猪淋巴细胞内cAMP和cGMP的影响
- 2011年
- 为探讨猪圆环病毒2型(PCV2)作用下淋巴细胞的免疫活性,本研究通过体外培养仔猪脾脏淋巴细胞及巨噬细胞(Mφ),分别以PCV2和PCV2+Mφ与淋巴细胞相互作用,同时设Mφ和空白对照组。培养0h、6h、12h、24h后收取各组淋巴细胞,放射免疫法检测胞内cAMP和cGMP浓度。另外,选取15头PCV2阴性仔猪,每头滴鼻PCV2病毒悬液,分别于14d、21d、35d迫杀,每次5头,并设立阴性对照组4头。放射免疫法检测脾脏cAMP和cGMP浓度,并计算cAMP/cGMP比值。体外检测结果显示:PCV2对体外培养淋巴细胞内cAMP和cGMP浓度影响不大;而在Mφ存在时PCV2在6h时能显著降低cAMP和cGMP浓度和cAMP/cGMP比例(p<0.05);12h时cGMP浓度下降(p<0.05),cAMP和cGMP比例上升(p<0.05);24h时cGMP浓度上升(p<0.05),但cAMP/cGMP比例降低(p<0.05)。体内检测结果表明,PCV2能显著降低仔猪脾脏细胞内cAMP浓度(p<0.05)及cAMP/cGMP比值(p<0.05)。该研究结果表明,在巨噬细胞存在时PCV2能够降低淋巴细胞内cAMP/cGMP的比值,从而影响淋巴细胞的功能。
- 华利忠张书霞陈耿孙运代蕾吕春子
- 关键词：猪圆环病毒2型免疫抑制淋巴细胞CAMP/CGMP
- Fas/FasL系统在PCV2感染仔猪脾脏淋巴细胞凋亡中的作用
- 病毒如人体免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus)、猫免疫缺陷病毒(felineimmunodeficiency virus FIV)等都能通过Fas/FasL系统诱导宿主淋巴细胞的凋亡,...
- 华利忠陈耿孙运张书霞
- 关键词：淋巴细胞凋亡FAS/FASL
- 文献传递
- PCV2感染仔猪急性期蛋白的变化被引量：4
- 2010年
- 【目的】探讨实验性感染PCV2仔猪血清中急性期蛋白浓度和肝脏急性期蛋白表达的变化,为PCV2的致病机制和诊断提供有价值的资料。【方法】19头ELISA检测PCV2抗体阴性的5周龄健康断奶仔猪,随机分为对照组和攻毒组,在攻毒后不同时间采集血液和肝脏。用ELISA方法检测血清中APPs的动态变化,荧光定量RT-PCR测定肝脏中APPsmRNA表达,同时观察肝脏的组织病理学变化。【结果】仔猪接种PCV2后,肝脏出现实质细胞变性,结缔组织增生和嗜酸性粒细胞浸润为特征的病理学损伤;血清中,猪主要急性期蛋白(Pig-MAP)在攻毒后7d达到峰值,在7和10d显著高于对照组(P<0.05);血清淀粉样蛋白A(SAA)在攻毒后7d和21d显著高于对照组(P<0.05);血清载脂蛋白AⅠ(Apo-AⅠ)攻毒后21d显著高于对照组(P<0.05),其余时间差异均不显著;PCV2感染后21d仔猪肝脏中结合珠蛋白(HP)、C-反应蛋白(CRP)、α1-酸性糖蛋白(AGP)和SAAmRNA的表达呈现升高的趋势。【结论】PCV2感染可引起仔猪肝脏出现以实质细胞变性坏死和结缔组织增生为特征的病理学变化,血清APPs浓度和肝脏APPsmRNA表达呈现不同的变化,其中Pig-MAP可以作为病程发展的重要检测指标,对监测PCV2感染、疾病的预后起重要作用。
- 孙运华利忠陈耿张书霞
- 关键词：仔猪肝脏急性期蛋白
- PCV2感染仔猪急性期蛋白的变化
- 本文通过仔猪试验性感染PCV2，动态测定血清中急性期蛋白浓度和肝脏急性期蛋白表达的变化，并观察了调控这些蛋白的2条主要通路：IL-1R-NF-kB和IL-6R-NF-kB的变化，为PCV2相关疾病的发生机理和临床诊断提供...
- 孙运
- 关键词：PCV2急性期蛋白浓度调控通路
- PCV2感染仔猪急性期蛋白表达的变化
- 19头ELISA检测PCV2,PRRSV抗体阴性的5周龄健康断奶仔猪，随机分为对照组4头和攻毒组15头;攻毒前宰杀对照组、攻毒后第14天、21天和35天分别随机宰杀5头仔猪，取肝脏组织液氮速冻后-70℃保存。本文用荧光定...
- 孙运华利忠陈耿张书霞
- 关键词：蛋白表达荧光定量抗体阴性断奶仔猪
- 文献传递
- PCV2感染仔猪急性期蛋白表达的变化
- 19头ELISA检测PCV2、PRRSV抗体阴性的5周龄健康断奶仔猪,随机分为对照组4头和攻毒组15头;攻毒前宰杀对照组、攻毒后第14天、21天和35天分别随机宰杀5头仔猪,取肝脏组织液氮速冻后-70℃保存。用荧光定量R...
- 孙运华利忠陈耿张书霞
- 关键词：急性期蛋白
- PCV2感染对仔猪肝脏MyD88-NF-κB信号途径的影响被引量：3
- 2013年
- 选取31头经检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原和抗体均为阴性的5周龄断奶仔猪,随机分为对照组16头和试验组15头,对照组仔猪每头滴鼻4 mL PBS,试验组仔猪每头滴鼻4 mL 5×105TCID50.mL-1PCV2悬液。于PCV2接种当天剖杀4头仔猪作为对照组,分别于14、21和35 d剖杀4头对照组和5头试验组仔猪,采集肝脏。用激光共聚焦显微镜检测核因子κB/P65(NF-κB/P65)蛋白的核易位变化;蛋白提取法分别提取肝脏细胞核蛋白和胞浆蛋白,Western blot定量检测细胞核中NF-κB/P65和细胞浆中p-IκBα、MyD88蛋白含量的变化;电泳迁移率(EMSA)法检测细胞核中NF-κB DNA的结合率变化。检测结果显示,PCV2接种仔猪,肝脏中NF-κB/P65蛋白核易位逐渐增多,到21 d达到峰值;p-IκBα、MyD88、NF-κB/P65 DNA结合率在接种后均先升高后趋于恢复,并于21 d达到高峰。与对照组仔猪相比,肝脏中MyD88和NF-κB/P65蛋白含量以及NF-κB DNA结合率在14和21 d试验组均显著升高(P<0.05),35 d含量变化不显著;21 d时试验组p-IκBα蛋白含量显著升高。相关性分析显示,NF-κB/P65蛋白含量与MyD88含量、NF-κB DNA结合率之间存在显著正相关,相关系数分别是0.566和0.528。结果表明,PCV2可通过激活MyD88启动NF-κB信号途径;通过IκBα的磷酸化降解激活NF-κB,并促进其进行核易位,使NF-κB与DNA发生结合,调控相关炎性细胞因子的转录和表达。
- 张秀娟孙运郭华张书霞
- 关键词：仔猪
- PCV2感染通过胞内Ca^(2+)超载诱导仔猪腹股沟淋巴结及脾脏淋巴细胞凋亡被引量：3
- 2012年
- 为探讨猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)感染仔猪的淋巴结和脾脏淋巴细胞内钙信号变化在细胞凋亡中的作用,选取19头PCV2抗原和抗体均为阴性的5周龄健康断奶仔猪,随机分成对照组(4头)和试验组(15头),试验组仔猪通过滴鼻接种PCV2,并于接种后14、21和35 d分别扑杀5头,对照组仔猪滴鼻同量PBS后当天扑杀。所有仔猪扑杀时均取腹股沟淋巴结及脾脏,流式细胞术检测细胞凋亡率,荧光分光光度法检测细胞内Ca2+浓度,孔雀绿比色测定法检测Ca2+-ATP酶的活性,荧光定量RT-PCR检测钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)mRNA转录水平。结果表明:所有接种病毒仔猪腹股沟淋巴结及脾脏细胞凋亡率均极显著高于对照组(P<0.01),Ca2+浓度均极显著高于对照组(P<0.01);接种病毒仔猪腹股沟淋巴结Ca2+-ATP酶活性在21 d时显著下降(P<0.05),脾脏中Ca2+-ATP酶活性在21 d和35 d时显著下降(P<0.05);腹股沟淋巴结CaMKⅡmRNA转录在整个试验过程中无明显变化,但脾脏中CaMKⅡmRNA在PCV2接种后21 d和35 d比对照组显著上调(P<0.05)。结论:细胞内Ca2+超载是PCV2感染引起仔猪淋巴结及脾脏淋巴细胞凋亡的重要机制。
- 华利忠张书霞孙运代蕾陈耿吕春子
- 关键词：淋巴细胞胞内钙离子仔猪
