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吴正中

作品数:3 被引量:7H指数:2
供职机构:蚌埠医学院更多>>
发文基金:安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省蚌埠市科技计划项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 3篇医药卫生

主题

  • 2篇狼疮
  • 2篇PRISTA...
  • 1篇蛋白
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光蛋白
  • 1篇再生障碍性贫...
  • 1篇障碍性贫血
  • 1篇人脐
  • 1篇人脐带
  • 1篇人脐带间充质...
  • 1篇贫血
  • 1篇脐带间充质干...
  • 1篇重组慢病毒
  • 1篇转染
  • 1篇系统性红斑
  • 1篇系统性红斑狼...
  • 1篇小鼠
  • 1篇绿色荧光
  • 1篇绿色荧光蛋白
  • 1篇慢病毒

机构

  • 3篇蚌埠医学院
  • 1篇扬州市妇幼保...

作者

  • 3篇吴正中
  • 2篇李见
  • 2篇吴俊英
  • 2篇王芳
  • 1篇李玉云
  • 1篇王露
  • 1篇张强
  • 1篇翟玮玮
  • 1篇江金群
  • 1篇张弛
  • 1篇张坡

传媒

  • 1篇蚌埠医学院学...
  • 1篇华中科技大学...
  • 1篇现代免疫学

年份

  • 1篇2014
  • 2篇2013
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
Pristane诱导BALB/c小鼠系统性红斑狼疮模型的建立被引量:6
2013年
目的:建立Pristane诱导的BALB/c小鼠系统性红斑狼疮(SLE)模型。方法:雌性BALB/c小鼠随机分成2组,模型组单次腹腔注射0.5 ml Pristane,对照组注射等量的0.9%氯化钠注射液,注射前及注射后每月ELISA法检测血清抗dsDNA抗体和抗Sm/RNP抗体含量,Albustix试纸法检测尿蛋白含量,每月定期观察小鼠症状和体征。6个月后处死全部小鼠后解剖,肉眼观察腹腔脏器组织病变,并取病变组织及肾脏做病理学检查,观察其组织病理变化(HE染色法)及肾脏免疫复合物(IC)沉积情况(直接荧光染色法)。结果:模型组小鼠造模2个月后,血清抗Sm/RNP抗体和抗dsDNA抗体开始出现,并逐月增高,与同期对照组小鼠比较,3~6个月时血清抗Sm/RNP抗体和4~6个月时血清抗dsDNA抗体均明显增高(P<0.01),且血清抗Sm/RNP抗体的增高较抗dsDNA抗体更为显著;尿蛋白(≥+)于造模后3个月时开始出现,6个月时显著高于对照组小鼠(P<0.01);3个月时模型组小鼠开始出现关节病变,6个月时其阳性率达55%,明显高于对照组小鼠(P=0.004)。6个月后处死动物,解剖发现模型组大多数小鼠腹腔可见多少不等的脂肪肉芽肿结节;肾脏病理检查>50%的模型组小鼠出现不同程度肾小球肾炎病变伴毛细血管壁大量IC沉积。对照组除1只小鼠在造模6个月时出现轻度蛋白尿(+)外,未见其他病变。结论:Pristane能成功诱发BALB/c小鼠SLE,且建立的SLE模型稳定可靠。
吴正中吴俊英王芳李见江金群张坡
关键词:PRISTANE小鼠
IDO基因重组慢病毒载体构建及其转染hUCMSCs细胞的实验研究
2013年
目的构建共同表达人吲哚胺2,3-过氧化酶(IDO)基因和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的慢病毒表达载体,探讨其在人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)中的表达,为下一步利用高表达IDO的hUCMSCs移植治疗再生障碍性贫血奠定实验基础。方法将IDO基因克隆至慢病毒pGC-FU-EGFP表达载体中,通过PCR和测序鉴定获得连接正确的克隆。重组慢病毒表达载体质粒及辅助包装质粒共转染293T细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达情况;制备携带IDO基因的慢病毒Lentivirus-IDO,并测定重组慢病毒的滴度。用重组慢病毒以最佳MOI值感染hUCM-SCs作为实验组,以空载体转染的hUCMSCs(空载体组)及未转染的hUCMSCs(未转染组)作为对照,应用RT-PCR及Western blot法分别检测细胞中IDO mRNA及IDO蛋白水平的表达情况。结果经PCR及基因测序鉴定pGC-FU-EGFP-IDO重组慢病毒表达载体构建成功,包装慢病毒Lentivirus-IDO滴度为2×108 TU/mL。通过EGFP表达的阳性细胞数筛选其最适MOI为30,此时对细胞的转染效率可达到80%以上。RT-PCR检测显示实验组IDO mRNA表达阳性,空载体组和未转染组均为阴性;Western blot检测示实验组细胞内IDO蛋白表达阳性,空载体组和未转染组均为阴性。结论成功构建了人IDO基因的重组慢病毒表达载体,慢病毒Lentivirus-IDO能有效感染hUCMSCs,IDO蛋白可在hUCMSCs中长期、稳定表达。
李玉云李见王露翟玮玮吴正中张强
关键词:再生障碍性贫血人脐带间充质干细胞绿色荧光蛋白慢病毒载体
Pristane诱导狼疮模型鼠共刺激分子的表达变化被引量:2
2014年
探讨共刺激分子在Pristane诱导狼疮鼠体内的表达变化及意义。采用6~8周龄雌性BALB/c鼠单次腹腔注射0.5ml Pristane,对照组注射0.5ml PBS。通过尿蛋白试纸法检测尿蛋白含量;ELISA法检测外周血自身抗体(抗ds-DNA、南Sm/RNP)含量;HE染色评估病理学损伤;流式细胞术检测小鼠外周血、脾脏淋巴细胞表面共刺激分子CD28、CD40L/D40、CDl37/CDl37I。的表达;免疫组织化学法检测小鼠组织中共刺激分子CD28、CD40L、CDl37的表达。实验结果点示:与对照组小鼠相比,模型组小鼠出现多种SLE样临床症状和体征;模型组小鼠外周血和脾脏淋巴细胞表面共刺激分jCD28,一个月时表达增高,后逐渐下降至低于正常对照组(P〈0.05);CD40三个月时表达升高,六个月时表达降低至于正常对照组(P〈0.05),而CD40I。的表达变化无统计学意义(P〉0.05);CDl37/CDl37L三个月时表达增高并维持高表达状态至处死(P〈O.05);狼疮鼠肺组织中共刺激分子CD28、CD40L和CDl37呈现高表达状态,其他组织中变化并不明显。以上结果提示,Pristane诱导狼疮鼠体内共刺激分子表达发生异常变化,可能与其疾病的发生发展有密切关系,为临床治疗系统性红斑狼疮提供了研究基础。
王芳吴俊英吴正中张弛
关键词:共刺激分子CD28CD40LCD40
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