高天明
- 作品数：125 被引量：411H指数：11
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金教育部长江学者奖励计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学理学更多>>
- TRPC对脂多糖诱导的星形胶质细胞TNF-α和NO分泌的影响
- 2011年
- 目的探讨TRPC对脂多糖诱导的星形胶质细胞TNF-α和NO分泌的影响。方法通过摇床筛选法纯化大鼠大脑皮层星形胶质细胞,用免疫荧光法鉴定其纯度。细胞培养至80%左右融合时加入0.5μg/mL脂多糖(LPS)后用维持液分别培养0、2、6、12、24和48 h,检测TNF-α和NO分泌情况,观察TRPC阻断剂2-APB和SKF96365对LPS诱导的TNF-α和NO分泌的影响,并与不加LPS的对照组比较。结果 PCR结果显示,星形胶质细胞能够表达TRPC1、TRPC3～7 mRNA。LPS作用2 h后TNF-α显著升高,一直持续到48 h(P<0.01),而LPS作用24和48 h后,NO的分泌显著增加(P<0.01)。10μmol/L 2-APB和5μmol/L SKF96365均可抑制LPS引起的TNF-α和NO增加(P<0.01),但与对照组相比差异仍有统计学意义(P<0.01)。结论抑制TRPC通道能够减少LPS诱导的TNF-α和NO分泌,提示TRPC通道可能参与脑内炎症性疾病过程中星形胶质细胞的活化。
- 李建华刘筱蔼黄建荣赵珅婷彭妙茹高天明
- 关键词：TRPC星形胶质细胞LPSTNF-Α
- 成年大鼠海马CA1区锥体神经元外向整流氯离子单通道特性被引量：7
- 2003年
- 采用膜片钳内面向外式技术 ,在急性分离成年大鼠海马CAl区锥体细胞上记录到了外向整流氯离子通道(outwardlyrectifyingchloridechannel ,ORCC) .长时间去极化 (≥ 60mV)刺激后 ,在 3 0 %的游离膜片上记录到有外向整流特性的单通道氯电流 ,膜电位在 -60mV到 0mV之间的单通道电导为 (16 58± 1 54) pS (n =10 ) ,而在 0mV到 + 60mV之间电导为 (40 92± 3 17)pS .通道开放概率有明显的电压依赖性 (膜电位 -60mV时 ,Po=0 44± 0 12 ;膜电位为 + 60mV时 ,Po=0 86± 0 0 6,n =10 ) .在对称Cl- 浓度 (150mmol/L)时 ,通道翻转电位为 (-4 17± 1 84)mV .当溶液中部分NaCl被葡萄糖酸钠替代后 ,翻转电位为 :(-3 4 2 3± 4 86)mV ([Cl- ] i/ [Cl- ] o=(3 0mmol/L) / (150mmol/L) ) ,接近氯离子通道的理论值 ,这表明通道具有氯离子选择性 .浴槽液中分别加入氯通道阻断剂DIDS和SITS可以使 + 4 0mV的通道开放概率从 (0 83± 0 0 6)和(0 86± 0 0 6)分别降低到 (0 12± 0 0 5)和 (0 13± 0 0 4) (n =5) ,冲洗后可使开放概率基本恢复 .上述研究结果显示 。
- 李建国李晓明胡平王颖李晓文乔健天高天明
- 关键词：氯离子通道膜片钳海马锥体神经元
- 一种与人表皮生长因子受体III型突变体特异性结合的核酸适配子及其应用
- 本发明公开了一种与人表皮生长因子受体III型突变体特异性结合的核酸适配子及其应用。本发明的核酸适配子其核苷酸序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示的任意一...
- 张兴梅伍锡栋谭燕梁惠玉高天明
- 文献传递
- BK_(Ca)通道的表达降低细胞蛋白酪氨酸磷酸化水平
- 2006年
- 目的探讨BKCa通道对细胞蛋白酪氨酸磷酸化水平的调节作用。方法观察转染 BKCa通道及共转染BKCa通道与v-Src对HEK293细胞蛋白酪氨酸磷酸化水平的影响。比较BKCa通道激动剂NS1619和阻断剂paxilline对培养海马神经元蛋白酪氨酸磷酸化水平的影响。结果 HEK293细胞表达BKCa通道后细胞蛋白酪氨酸磷酸化水平降低,同时BKCa通道能够降低转染v-Src 后的细胞蛋白酪氨酸磷酸化水平。BKCa通道激动剂NS1619能够降低海马神经元蛋白酪氨酸磷酸化水平,阻断剂paxilline能增加细胞蛋白酪氨酸磷酸化水平。结论 BKCa通道的表达可以降低细胞蛋白酪氨酸磷酸化水平。
- 李勃兴陈明黄潋滟赵苗高天明
- 关键词：大电导钙激活钾通道V-SRC
- 氧化还原对成年大鼠海马CA1区锥体神经元外向整流氯通道的调控作用被引量：2
- 2011年
- 采用膜片钳内面向外式记录技术,研究急性分离成年大鼠海马CAl区锥体神经元外向整流氯离子通道的氧化还原调控。发现细胞内侧给予氧化剂DTNB(5,5'-dithiobis-2-nitrobenzoic acid),可显著减弱氯通道的活动,IC50值为(28.05±2.42)μmol/L;还原剂DTT(dithiothreitol)对氯通道没有明显影响,但可逆转DTNB引起的抑制效应。说明DTNB不改变通道电导,其引起的通道活动减弱是由氯通道关闭时间延长而开放时间缩短所致。研究还发现,另一对氧化型和还原型谷胱甘肽具有与DTNB和DTT同样的效应。本研究结果显示,成年大鼠海马CA1区锥体神经元外向整流氯通道可以被细胞内氧化还原剂所调控。
- 李建国乔健天高天明
- 关键词：海马膜片钳
- 短暂脑缺血大鼠海马CA1区锥体细胞大电导Ca^(2+)依赖K^+通道活动降低(英文)被引量：6
- 2002年
- 短暂脑缺血可对随后的损伤性脑缺血表现出明显的耐受 .有研究表明大电导Ca2 + 依赖K+ (BKCa)通道活动增强参与了缺血性脑损伤 .采用膜片钳的内面向外式 ,观察了 3min短暂脑缺血后 6h、 2 4h以及 4 8h大鼠海马CA1区锥体细胞上BKCa通道活动的动态变化 .短暂脑缺血后BKCa通道的单通道电导和翻转电位均未见明显变化 ,但通道的开放概率则在缺血预处理后的前 2 4h内显著降低 .通道动力学分析显示通道关闭时间变长是短暂脑缺血后通道活动降低的主要原因 ,因为通道的开放时间未发生明显变化 .
- 胡平李晓明李建国王颖黄巧冰高天明
- 关键词：短暂脑缺血CA1区锥体细胞
- 一氧化氮合成酶在培养海马神经细胞上的分布及其激活对细胞兴奋性的影响被引量：7
- 2006年
- 目的:观察一氧化氮合成酶(NOS)在培养海马神经细胞上的分布情况和酶激活时对细胞兴奋性的影响。方法:NOS的分布情况采用免疫荧光标记方法,细胞兴奋性的变化采用膜片钳全细胞的模式来记录膜电位的变化。结果:发现两种结构型NOS包括nNOS和eNOS均分布在神经元上。另外,eNOS还分布在胶质细胞上。当给予NOS的底物L-精氨酸时,海马神经元的膜电位出现去极化,并产生动作电位。结论:以上结果显示NOS广泛分布在海马神经细胞中,当其激活时对海马神经元有兴奋作用。
- 简葵欢陈明冯文龙高天明
- 关键词：一氧化氮合成酶海马免疫荧光标记
- L型钙通道在“李氏方”水提液保护神经元过程中的作用及该水提液最佳剂量
- 2006年
- 目的:观察L型钙通道在“李氏方”保护神经元中的作用,并找出“李氏方”水提液最佳作用剂量。方法:实验于2004-09/2005-08在南方医科大学神经生物学教研室完成。①用MTT法观察不同质量浓度0(对照组),0.0625,0.125,0.25,0.5,1.0,2.0,4.0,8.0g/L“李氏方”(主要成分有龟甲、地龙、石菖蒲、当归及酸枣仁等)水提液分别作用正常条件下培养了9d的新生大鼠海马神经元24h的细胞成活率;用Hoechst33258荧光染料标记凋亡的细胞,镜下数三四个视野的总细胞及凋亡细胞数,计算细胞凋亡率(凋亡细胞数占细胞总数的百分比)。②借助于共聚焦显微镜和钙荧光指示剂Fluo-3/AM,在海马神经元细胞培养至第8天加处理因素[单纯加入5μmol/L的L型钙通道阻断剂尼氟的平;单纯加入不同质量浓度的“李氏方”水提液及尼氟的平(5μmol/L)+不同质量浓度“李氏方”水提液共同作用]继续培养24h用于实验和细胞培养至第9天观察干扰因素的急性作用。用钙成像技术测定培养的神经元胞浆的荧光值(用30mmol/L的氯化钾诱导细胞内钙的变化)及钙浓度。③借助于膜片钳全细胞记录技术,观察“李氏方”水提液对L型钙电流的影响。④计量资料差异性比较采用方差分析中的LSD和SNK分析。结果:①0.0625～2g/L的质量浓度范围“李氏方”水提液明显提高正常培养下的海马神经元的成活率,浓度为0.5g/L细胞成活率增加最大。经5μmol/L的尼氟的平预处理后,“李氏方”水提液增加神经元成活率的效应明显降低。②“李氏方”水提液明显增加L型钙电流,经尼氟的平预处理后,“李氏方”水提液增加L型钙电流的效应显著降低。③正常培养条件下的海马神经元胞浆游离钙浓度在(75.67±8.65)nmol/L(对照组)。“李氏方”水提液作用24h后,细胞内游离钙浓度提高到(126.35±9.35)nmol/L,明显高于正常培养条件下的(P<0.05)。经尼氟的平作用24h,�
- 胡德辉田映红李生海李子中高天明
- 关键词：细胞学神经元药物作用钙通道水提液L型钙通道
- 大鼠海马组织线粒体的蛋白质组学分析方法的建立
- 2008年
- 为了建立蛋白质组学技术平台用于分离分析大鼠海马组织线粒体的蛋白质组成,选用成年雄性Wistar大鼠使用差速离心法分离提纯大鼠海马组织线粒体,经透射电子显微镜观察分析、免疫印迹检测细胞器标志物蛋白含量后确定线粒体提纯物的质量;将线粒体制备成蛋白样品,经双向电泳分离、染色、扫描获得二维蛋白斑点图后,切取含蛋白斑点的胶块处理后进行基质辅助的飞行时间生物质谱分析,所得数据经检索匹配识别出蛋白信息。获得的大鼠海马组织线粒体提纯物在透射电子显微镜下呈现为大量形态完整、典型的线粒体,夹杂少量其它成分和线粒体碎片;免疫印迹结果显示线粒体提纯物蛋白中含有大量稳定表达的线粒体标志蛋白COX-IV;线粒体提纯物中没有检测到细胞核标志蛋白histone-1。双向电泳分离得到的二维蛋白斑点图谱匹配率为77.54%±5.51%,并成功鉴定识别出胶中的线粒体蛋白丙酮酸脱氢酶alpha亚基。上述结果表明已经成功建立了缺血敏感脑区海马组织的线粒体蛋白质组学分析方法,所得线粒体纯度高、蛋白样品重复性高、电泳分离效果好、与生物质谱鉴定技术匹配良好,为开展脑缺血的线粒体蛋白质组学研究打下了基础。
- 陈亮严华成王璞李树基朱心红高天明
- 关键词：蛋白质组学缺血性脑卒中线粒体海马
- 一种与人表皮生长因子受体III型突变体特异性结合的核酸适配子及其应用
- 本发明公开了一种与人表皮生长因子受体III型突变体特异性结合的核酸适配子及其应用。本发明的核酸适配子其核苷酸序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4或SEQ I...
- 张兴梅谭燕伍锡栋梁惠玉高天明
- 文献传递
