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结核杆菌H37Ra株侵袭对人肺上皮细胞结构的影响: 目的探讨结核杆菌侵袭人肺上皮细胞过程中引起的细胞结构变化情况。方法人肺上皮细胞A549细胞株在体外进行玻片爬片培养,加入结核杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb); 邵圣文段劲徐菊玲卢添宝周洪昌张慧

靶向CDC42基因小干扰RNA分子的制备: 2011年; 目的制备靶向CDC42基因的小干扰RNA分子(siRNA)并检测其对CDC42基因表达的抑制效果。方法针对CDC42基因的不同区域设计4条siRNA分子,体外转录法合成siRNA分子,将siRNA与CDC42基因真核表达载体共转染HEK293T细胞,Westernblot法测定CDC42蛋白含量。结果合成了siR1、siR2、siR3、siR4共4条siRNA分子,siR3对CDC42基因表达的抑制率为95%,siR1、siR2以及siR4对CDC42基因表达的抑制作用不明显。siR3对HEK293T细胞生长无明显影响。结论体外转录法制备的siR3分子能够高效特异地抑制CDC42基因表达。; 邵圣文薛利军周洪昌段劲王洁卢添宝徐菊玲; 关键词：小干扰RNA 体外转录

上颌第一前磨牙根管峡部的发生率及临床意义被引量：1: 2008年; 目的研究离体上颌第一前磨牙单根牙根尖1mm～6mm区域根管峡部的发生率和位置的情况。方法收集离体单根上颌第一前磨牙50颗,自根尖开始,片切去除1mm牙根后,用美蓝染色根切面,在显微镜下观察并记录各横截面的根管峡部的类型。在距根尖2、3、4、5、6mm处分别重复以上操作。结果单根的上颌第一前磨牙双根管率是54.00%;根管峡部发生率在距根尖4mm～6mm区较高。结论上颌第一前磨牙的根管峡部发生率在距根尖4mm水平最高。使用手术显微镜可提高对根管峡部的辨认和处理能力。; 陈伟段劲杨健; 关键词：前磨牙发生率

变形链球菌UA159磷酸蔗糖变位酶基因功能丧失菌株的构建: 目的:变形链球菌（Streptococcus mutans,S.mutans）被认为是人类龋病的主要病原菌,通过UA159磷酸蔗糖变位酶基因功能的丧失,研究变形链球菌UA159磷酸蔗糖变位酶基因的功能,对阐明其致龋的分子...; 段劲郭丽宏; 关键词：变形链球菌同源重组; 文献传递

一种口腔印模专用消毒剂对乙肝病毒活性及免疫原性的影响被引量：2: 2017年; 目的观察以一种主要成分为苄索氯铵和异丙醇的口腔印模专用消毒剂对口腔印模表面乙肝病毒活性及免疫原性的影响。方法使用消毒液对HBV污染的口腔印模进行喷雾消毒,检测HBs Ag含量和HBV-DNA含量,评价消毒效果;检测消毒前后HBV在体外诱导淋巴细胞分泌IFN-γ和IL-2含量,评价对HBV免疫能力的影响。结果喷雾消毒3 min和15 min,对HBs Ag和HBV-DNA的灭活效果明显高于消毒1 min组,灭活率分别为(98.8±1.2)%、(98.9±1.1)%和(99.3±1.1)%、(99.4±1.3)%。消毒3 min和15 min HBV诱导淋巴细胞IFN-γ相对表达量明显高于空白对照和未消毒组;与空白细胞组比较,未消毒组HBV诱导淋巴细胞IL-2相对表达量明显增加,而各消毒组的IL-2相对表达量未发生显著变化。结论该消毒剂喷涂口腔印模时,对HBV的最佳消毒时间为3 min。此时HBV仍然保持较强的免疫原性,能够诱导淋巴细胞IFN-γ表达水平上调,对IL-2表达水平无影响。; 马旭东张颖盛美春段劲; 关键词：口腔印模消毒液乙肝病毒

变形链球菌UA159磷酸蔗糖变位酶基因功能丧失菌株的构建被引量：4: 2008年; 目的:构建变形链球菌UA159磷酸蔗糖变位酶基因(phospho-sugar mutasegene,psm)功能丧失菌株,为进一步研究变形链球菌psm功能做准备。方法:将变形链球菌UA159 psm内部上、下游2段序列分别克隆至自杀质粒pFW5的2个多克隆位点(MCS-I和MCS-II),构建重组质粒,并经酶切和测序证实。利用同源重组(homologous recombination)原理,采用自然转化的方法,实现重组自杀质粒和变形链球菌UA159同源序列的等位交换(allelic exchange)。结果:经过PCR和测序分析,证实变形链球菌UA159基因组中的psm被重组质粒的基因(含有壮观霉素抗性)取代。结论:成功构建了变形链球菌UA159psm功能丧失菌株。; 段劲刘筱娣郭丽宏; 关键词：变形链球菌同源重组

丙型肝炎病毒F蛋白上调肝星形细胞胶原表达被引量：1: 2010年; 目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)的F蛋白对肝星形细胞生长及胶原蛋白表达的影响。方法将含有HCV f基因的pcDNA3.1-f质粒或pcDNA3.1空载体分别转染肝星形细胞株LX2,G418筛选后获得稳定转染的细胞,分别命名为LX-f细胞或LX-p细胞,MTT法测定细胞增殖情况,ELISA法检测细胞分泌的Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白含量。结果自培养24 h起,LX-f细胞各时间点的增殖率均大于LX-p细胞(P<0.01)。培养48 h时,LX-f细胞的Ⅰ型胶原蛋白及Ⅲ型胶原蛋白分泌量分别为(25.89±0.42)ng/ml和(18.21±0.49)ng/ml,明显高于LX-p细胞的(22.65±0.49)ng/ml和(15.29±0.62)ng/ml(P<0.01)。结论 HCV的F蛋白能促进肝星形细胞增殖,并上调细胞分泌Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白,诱发肝纤维化。; 王甘露邵圣文徐伯赢卢添宝段劲顾福萍; 关键词：丙型肝炎病毒 F蛋白肝星形细胞胶原

丙型肝炎病毒F蛋白诱导LX2肝星形细胞活化: 2011年; 目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)F蛋白对肝星形细胞(HSC)功能的影响。方法采用脂质体转染法将pcDNA3.1-f(实验组)或pcDNA3.1空质粒(对照组)转染HSC株LX2细胞,24、48 h后收集细胞,用Western blot法检测α-肌动蛋白(α-SMA)含量,RT-PCR法测定金属蛋白酶组织抑制因子1(TI MP-1)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)基因mRNA表达水平。结果转染后24、48 h,实验组LX2细胞α-SMA蛋白表达量以及TI MP-1基因mRNA水平均明显高于对照组,两组细胞MMP-2基因mRNA水平接近。结论 HCV F蛋白能够活化HSC,上调其TI MP-1基因转录水平,但不影响MMP-2基因转录水平,使MMP-2蛋白的有效酶活性下降,造成肝组织细胞外基质(ECM)降解速率减慢,进而发生纤维化。; 邵圣文徐伯赢卢添宝徐菊玲顾福萍段劲; 关键词：肝炎病毒属肝细胞金属蛋白酶类组织抑制剂金属蛋白酶类

豚鼠铜绿假单胞菌生物膜肺感染模型的建立被引量：1: 2010年; 目的建立豚鼠铜绿假单胞菌生物膜肺感染模型。方法 40只Hartley品系雄性豚鼠随机分为模型组和对照组,经气管注射含琼脂微颗粒的铜绿假单胞菌生物膜(模型组),或生理盐水(对照组)。第30天取肺和支气管组织,观察组织形态变化以及生物膜形成,从肺和支气管肺泡灌洗液(BALF)内分离细菌并测定其生物膜形成能力。结果模型组豚鼠肺泡壁萎缩,肺组织实变,炎症细胞聚集,脓肿形成,肺泡间隔炎症细胞浸润,肺不张;支气管纤毛上皮脱落,黏膜下淋巴细胞浸润,部分支气管管腔内炎症渗出。支气管以及肺泡内壁有细菌生物膜生长。左肺和BALF内分离的铜绿假单胞菌生物膜形成能力无差异(P=0.82)。结论豚鼠气管内注射含琼脂微颗粒的铜绿假单胞菌生物膜可建立可靠的生物膜肺感染模型,该模型适用于探讨细菌生物膜感染与宿主免疫系统之间的相互作用。; 邵圣文陈亮杨红霞钱金方段劲张建国张利棕; 关键词：生物膜动物铜绿假单胞菌

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段劲