李亚利
- 作品数:5 被引量:45H指数:3
- 供职机构:西北农林科技大学园艺学院更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划西安市科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 黄瓜SRAP-PCR反应体系的建立被引量:15
- 2008年
- 为了建立黄瓜适宜的SRAP(相关序列多态性)反应体系,以长形白皮少刺黄瓜B-2-2和圆形白皮黄瓜Y-3为材料,分析了不同来源的Taq酶及其浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度、DNA模板浓度、引物浓度对扩增结果的影响,并比较了琼脂糖凝胶和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测扩增产物多态性的差异。结果表明,在12.5μL反应体系中,Taq酶适用Takara酶,其最适用量为0.5U;DNA模板最适浓度为30 ng,Mg2+最适浓度为2.0 mmol/L,引物最适浓度为0.96μmol/L,dNTP最适浓度为200μmol/L。6%的变性聚丙烯酰胺电泳检测扩增产物效果比琼脂糖检测效果好。用不同黄瓜材料的基因组DNA两次SRAP-PCR扩增,6对引物均能扩增出清晰且重复性好的谱带。因而建立的黄瓜SRAP反应体系稳定可靠。
- 柴丹丹陈书霞孟焕文程智慧李亚利
- 关键词:黄瓜SRAP琼脂糖凝胶聚丙烯酰胺凝胶
- 利用正交设计优化黄瓜的SSR-PCR反应体系被引量:22
- 2008年
- 以白皮黄瓜B-2-2为试材,采用正交设计L16(45)在4个水平上对影响黄瓜SSR-PCR反应体系的Taq酶浓度、Mg^2+含量、模板DNA用量、dNTP浓度及引物用量等5个因素进行了试验优化,并用单因素完全随机试验筛选各反应因素的最佳水平,建立了黄瓜SSR-PCR反应的最佳体系。结果表明:在20μL反应体系中,Taq酶最适浓度为0.5U,Mg^2+最适浓度为2.0 mmol/L,模板DNA最适用量为5 ng/μL,dNTP最适用量为0.2 mmol/L,引物最适浓度为0.6μmol/L;引物最佳退火温度为50.0℃。利用20个黄瓜材料验证此反应体系,6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果显示,扩增产物在100-300 bp之间多态性高,且反应体系的稳定性和重复性好。
- 李亚利陈书霞孟焕文程智慧柴丹丹
- 关键词:白黄瓜SSR-PCR
- 与黄瓜果皮绿色性状相关的SRAP分子标记
- 运用SRAP分子标记技术,以绿皮黄瓜WD3和白皮黄瓜B-2-2为试验材料,采用集群分析法(BSA)进行与黄瓜果皮绿色基因连锁的分子标记的研究。找到了与绿色基因相连锁的一个显性SRAP标记ME9EM1-369,这个标记与绿...
- 李亚利陈书霞孟焕文程智慧柴丹丹
- 关键词:白皮黄瓜SRAP标记
- 文献传递
- 与黄瓜果皮绿色性状相关的SRAP分子标记
- 本研究以黄瓜WD3×B-2-2构建了F2杂交群体,采用BSA(Bulked Segregant Analysis)法结合SRAP(Sequence-related Amplifled Polymorphism,SRAP,...
- 李亚利
- 关键词:性状相关分子标记技术白皮凝胶电泳检测扩增多态性
- 文献传递
- 与黄瓜果皮绿色性状相关的SRAP分子标记
- 运用SRAP分子标记技术,以绿皮黄瓜WD3和白皮黄瓜B-2-2为试验材料,采用集群分析法(BSA)进行与黄瓜果皮绿色基因连锁的分子标记的研究。找到了与绿色基因相连锁的一个显性SRAP标记ME9EM1-369,这个标记与绿...
- 李亚利陈书霞孟焕文程智慧柴丹丹
- 关键词:黄瓜SRAP标记分子标记
- 文献传递